【正文】 據(jù)；若估計(jì)參考限99％的可信區(qū)間，則需要1 98個(gè)參考值數(shù)據(jù)。 5．7．2離群值的處理：數(shù)據(jù)中的疑似離群點(diǎn)可通過(guò)1／3規(guī)則進(jìn)行判斷，即將疑似離群點(diǎn)和其相鄰點(diǎn)的差值D和數(shù)據(jù)全距R相除，求D／R比值，D／R=1／3為臨界值，若．D／R≥I／3則該疑似離群點(diǎn)為離群值，應(yīng)予刪除。若有兩個(gè)或兩個(gè)以上的疑似離群點(diǎn)，可以將較小的疑似離群點(diǎn)作上述處理，若D／R≥1／3，則均為離群值，全部刪除；若．D／R1／3，則保留所有數(shù)據(jù)。若有離群點(diǎn)被剔除，應(yīng)補(bǔ)充至1 20個(gè)數(shù)據(jù)。 5．7．3參考值的分組：依據(jù)臨床意義和該項(xiàng)目的生理變異，并須作Z檢驗(yàn)確定分組后的均值間差異有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義來(lái)確定參考值數(shù)據(jù)是否需要分組。將原1 20個(gè)參考值數(shù)據(jù)分為兩組(如按性別或年齡段)，每組最好接近60例，按下式求Z值，比較兩組間均值的差異有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。公式如下： 式中， 和 分別為兩組參考值數(shù)據(jù)各自的均值，S2和822分別為兩組各自的方差，n1和n2為兩組各自的參考值個(gè)數(shù)。然后進(jìn)行Z檢驗(yàn)。統(tǒng)計(jì)的Z數(shù)值必須與“臨界值進(jìn)行比較。“臨界值Z’的計(jì)算公式如下： 此外，如果標(biāo)準(zhǔn)差s2較大，應(yīng)檢查它是否大于1．5倍的s1；或者，s2／(s2一S1)是否小于3。若計(jì)算得出的Z值超過(guò)Z’，則應(yīng)考慮分組。 5．7．4繪制分布圖，了解數(shù)據(jù)的分布特性。若有數(shù)據(jù)呈高斯正態(tài)分布或者數(shù)據(jù)經(jīng)轉(zhuǎn)換后呈高斯分布，可按X+1．96s表示95％數(shù)據(jù)分布范圍，或者X+2．5 8s表示99％數(shù)據(jù)分布范圍等確定參考限和參考區(qū)間。若數(shù)據(jù)不呈高斯正態(tài)分布則用非參數(shù)法處理。最常見(jiàn)的是以百分位數(shù)法確定2．5％和97．5％位數(shù)的參考限，以此確定參考區(qū)間。 5．8生物參考區(qū)間的驗(yàn)證程序 ’若實(shí)驗(yàn)室直接采用國(guó)家權(quán)威機(jī)構(gòu)或權(quán)威刊物頒發(fā)的適合實(shí)驗(yàn)室的生物參考區(qū)間或引用試劑供應(yīng)商提供的生物參考區(qū)間，需用20個(gè)參考值數(shù)據(jù)對(duì)所引用的生物參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證。20個(gè)參考個(gè)體應(yīng)合理地代表本實(shí)驗(yàn)室選擇的健康總體，并且滿足其排除和分組標(biāo)準(zhǔn)。依照本實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程檢測(cè)標(biāo)本，檢測(cè)結(jié)果用“1／3規(guī)則進(jìn)行離群值檢驗(yàn)。發(fā)現(xiàn)離群值均應(yīng)剔除，并用新的參考個(gè)體代替，以確保20例測(cè)試結(jié)果不含離群值。若20例參考個(gè)體中不超過(guò)2例(或1 0％的結(jié)果)的觀測(cè)值在原始報(bào)告的參考限之外，廠商或提供參考區(qū)間的實(shí)驗(yàn)室報(bào)告的95％參考區(qū)間可以接收。若3例以上超出界限，再選擇20個(gè)參考個(gè)體進(jìn)行驗(yàn)證，若少于或等于2個(gè)觀測(cè)值超過(guò)原始參考限，廠商或提供參考區(qū)間的實(shí)驗(yàn)室報(bào)告的參考區(qū)間可以接收。若仍有3個(gè)觀察值超出參考限，重新檢查所用的分析程序，考慮兩個(gè)樣本總體生物學(xué)特征上是否存在差異，并且考慮建立自己的參考區(qū)間。 第七節(jié) 檢驗(yàn)方法的選擇和評(píng)審程序 1 目的規(guī)范實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方法的選擇和評(píng)審過(guò)程，以保證所選用的檢驗(yàn)方法和檢驗(yàn)程序能滿足臨床與患者的需求，確認(rèn)其符合相應(yīng)的用途。 2適用范圍 實(shí)驗(yàn)室擬開(kāi)展的檢驗(yàn)項(xiàng)目和已開(kāi)展的所有檢測(cè)項(xiàng)目3 職責(zé) 申請(qǐng)者負(fù)責(zé)檢驗(yàn)項(xiàng)目開(kāi)展評(píng)審表的填寫(xiě)。 技術(shù)負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)組織技術(shù)管理層對(duì)申請(qǐng)的項(xiàng)目進(jìn)行評(píng)審表。 。 3．4生化科主任負(fù)責(zé)擬開(kāi)展項(xiàng)目檢驗(yàn)方法的選擇和評(píng)價(jià)。4 基本概念檢驗(yàn)方法的選擇和評(píng)價(jià)過(guò)程是為了了解選方是否具有足夠的分析重復(fù)性和準(zhǔn)確度來(lái)產(chǎn)生結(jié)果，使其為臨床所用。建立檢測(cè)的需求可以是臨床醫(yī)師的建議，或新方法與已存在的方法相比，將提供改進(jìn)的準(zhǔn)確度或精密度，或是用更有效的方法替換老的、勞動(dòng)強(qiáng)度大的檢測(cè)程序。 實(shí)踐新方法前的要求在決定是否將新的方法或儀器在某一實(shí)驗(yàn)室使用前，以下因素必須首先考慮：標(biāo)本類(lèi)型、樣品量、分析能力、周轉(zhuǎn)時(shí)間、試驗(yàn)菜單、標(biāo)本處理、分析批的大小、人員技能要求、每一個(gè)檢測(cè)的成本、校準(zhǔn)方法與頻率、隨即處理能力；指控方法、空間需求（包括試劑儲(chǔ)存）、廢物處理要求以及化學(xué)危險(xiǎn)物和安全等因素。如候選方法的實(shí)際情況和實(shí)驗(yàn)室的要求不一致，該方法不應(yīng)采用。 性能參數(shù)與方法或儀器有關(guān)的性能參數(shù)包括準(zhǔn)確度、分析范圍、分析回收、分析靈敏度、分析特異性、空白讀數(shù)、檢出限、干擾、精密度、試劑穩(wěn)定性等，用以上參數(shù)來(lái)評(píng)價(jià)所選方法的性能，并將其結(jié)論作為臨床使用是否可接受的基礎(chǔ)。性能要求取決于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的預(yù)期用途，因此，可產(chǎn)生不同的準(zhǔn)確度和精密度的目標(biāo)。方法的選擇和評(píng)價(jià)是執(zhí)行新方法過(guò)程的關(guān)鍵步驟，是在進(jìn)入常規(guī)分析前能夠客觀地選擇和評(píng)價(jià)分析方法。圖671為方法應(yīng)用過(guò)程的流程圖，圖中顯示的關(guān)鍵步驟為方法選擇、方法評(píng)價(jià)和質(zhì)量控制。 5 工作程序5. 1新檢驗(yàn)項(xiàng)目的開(kāi)展申請(qǐng)5．1．1新檢驗(yàn)項(xiàng)目的申請(qǐng)者可以是檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心所有取得專(zhuān)業(yè)資格的檢驗(yàn)人員和取得執(zhí)業(yè)資格的臨床醫(yī)師。業(yè)資格的臨床醫(yī)師。 5．1．2項(xiàng)目申請(qǐng)者填寫(xiě)檢驗(yàn)項(xiàng)目開(kāi)展評(píng)審表中的可行性分析部分，交給技術(shù)負(fù)責(zé)人。5．1．3技術(shù)負(fù)責(zé)人組織技術(shù)管理層對(duì)項(xiàng)目的可行性進(jìn)行評(píng)審。圖6．7．1 新方法進(jìn)入常規(guī)應(yīng)用過(guò)程的流程圖 5．1．4技術(shù)負(fù)責(zé)人把討論后的評(píng)審表交給檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心主任進(jìn)行審核。 5．1．5批準(zhǔn)后的檢驗(yàn)項(xiàng)目由生化科主任組織科內(nèi)人員進(jìn)行方法學(xué)評(píng)價(jià)。 5．1．6技術(shù)負(fù)責(zé)人組織技術(shù)管理層對(duì)生化科主任提交的方法學(xué)評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)進(jìn)行討論。 5．2檢測(cè)方法的選擇和評(píng)審對(duì)擬用的方法通過(guò)不同的途徑來(lái)識(shí)別，包括咨詢同行、查詢科學(xué)文獻(xiàn)、評(píng)價(jià)商業(yè)資料等。檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心對(duì)采用的方法或正使用的方法進(jìn)行審核，審核的內(nèi)容至少應(yīng)包括： 5．2．1檢測(cè)的原理，具有原始參考文獻(xiàn)。 5．2．2．試劑和參考物質(zhì)的組分，提供的量及容器開(kāi)啟前后它們的要求及穩(wěn)定性。 5．2．3可能的危害、適當(dāng)?shù)陌踩A(yù)防措施及職業(yè)安全和衛(wèi)生管理指南。 5．2．4產(chǎn)生的廢物類(lèi)型、量和處理。 5．2．5標(biāo)本要求(包括采集條件、標(biāo)本量要求、需要抗凝和保護(hù)劑及必需的儲(chǔ)存條件等)。 5．2．6期望的分析性能目標(biāo)(即準(zhǔn)確度、精密度、靈敏度和特異性)。 5．2．7方法的參考區(qū)間，包括的信息有：如何導(dǎo)出并獲得健康和疾病的典型值，以及自己機(jī)構(gòu)內(nèi)確定參考區(qū)間的必需資料。 5．2．8執(zhí)行試驗(yàn)的詳細(xì)標(biāo)準(zhǔn)操作程序。 5．2．9實(shí)驗(yàn)室是否具備開(kāi)展該方法的條件，包括人員、環(huán)境和設(shè)備等。 5．2．1 0估計(jì)使用候選方法的檢測(cè)成本，包括校準(zhǔn)物、質(zhì)控標(biāo)本和技術(shù)員工時(shí)間的成本。 5．2．11產(chǎn)生的數(shù)據(jù)與已有儀器產(chǎn)生數(shù)據(jù)是否有可比性。 5．3確定質(zhì)量目標(biāo) 5．3．1性能目標(biāo)規(guī)定在特定濃度或醫(yī)學(xué)決定性水平上選擇。5．3．2建立質(zhì)量目標(biāo)：以小于美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室修正法規(guī)CLIA’8 8的1／4作為精蜜度目標(biāo)，小于1／2 CLIA’8 8作為總誤差目標(biāo)。 5．4分析方法的驗(yàn)證和評(píng)價(jià) 5．4．1初步評(píng)價(jià)：是熟悉分析方法、儀器及程序步驟，對(duì)分析方法用預(yù)試驗(yàn)來(lái)初步確定批內(nèi)精密度和分析范圍，并與已建立準(zhǔn)確度和精密度的比較方法根據(jù)方法比較試驗(yàn)來(lái)檢驗(yàn)準(zhǔn)確度。5．4．2方法的逐步評(píng)價(jià)：根據(jù)美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(CLSI)所制定的一系列與方法學(xué)評(píng)價(jià)有關(guān)的文件進(jìn)行分析方法的評(píng)價(jià)。并記錄從方法的評(píng)價(jià)到?jīng)Q定使用之間收集的所有信息(包括實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù))，用以證明方法的有效性。對(duì)所選用的方法采取以下措施進(jìn)行確認(rèn)： ①通過(guò)分析含有高濃度分析物的一系列混合樣本的溶液來(lái)確定可報(bào)告范圍。 ②確定檢測(cè)的精密度，通過(guò)分析混合血清或質(zhì)控品20次或更多次數(shù)來(lái)確定批內(nèi)精密度，選擇分析物的值應(yīng)盡可能接近決定性水平。在批內(nèi)精密度滿足要求后，再進(jìn)一步確定日間變異及總誤差。 ③通過(guò)將候選方法的性能與參考方法作比較，執(zhí)行回收試驗(yàn)，或?qū)⒑蜻x方法的性能與被替代方法的性能進(jìn)行比較，來(lái)確定方法的準(zhǔn)確度。 ④估計(jì)新方法的分析靈敏度。 ⑤估計(jì)新方法的檢出限。 ⑥檢驗(yàn)新方法的特異性。 ⑦建立分析物的生物參考區(qū)間。 ⑧通過(guò)比較使用不同批號(hào)和使用已經(jīng)儲(chǔ)存不同時(shí)期批號(hào)的試劑和參考物質(zhì)獲得的結(jié)果，以確定其穩(wěn)定性和一致性。在新方法應(yīng)用初期，工作人員要及時(shí)反饋相關(guān)信息，并在前幾個(gè)月使用統(tǒng)計(jì)質(zhì)量控制方法來(lái)仔細(xì)監(jiān)測(cè)其性能。 5．5評(píng)價(jià)方法的可接受性 5．5．1建立規(guī)范確定的界限，通過(guò)試驗(yàn)確定的誤差估計(jì)與分析目標(biāo)建立的規(guī)范確定的界限進(jìn)行比較。 總誤差值：當(dāng)獲得的總誤差值小于方法允許的總誤差時(shí)，可認(rèn)為候選方法的性能是可接受的。 方法評(píng)價(jià)：繪制性能分析圖對(duì)方法性能作出客觀決定。以不正確度（Tea%）為Y軸，已不精密度（CV%）為X軸。，為T(mén)ea%+2CV線；，為T(mén)ea%+3CV線；，為T(mén)ea%+4CV線。并在途中標(biāo)出不符要求、臨界、良好和優(yōu)秀性能區(qū)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)在坐標(biāo)圖上點(diǎn)畫(huà)操作性能點(diǎn)，根據(jù)點(diǎn)的位置決定方法性能可否接受。截圖672.圖672Westgard方法性能決定圖 對(duì)采用的檢驗(yàn)方法按照《標(biāo)準(zhǔn)化操作程序編寫(xiě)程序》編寫(xiě)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序，并放置在相關(guān)人員容易翻閱的地方。將現(xiàn)行的檢驗(yàn)程序，包括對(duì)原始樣品的要求、相關(guān)的性能參數(shù)和要求列成清單，在臨床要求時(shí)可供使用。41