最新探究性設(shè)計(jì)試驗(yàn)-資料下載頁(yè)
2025-06-30 03:54本頁(yè)面
【正文】 kg。2．藥品與器材25％烏拉坦溶液，葡萄糖溶液，生理鹽水，腎上腺素，%肝素，3%戊二醛，TNFα檢測(cè)試劑盒，IL6檢測(cè)試劑盒等。兔手術(shù)臺(tái)，電子稱，天平，生物信號(hào)處理系統(tǒng)，動(dòng)物呼吸機(jī)，顯微鏡，酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、電動(dòng)勻漿機(jī)、手術(shù)器械，動(dòng)脈夾，動(dòng)脈插管，氣管插管，注射器。（四）實(shí)驗(yàn)基本過(guò)程1．按照實(shí)驗(yàn)要求，以及提供的動(dòng)物、實(shí)驗(yàn)器材與藥品，自主設(shè)計(jì)不同類型缺血再灌注損傷的病理模型（含原理和觀察指標(biāo)確立）。（1）立題：以實(shí)驗(yàn)小組為單位，根據(jù)以往學(xué)的知識(shí)和預(yù)習(xí)相關(guān)章節(jié)的內(nèi)容，或查閱有關(guān)文獻(xiàn)資料，開(kāi)展集體醞釀、討論確立缺血再灌注損傷實(shí)驗(yàn)方案（包括觀察指標(biāo)和抗再灌注損傷措施）。但是，一定要注意動(dòng)物實(shí)驗(yàn)立題的科學(xué)性、現(xiàn)實(shí)性和可操作性，以及實(shí)驗(yàn)思路的新穎和獨(dú)特性。（2）方案設(shè)計(jì)的格式與內(nèi)容：每實(shí)驗(yàn)小組在缺血再灌注損傷實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的基礎(chǔ)上，依據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康木幹瞥鰟?dòng)物實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)方案。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案的內(nèi)容應(yīng)詳細(xì)和具可操作性，具體的內(nèi)容和格式要求如下：①題目；②立題依據(jù)（實(shí)驗(yàn)的目的、原理）；③實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品種與數(shù)量；④實(shí)驗(yàn)器材（型號(hào)、規(guī)格和數(shù)量）與藥品（規(guī)格、劑型和使用量），包括特殊儀器與藥品需要（器材型號(hào)、規(guī)格和數(shù)量與藥品規(guī)格、劑型和使用劑量）；⑤實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（方法和操作步驟），以及觀察指標(biāo)；⑥實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)果記錄表格制作；⑦預(yù)期結(jié)果；⑧注明參閱文獻(xiàn)資料。2．缺血再灌注的動(dòng)物模型復(fù)制（1）心臟缺血再灌注模型制備：1）動(dòng)物分組與處理：將家兔分成A、B動(dòng)物，A為缺血再灌注的對(duì)照動(dòng)物，B為去甲腎上腺素預(yù)處理動(dòng)物。2）用20%烏拉坦（5ml/kg）靜脈麻醉，固定于兔臺(tái)。頸部去毛，手術(shù)分離氣管和右頸總動(dòng)脈，并進(jìn)行氣管插管和動(dòng)脈插管。氣管插管與呼吸機(jī)連接（潮氣量50ml，吸呼比2: 1, 呼吸頻率40次/min）；動(dòng)脈插管與血壓換能器連接；四肢連接心電圖導(dǎo)聯(lián)，記錄心電圖。3）剪去胸壁左側(cè)被毛，沿胸骨左緣2～4肋剪斷肋軟骨，打開(kāi)胸腔。開(kāi)胸后立即行正壓呼吸。4）用眼科剪剪開(kāi)心包，暴露心臟，用止血鉗輕輕提起左心耳，于冠狀動(dòng)脈左支起始部約2mm處用縫合針繞其穿一無(wú)創(chuàng)縫合線，穩(wěn)定15min。，各持續(xù)3min。待心率基本穩(wěn)定后，墊線結(jié)扎冠脈左支，20min后松開(kāi)結(jié)扎線，再灌注30min。復(fù)制模型的可靠性用連續(xù)監(jiān)測(cè)之ECGⅡ?qū)?lián)的變化來(lái)判斷，以ST段抬高為心肌缺血存在，以深大Q波出現(xiàn)確定心肌壞死形成。（見(jiàn)圖773）圖72 缺血再灌注損傷ECGⅡ?qū)?lián)圖71 正常ECGⅡ?qū)?lián)（2）肝缺血再灌注模型制備：1）家兔術(shù)前禁食12h。2）動(dòng)物分組與處理 ：將家兔分成A、B動(dòng)物，A為缺血再灌注損傷的對(duì)照動(dòng)物，B為缺血再灌注損傷的干預(yù)與治療動(dòng)物。3）用戊巴比妥鈉（3%）30mg/kg，靜脈注射麻醉，固定于兔臺(tái)。頸部去毛，手術(shù)分離氣管和右頸總動(dòng)脈，并進(jìn)行氣管插管和動(dòng)脈插管。4）剪去腹部被毛，自腹正中切口入腹，于尾狀葉上方用直角鉗游離尾狀葉與其它葉（左側(cè)葉、左中央葉、右中央葉）之間的管道。用血管鉗一并夾住血管和膽管。鉗夾后，尾狀葉保持原色不變，其它肝葉可見(jiàn)色變成暗黃紫色，10min后可見(jiàn)肝略為腫脹。與尾狀葉完全不同。鉗夾15min后松開(kāi)血管鉗，待肝臟顏色恢復(fù)原色（轉(zhuǎn)紅）即為再灌注，關(guān)腹。然后分別干預(yù)和觀察。（3）腎缺血再灌注模型制備：1）動(dòng)物分組與處理 ：將家兔分成A、B動(dòng)物，A為缺血再灌注損傷的對(duì)照動(dòng)物，B為缺血再灌注損傷的干預(yù)與治療動(dòng)物。2）用戊巴比妥鈉（3%）30mg/kg，靜脈注射麻醉，固定于兔臺(tái)。頸部去毛，手術(shù)分離氣管和右頸總動(dòng)脈，并進(jìn)行氣管插管和動(dòng)脈插管。3）剪去腹部被毛，自腹正中切口入腹。摘除左側(cè)腎臟（注意血管結(jié)扎與止血），取下的左腎下極組織放入3%戊二醛中固定。找到右側(cè)腎臟的腎動(dòng)脈，分離腎動(dòng)脈和夾閉血流1h，松開(kāi)夾子恢復(fù)血液再灌注。術(shù)后6h擊昏動(dòng)物，取右腎下極組織放入3%戊二醛中固定。（4）腸缺血再灌注模型制備：1）動(dòng)物分組與處理 ：將家兔分成A、B動(dòng)物，A為缺血再灌注損傷的對(duì)照動(dòng)物，B為缺血再灌注損傷的干預(yù)與治療動(dòng)物。2）用戊巴比妥鈉（3%）30mg/kg，靜脈注射麻醉，固定于兔臺(tái)。頸部去毛，手術(shù)分離氣管和右頸總動(dòng)脈，并進(jìn)行氣管插管和動(dòng)脈插管。3）剪去腹部被毛，用紗布將內(nèi)臟輕輕地向左推移，見(jiàn)到右腎門垂直向腹主動(dòng)脈處，于左側(cè)腎上腺右上方找到橫向行走的系膜上動(dòng)脈，并分離出系膜上動(dòng)脈（避免誤傷靜脈），用縫合針繞其穿一無(wú)創(chuàng)稍粗的縫合線備用。動(dòng)物穩(wěn)定15min后，結(jié)扎細(xì)線1h造成腸缺血（注意不要打死結(jié)），松開(kāi)結(jié)扎線恢復(fù)其血流即再灌注。3．按實(shí)驗(yàn)的自行設(shè)計(jì)方案完成動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作步驟和指標(biāo)觀察。（七）討論分析1．對(duì)實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒃磉M(jìn)行闡釋，實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行總結(jié)與歸納。2．對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的各種觀察指標(biāo)變化進(jìn)行分析，探討其變化的發(fā)生機(jī)制。3．如實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想，請(qǐng)分析其失敗的原因和提出改進(jìn)的措施。（八）時(shí)間節(jié)點(diǎn)1．完整、詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案必須在實(shí)驗(yàn)課的前一周完成，設(shè)計(jì)方案不合格者將取消實(shí)驗(yàn)資格。2．實(shí)驗(yàn)操作時(shí)間必須控制在1天以內(nèi)。3．一周后以小組為單位用多媒體匯報(bào)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論分析。（九）附錄及注意事項(xiàng)1．家兔正常生理指標(biāo)(見(jiàn)第二章)。2．移動(dòng)內(nèi)臟時(shí)，動(dòng)作要輕柔，不要認(rèn)為過(guò)度牽拉損傷腸管，臟器不要移出腹腔外并用紗布蓋好。3．實(shí)驗(yàn)過(guò)程不得危害人體健康和污染環(huán)境。 （李稻） 17
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