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2025-08-22 03:17本頁面
【正文】 大多數(shù)酶切位點的甲基化不影響切割，而有些會影響，如XbaI, BclI等。而且甲基化只發(fā)生在特定序列，以XbaI為例，只有在位點序列旁出現(xiàn)GA或TC，該XbaI位才會被甲基化。而要解除這種限制修飾作用通常有兩種方法：（1）選用上述酶的同功酶，如Sau3AI，DNA識別切割位點與MboI相同；但不受甲基化影響；（2）利用甲基化酶缺失的受體細胞進行DNA的制備， JM110和鏈霉菌等，前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出，而后者細胞內(nèi)本就沒有甲基化酶，從這些細胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。 JM110要排除dam,dcm甲基化的影響，需要用特定的dam,dcm的菌株，如JM110如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株產(chǎn)生的質粒，則不會被甲基化.
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