【正文】 養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。 其操作步驟是：①將 在酒精燈火焰上灼燒直至 。 二、無菌技術(shù) ：閱讀“無菌技術(shù)”，討論回答下列問題： (一 )獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 ，具體操作如下： [來 1．對實(shí)驗(yàn)操作的 、操作者的 和 進(jìn)行 。含有 C、 H、 O、 N 的化合物既可以作為碳源，又可以作為氮源，如氨基酸等。 1．平板劃線法是 的操作，將聚集的菌種逐步 稀釋 分散到培養(yǎng)基的表面。依 此類推。例如異養(yǎng)微生物最常用的氮源是無機(jī)氮源中的 銨鹽 和 硝酸鹽 。 〖思考 3〗避免妨礙熱空氣流通。③， 1 〖思考 12〗操作中試管口和移液管應(yīng)在離火焰 1～ 2cm 處。高壓蒸氣滅菌鍋是滅菌的一個設(shè)備，通常用于培養(yǎng)基的滅菌。 A 說的是滅菌的目的，因?yàn)榘l(fā)酵所用的菌種大多是單一的純種，整個發(fā)酵過程不能混入 其他微生物（雜菌），所以是正確的； B 是錯誤的，因?yàn)闇缇哪康氖欠乐闺s菌污染，但實(shí)際操作中不可能只消滅雜菌，而是消滅全部微生物。是無機(jī)物，也是微生物的碳源和氮源。⑥，伸入平板內(nèi)劃 3～ 5 條 平行 線，⑦，第一區(qū)劃線末端開始向第二區(qū)域內(nèi)，第五區(qū)的劃線與第一區(qū)劃線，⑧，倒置放在培養(yǎng)箱中 〖思考 11〗 消滅接種環(huán)上的微生物， 的目的是消 滅接種環(huán)上殘留菌種，防止高溫殺死菌種 ； 防 止細(xì)菌污染環(huán)境和操作者 。 (2)雜菌入侵，獲得純凈的培養(yǎng)物。我們可以利用某些細(xì)菌、放線菌、酵母 菌 以石油作為碳源的原理，消除石油污染。 當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時(shí)，即可獲得單個細(xì)菌形成的 標(biāo)準(zhǔn)菌落 。 其過程是： ①在火焰旁右手拿 ，左手 ； ②使錐形瓶的瓶口 ； ③左手將培養(yǎng)皿 ，右手 ，立刻蓋上皿蓋。 2．營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有 、 、 和 ，此外還要滿足微生物生長對 、 以及 的要求。 (二 )消毒和滅菌 1．消毒是指 。⑤將菌種試管口再次通過火焰后塞上棉塞。 ◇◇ 知識拓展 3．消毒與滅菌的區(qū)別 消毒是一種采用較 溫和的理化 因素，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的病原菌，而對被消毒的物體基本無害的措施。 ③ pH 要適宜：細(xì)菌培養(yǎng)基 pH 中性或偏堿性，霉菌培養(yǎng)基呈酸性。 〖思考 9〗不能。 〖思考 14〗有培養(yǎng)基滅菌不徹底或雜菌感染等。 【例 3】解 析：制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，不能顛倒。待培養(yǎng)基冷卻至 50℃，用手觸摸錐形瓶剛剛不燙手，并且培養(yǎng)基處于溶化狀態(tài)。前 者利用固體斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)后，保存在 4℃冰箱中， 每 3～ 6 個月轉(zhuǎn)種培養(yǎng)一次，缺點(diǎn)是保存時(shí)間較短，容易發(fā)生污染和變異；后者將菌種與無菌體積等量混合后保存在－ 20℃冷凍箱中。 〖思考 10〗 增大接種面積，保持通氣并防止雜菌感染 。 [ （ 2）該培養(yǎng)基所含的氮源是 ，其功能是 。 滅菌是采用 強(qiáng)烈的理化 因素使任何物體內(nèi)外部的 一切微生物永遠(yuǎn) 喪失其生長繁殖能力的措施。⑦灼燒接種環(huán)，冷卻后從 劃線