【正文】 蘭氏陽性菌 。菌體顯紅色的為革蘭氏陰性菌。 SRB為革蘭氏陰性菌 二、厭氧型為生物的培養(yǎng) 采用 Hungate厭氧操作技術(shù)、絕跡稀釋法以及 “ 滾管 ” 培養(yǎng)對樣本進(jìn)行分離，多次純化獲得純菌株 SRB。 具體方法：向改良后 Starkey培養(yǎng)基中加入 %的刃天青溶液，培養(yǎng)基煮沸后，加入 L半光鹽酸鹽 ，通入高純氮?dú)怛?qū)氧 30min， 121℃ 滅菌 20min，固體培養(yǎng)基加入 16%的瓊脂糖。 單獨(dú)配 3%的 FeSO4?(NH4)2 SO4 厭氧 SRB菌株于液體培養(yǎng)基中 37℃ 培養(yǎng) 48h 后 , 在 Olympus COVER018光學(xué)顯微鏡下革蘭氏染色觀察。 方法同 SRB菌， PH值最好在 7， 藥品： (NH4 ) 2SO4 3 g, KCl g, K2HPO4 g, M gSO4?7H2O , Ca (NO3 )2 g, FeSO4?7H2O g, 蒸餾水 1 000 mL 121℃ 滅菌 15 m in。 恒溫?fù)u床培養(yǎng)箱振蕩培養(yǎng) 由于此項(xiàng)操作開始時(shí)間較晚，至實(shí)習(xí)結(jié)束，菌落還未完成一個(gè)完整周期的培養(yǎng)。 三、水生細(xì)菌的計(jì)數(shù) 取樣：先清洗一個(gè)容量為 100毫升的取樣瓶或燒杯。取樣前輕輕振蕩試管攪拌，待分布均勻后，立即用注射器針管取樣，取樣的量為 1毫升。加蒸餾水 100 倍稀釋。 樣品放于計(jì)數(shù)板：放置前必須將血球計(jì)數(shù)板和蓋玻片清洗干凈、擦干，不能有油污染和雜質(zhì)。將血球計(jì)數(shù)板平放在桌子上，蓋好蓋玻片 。然后把樣品瓶輕輕搖動(dòng)幾下，菌分布均勻，并立即用干凈的微吸管取樣品，迅速把微細(xì)吸管放到蓋玻片的邊緣處，輕壓微細(xì)吸管的橡皮帽，使樣品流入計(jì)數(shù)板內(nèi)。注意控制樣品流入量，不能過多，過多則流入到溝內(nèi) 。也不能過少，過少則計(jì)數(shù)時(shí)不準(zhǔn) 確，應(yīng)充滿畫線方格及其周邊部分。還應(yīng)注意蓋玻片下不能有氣泡存在，否則會造成計(jì)數(shù)不準(zhǔn)確。樣品吸入血球計(jì)數(shù)板后，稍停 1分鐘，待細(xì)菌沉降在玻片表面上再在顯微鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)。 計(jì)數(shù)：計(jì)數(shù)中央大格的 4個(gè)角的中格，每個(gè)中格有 25 個(gè)小格，逐一計(jì)數(shù)， 4個(gè)中格相加共計(jì)數(shù) 100個(gè)小格。計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)從計(jì)數(shù)框一角開始，在計(jì)數(shù)框邊緣的標(biāo)本應(yīng)按 計(jì)上不計(jì)下、計(jì)左不計(jì)右 的原則，計(jì)數(shù)出細(xì)菌的總量后，按下式計(jì)算出每毫升菌液中的細(xì)菌數(shù)量：細(xì)菌數(shù)量 =100個(gè)小格的細(xì)菌數(shù) 410000 稀釋倍數(shù)。 注意每個(gè)樣品最少重復(fù)計(jì)數(shù)兩次，然后取其平均 值 2 895=179(47,35,30,39,28)*5 1595=319(12,30,153,57,67)*5 (895+1595)/2*10000*100=1245*1000000 8 815=163(50,50,20,32,11)*5 305=61(16,11,12,12,11)*5 (815+305)/2*10000*100=560*1000000 1)稱取樣品 1g，放入 90ml無菌水中，振蕩，讓菌充分分散，然后按十倍稀釋法將其制成 101稀釋液。 2)將 26支裝有培養(yǎng)液的試管按縱 3橫 8的方陣排列于試管架上，第一縱列的 3支試管上標(biāo)以 102，第二縱列的 3支試管上標(biāo)以 103?? 第八縱列的 3支管上際以 109，另外 2支試管留作對照。 3) 用無菌注射器針管按無菌操作要求吸取 101的土壤稀釋液各 lml放入編號 102的 3支試管中，再從 102稀 釋液各 lml放入編號 103的 3支試管中，依次向后稀釋。對照管不加稀釋液。 4)將所有試管置 28℃ 培養(yǎng) 8天后觀察結(jié)果。 對照相關(guān)的 MPN計(jì)數(shù)表查尋 MPN計(jì)數(shù)結(jié)果 *100000 cfu/ml 一點(diǎn)建議： 在用電極法測定出水各項(xiàng)指標(biāo)的時(shí)候，曾出現(xiàn)硝酸根一直無法檢測或是與預(yù)期濃度相差很多的情況，懷疑在進(jìn)如反應(yīng)器前某些微生物分解白糖時(shí)將硝酸鈉作為氮源利用，受師兄的啟發(fā)提出新增加一個(gè)泵將硝酸鈉和其它進(jìn)水成分分開泵入，之后的測驗(yàn)效果還不錯(cuò) 三個(gè)星期的實(shí)習(xí)生活讓我能把學(xué)到的知識得以應(yīng)用，并且學(xué)到了一些在校園內(nèi)無法深刻領(lǐng)悟的東西 ?? 一些感悟 ?? ，但絕不可以忽略真誠的力量。 第一天去單位實(shí)習(xí)，我懷著惴惴不安的心情，之前聽過很多關(guān)于實(shí)習(xí)生的傳聞，說 他們在單位要么被當(dāng)成透明人，要么就凈干些雜活，于是有點(diǎn)擔(dān)心自己會和他們一樣。 踏進(jìn)實(shí)驗(yàn)室，只見幾個(gè)陌生的臉孔。我微笑著和他們打招呼。從那天起，我養(yǎng)成了一個(gè)習(xí)慣，每天早上見到他們都要微笑的說聲 早晨 或 早上好 ，那是我心底真誠的問候。我總覺得，經(jīng)常有一些細(xì)微的東西容易被我們忽略，比如輕輕的一聲問候，但它卻表達(dá)了對同事對朋友的關(guān)懷，也讓他人感覺到被重視與被關(guān)心。 僅僅幾天的時(shí)間，我就和同事們打成一片，我擔(dān)心變成 透明人 的事情根本沒有發(fā)生。 他們把我當(dāng)朋友，也愿意把工作分配給我。 我想，應(yīng)該是我的真誠，換取了同事的信任。 ，把主動(dòng)權(quán)握在自己手中。 我想很多人和我一樣，剛進(jìn)實(shí)驗(yàn)室的時(shí)候，都做過類似刷片子洗瓶子搬蒸餾水的 雜活 。 或許同事們認(rèn)為你是小字輩，要從小事做起，但有些時(shí)候，是因?yàn)樗麄冃闹袥]底，不知道你能做什么。 當(dāng)你只有技術(shù)沒有 idea 時(shí)，只能被派去做一些雜活 。而當(dāng)你有自己的 idea能獨(dú)當(dāng)一面時(shí)，就會被委以挑戰(zhàn)性的重任。因?yàn)?，技術(shù)人人都可以學(xué)，而對于自己的 idea你則擁有 專利權(quán) 因此，不要害怕將來從事的工作需要掌握新的技術(shù)，其實(shí)，技術(shù) 不難學(xué)到手，難的是在工作中時(shí)時(shí)讓自己的腦袋運(yùn)轉(zhuǎn)，激蕩自己的獨(dú)特的思想和想法。 同時(shí)做 雜活 是工作的必需，有些東西不能選擇，有些東西卻可以選擇。份內(nèi)的工作當(dāng)然要認(rèn)真完成，但勇敢的 主動(dòng)請纓 卻能為你贏得更多的機(jī)會。只要勤問、勤學(xué)、勤做，就會有意想不到的收獲。 我在實(shí)習(xí)中逐漸變得 勇敢 。雖然開始也會有顧忌，怕 主動(dòng)出擊 會招惹 不知天高地厚 的蔑視。但事實(shí)告訴我，應(yīng)該對自己有信心，應(yīng)該有勇氣去嘗試。即便在嘗試中失敗，也能讓自己成長，沒有鍛煉的機(jī)會，談何積累和成長 ?而這一切，只能靠自己去爭取。等待 ，只能讓你在沉默中消亡 。只有主動(dòng)，才能為自己創(chuàng)造良機(jī)。 在我看來，不只實(shí)習(xí)的工作是這樣，其它的行業(yè)也應(yīng)該是這樣。只有這樣，你才能在工作中突出自己，顯現(xiàn)自己的價(jià)值。