雙染法檢測細胞凋亡(留存版)
【正文】 設(shè)門圈出目標細胞群體。，F(xiàn)L1 和FL2（或FL3）的劃定方法如下： 設(shè)定FL1 標尺位置: 處于左下象限內(nèi)的大群細胞是Annexin V 染色陰性的細胞（一般這些細胞會在FL1 軸方向上升至2 個對數(shù)坐標值）。 化收集，胰酶消化時間不易過長，以防引起假陽性）2. 用冷PBS 洗滌細胞兩次（2000RPM，離心時間5min收集細胞）。碘化丙啶(Propidine Iodide, PI)是一種核酸染料，它不能透過完整的細胞膜，但在凋亡中晚期細胞和死細胞，PI 能夠透過細胞膜而使細胞核紅染。對照組細胞體積太少，根本不夠調(diào)試細胞團位置（FSC和SSC參數(shù)）、自身熒光和熒光補償?shù)?。大約需要3mL的細胞懸液才能夠進行調(diào)試。因此將AnnexinV 與PI 匹配使用，就可以將亡早晚期的細胞以及死細胞區(qū)分開來(圖)。3. 用400ul 1X Binding Buffer 懸浮細胞，濃度大約為1 X 106 cells/ml。 注：如果在以上調(diào)節(jié)補償過程中更改了PMT 的電壓，建議重復(fù)4 步驟，確保不引起過度熒光補償。一個恰當?shù)难a償應(yīng)該是單陽性細胞熒光強度與
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