【正文】 因 → 連接到載體上 → 轉(zhuǎn)移到工程菌內(nèi)，大量表達(dá)目的基因產(chǎn)物 –目前已大量生產(chǎn)胰島素、干擾素、多種生長(zhǎng)激素、 rIL2等細(xì)胞因子和乙肝疫苗等生物制品 第六十四頁，共六十六頁。轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率較普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)增加 1000倍 (104) 第六十六頁，共六十六頁。 在疾病的診斷、治療與預(yù)防中的應(yīng)用 形態(tài)、結(jié)構(gòu)、染色性、生化特性、抗原性及毒力等方面的變異，使得診斷復(fù)雜化 耐藥菌株日益增多，預(yù)防耐藥性 ? 藥敏實(shí)驗(yàn) ? 早期足量 ? 要有一定療程 ,聯(lián)合用藥 ? 不要濫用 減毒菌株和無毒株可制備成疫苗 第六十一頁，共六十六頁。 局限性轉(zhuǎn)導(dǎo) restricted transduction ?或稱特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)， 所轉(zhuǎn)導(dǎo)的只限于供體菌染色體上特定的基因。 F+菌， Hfr， F’菌都是雄性菌。 〔二〕基因的轉(zhuǎn)移和重組 基因轉(zhuǎn)移〔 gene transfer〕 外源性的遺傳物質(zhì)由供體菌轉(zhuǎn)入某受體菌細(xì)胞的過程稱為基因轉(zhuǎn)移。在疑心有某種細(xì)菌存在的標(biāo)本中，參加一定數(shù)量的能看出噬菌體， 37℃ 孵育 6~8h，再測(cè)定該噬菌體的效價(jià)。 毒性噬菌體復(fù)制周期 吸附 穿入 生物合成 成熟與釋放 第十八頁，共六十六頁。 細(xì)菌遺傳變異的物質(zhì)根底 基因組：染色體和染色體外遺傳物質(zhì) 噬菌體 轉(zhuǎn)位因子 細(xì)菌的遺傳物質(zhì)是 DNA 第十頁，共六十六頁。細(xì)菌的遺傳和變異 遺傳 (heredity)： 使細(xì)菌的性狀保持相對(duì)穩(wěn)定，且代代相傳，使其種屬得以保存。 〔一 〕染色體〔 chromosome〕 一條環(huán)狀雙螺旋 DNA長(zhǎng)鏈，按一定構(gòu)型反復(fù)盤旋形成松散的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)； 附著在橫隔中介體上或細(xì)胞膜上； 缺乏組蛋白，無核膜包裹； 約含有 40005000個(gè)基因； 雙向復(fù)制，全過程約 20min。 第十九頁，共六十六頁。 輔助治療，如應(yīng)用銅綠假單胞菌噬菌體治療創(chuàng)口感染。 重組〔 rebination〕 轉(zhuǎn)移的基因與受體菌 DNA整合在一起稱為重組，使受體菌獲得供體菌的某些性狀。 第四十七頁，共六十六頁。 ?溶原期時(shí)，噬菌體 DNA整合在細(xì)菌染色體特定部位，噬菌體DNA發(fā)生偏差異離，將自身的一段 DNA留在細(xì)菌染色體上，而帶走了細(xì)菌 DNA上兩側(cè)的基因。 在測(cè)定致癌物質(zhì)中的應(yīng)用 凡能誘導(dǎo)細(xì)菌發(fā)生突變的物質(zhì)都有可能是致癌物質(zhì)。 。 在流行病學(xué)中的應(yīng)用 分子生物學(xué)分析方法已被用于流行病學(xué)調(diào)查 質(zhì)粒指紋圖〔 PFP〕 研究流行菌株的同源性，檢測(cè)對(duì)噬菌體的敏感性和溶原性，對(duì)細(xì)菌素的敏感性 第六十三頁，共六十六頁。所轉(zhuǎn)導(dǎo)的只限于供體菌上個(gè)別的基因。 R質(zhì)粒的接合 日本首先別離到抗多種藥物的宋內(nèi)志賀菌多重耐藥株，多重耐藥性很難用基因突變解釋。 第三十八頁，共六十六頁。 〔四〕轉(zhuǎn)位因子 〔 transposable element〕 是存在于細(xì)菌染色體或質(zhì)粒 DNA分子上的一段特異性核苷酸序列片段，它能在 DNA分子中移動(dòng)，不斷改變它們?cè)诨蚪M的位置，能從一個(gè)基因組轉(zhuǎn)移到另一個(gè)基因組中。 第二十一頁，共六十六頁。 〔二〕質(zhì)粒〔 plasmid〕 ?細(xì)菌染色體外的遺傳物質(zhì)，是環(huán)狀閉合的雙鏈 DNA。 第一頁，共六十六頁。 含鏈霉素培基 痢疾桿菌 依鏈株 長(zhǎng)期培養(yǎng) 第八頁，共六十六頁。 頭部 尾部 尾