【正文】 再循環(huán)操作。 ? 各種代謝物，如氨基酸、抗生素、酶都可以進(jìn)行蒸發(fā)操作。 ? 雙水相萃取材料 〔 1〕 PEG葡聚糖萃取系統(tǒng)，〔 2〕 PEG— 磷酸鉀萃取系統(tǒng)。因此，產(chǎn)物的生物學(xué)特性能夠得到完好的保存， 〔 2〕產(chǎn)物的損失量很少，有利于提高得率。當(dāng)流動相流過固定相的時候，由于流動相中不同的物質(zhì)與固定相之間產(chǎn)生了不同強(qiáng)度的結(jié)合力，因此各種物質(zhì)在層析柱內(nèi)停留的時間也各不相同，結(jié)果，它們將依次序的先后流出層析柱。 〔 3〕常用的離子交換樹脂 ? 〔 1〕羧甲基纖維素陽離子交換樹脂〔 CM纖維素〕 當(dāng)陽離子蛋白質(zhì)流經(jīng)交換樹脂時，由于靜電吸引的作用，蛋白質(zhì)將與樹脂結(jié)合，然后用緩沖液進(jìn)行沖洗交換柱，結(jié)合力最弱的蛋白質(zhì)首先被洗脫下來。 〔 3〕凝膠層析的應(yīng)用價值 ? 〔 1〕可用于別離和提純蛋白質(zhì)、酶、多肽、激素、多糖、核酸等物質(zhì)。 ?高速離心噴霧枯燥機(jī) 第六十一頁，共七十頁。 冷凍枯燥的程序 ? 〔 1〕凍結(jié) 一般生物制品的共晶點(diǎn)在 20℃ ，因此，通常將制品凍結(jié)在 35℃ 到 40℃ 之間。加熱 保溫維持 冷卻。 第六十九頁，共七十頁。 〔五〕冷凍枯燥 ? 根本原理 ? 冷凍枯燥的程序 ? 冷凍枯燥的應(yīng)用 ? 冷凍枯燥的設(shè)備 第六十五頁，共七十頁。 ? 枯燥本卷須知 由于生物產(chǎn)品多數(shù)為熱敏性物質(zhì)，所以枯燥過程必須注意使用那些枯燥時間不太長、枯燥溫度不過高的設(shè)備。相反，分子量較小的物質(zhì)可以自由地進(jìn)出凝膠網(wǎng)孔，它們不斷地在凝膠顆粒之中來回流動，從而導(dǎo)致進(jìn)出速度下降。極性基團(tuán)不斷地與溶液中的離子進(jìn)行交換，而非極性基團(tuán)那么構(gòu)成樹脂分子的骨架，起支撐作用。 反滲透法 +超濾法的實(shí)際應(yīng)用 ? 〔 1〕主要用于蛋白質(zhì)溶液的濃縮、脫鹽等步驟， 〔 2〕在疫苗、血漿等生產(chǎn)中也常被使用。 ? 從離子物性來看，硫酸銨并不是鹽析效應(yīng)最強(qiáng)的鹽類，但是由于它在水中的溶解度極大，對鹽析十分有利，因此硫酸銨是目前最常用的鹽析劑。 ?雙水相萃取法，目前用于進(jìn)行酶、和蛋白質(zhì)的提取工藝。 第三十一頁，共七十頁。 目的 ? 〔 1〕別離出完整的細(xì)胞。從而把顆粒截留。 〔 3〕連續(xù)滅菌法的優(yōu)點(diǎn) ? 〔 1〕可減少培養(yǎng)劑中營養(yǎng)物質(zhì)的損失、提高產(chǎn)物收率。然而，在滅菌過程中，保溫殺菌的作用是主要的，冷卻殺菌的作用最小。 ?〔 6〕目前國際上青霉素發(fā)酵的水平已經(jīng)到達(dá) 8萬多單位 /ml，相當(dāng)于50g/L。 〔 1〕青霉素〔 penicillin〕 ?所用菌種 黃青霉菌 ?原始材料 α氨基已二酸、半胱氨酸、纈氨酸。 ? 對通入的培養(yǎng)基、通入的空氣進(jìn)行先行滅菌。 〔 3〕間歇滅菌法的優(yōu)點(diǎn) ? 設(shè)備造價低廉。 第十九頁，共七十頁。 ? 深層過濾所用的過濾介質(zhì) 棉花、活性碳、玻璃纖維、合成纖維、各種有機(jī)或無機(jī)的燒結(jié)材料〔燒結(jié)金屬、燒結(jié)陶瓷、燒結(jié)塑料、蒙乃爾合金粉燒結(jié)板〕、超細(xì)玻璃纖維、超細(xì)玻璃纖維過濾紙，微孔聚合物〔聚乙烯醇 PVA過濾板、PVA燒結(jié)板等已經(jīng)在日本的發(fā)酵工業(yè)中廣泛應(yīng)用〕。 第二十八頁，共七十頁。 ? 由于生物產(chǎn)品大多數(shù)是熱敏性物質(zhì)，所以物料在蒸發(fā)器內(nèi)的停留時間必須盡可能短，同時，還應(yīng)該晝防止局部液體過熱。 第三十八頁，共七十頁。 ? 膜別離的分類 ? 〔 1〕反滲透法 ? 〔 2〕超濾法 第四十二頁，共七十頁。 ? 層析法的分類 吸附層析法 離子交換層析法 凝膠層析法〔分子篩〕 親的層析法 第四十六頁，共七十頁。不同的緩沖液將各處洗脫“撿到〞其中的某一蛋白質(zhì)組分。能徹底別離分子量相差只有 25%的二種蛋白質(zhì)。 〔二〕氣流枯燥 ? 是利用顆粒在氣流中能夠自由流動的特性，使物料與氣流一起流經(jīng)一段長的管道，顆粒物料在與氣流一起流動的過程中，水分得到迅速汽化，因此，等到到達(dá)枯燥管道出口處時，顆粒物料已經(jīng)被枯燥。再維持 1— 2小時，以保證凍結(jié)完全徹底?！?2〕將細(xì)胞進(jìn)行溶菌處理，提取細(xì)胞內(nèi)的生物產(chǎn)品。將樣品置于培養(yǎng)皿中，厚度不超過 1cm，在冰箱中凍成硬塊，再放入裝有 P2O5或者硅膠吸水劑的真空枯燥器中，連續(xù)抽真空，來到達(dá)濃縮、枯燥的目的。 ?HZG型直接加熱式回轉(zhuǎn)滾筒枯燥機(jī) 第六十四頁，共七十頁。 四、枯燥技術(shù) ? 枯燥操作往往是生物產(chǎn)品生產(chǎn)的最后一步，枯燥的目的就在于除去物料中的水分，便于保藏和運(yùn)輸。 ? 當(dāng)樣品通過凝膠層析柱時，分子量較大的物質(zhì)由于直徑大于凝膠網(wǎng)孔，它們沿著凝膠顆料的間隙流動，因此速度較快而首先流出層析柱。 ? 離子交換樹脂同時具備極性基團(tuán)和非極性基團(tuán)。 第四十四頁，共七十頁。 〔 2〕陽離子 Th+ Al+ H+、 Ba+ Sr+ Ca+Mg+ Rb+、 NH4