【正文】 EcoRⅠ 酶與 AluⅠ 酶切割抗原基因 DNA片段會(huì)得到 XY片段，由圖中 ② 過(guò)程知，用 EcoRⅠ酶和 SmaⅠ 酶切割質(zhì)粒產(chǎn)生 MN片段。 (3)DNA連接酶的作用部位是磷酸基團(tuán)與五碳糖之間的磷酸二酯鍵，自然，對(duì)所連接的 DNA 兩端堿基序列沒(méi)有專(zhuān)一性要求。 表 1 引物對(duì)序列表 引物對(duì) A P1 AACTGAAATGTAGCTATC S2 TTAAGTCCATTACTCTAG 引物對(duì) B S1 GTCCGACTAGTGGCTGTG S2 AGCTGGCGTTTAGCCTCG 表 2 幾種限制酶識(shí)別序列及切割位點(diǎn)表 限制酶 AluⅠ EcoRⅠ PstⅠ SmaⅠ 切割 位點(diǎn) AG↓CT TC↑GA G↓AATTC CTTAA↑G CTGCA↓G G↑ACGTC CCC↓GGG GGG↑CCC 請(qǐng)根據(jù)以上圖表回答下列問(wèn)題。 23． (10 分 )農(nóng)桿菌是一種在土壤中生活的微生物，能在自然條件下感染植物，因而在植物基因工程中得到了廣泛 的運(yùn)用。得到的目的基因兩側(cè)需人工合成 BamHⅠ 黏性末端。圖上的 “ 反轉(zhuǎn)錄病毒序列 ” 可以整合到動(dòng)物細(xì)胞的染色體上，不斷地表達(dá)其攜帶的目的基因。 泰安檢測(cè) )蛛絲的強(qiáng)度和柔韌度得益于蛛絲蛋白的特殊布局，使它產(chǎn)生了一個(gè)由堅(jiān)硬的結(jié)晶區(qū)和非結(jié)晶區(qū)構(gòu)成的混合區(qū)域。 11． (2021檢測(cè)出受體細(xì)胞中含有目的基因，只能證明目的基因已導(dǎo)入受體細(xì)胞，目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)要用抗原 — 抗體雜交法檢測(cè)。 5．下列說(shuō)法不正確的是 ( ) A．基因治療是把正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達(dá)到治療疾病的目的 B．基因文庫(kù)包括基因組文庫(kù)、 cDNA文庫(kù)等 C．基因工程的核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建 D．外源基因插入到轉(zhuǎn)基因生物染色體 DNA上后就能夠表達(dá) [答案 ] D [解析 ] 外源基因插入到染色體上不一定表達(dá)，所以需進(jìn)行基因工程的第四步：目的基因的檢測(cè)與鑒定，用來(lái)確定基因是否表達(dá)。由于限制酶已破壞了 tet基因，因而四環(huán)素抗性基因不能表達(dá)，故該菌不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。 濟(jì)寧檢測(cè) )下列關(guān)于基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是 ( ) A．從基因組文庫(kù)中獲取的某種生物的部分基因，可以實(shí)現(xiàn)物種間的基因交流 B．從 cDNA文庫(kù)中獲取的目的基因，既無(wú)啟動(dòng)子，又無(wú)終止子 C．用人胰高血糖素基因制成的 DNA探針，檢測(cè)人胰島 B細(xì)胞中的 mRNA，可形成雜交分子 D．基因表達(dá)載體中的標(biāo)記基因不能含有限制酶的切割位點(diǎn) [答案 ] C [解析 ] 基因工程可以實(shí)現(xiàn)物種之間的基因交流，而獲取目的基因是基因工 程的第一步，故 A正確； cDNA文庫(kù)中的基因是通過(guò) mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的，故不含有啟動(dòng)子和終止子，B正確；胰高血糖素是由胰島 A細(xì)胞合成并分泌的，胰島 B細(xì)胞內(nèi)不存在胰高血糖素基因轉(zhuǎn)錄成的 mRNA，故 C 錯(cuò)誤；基因表達(dá)載體中的標(biāo)記基因不能含有限制酶的切割位點(diǎn)，否則標(biāo)記基因會(huì)被限制酶切割，失去原有的作用，故 D正確。獲取大量重組質(zhì)粒后，將其再轉(zhuǎn)入到某種哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，可獲得大量重組反轉(zhuǎn)錄病毒。 (3)由于導(dǎo)入的目的基因能轉(zhuǎn)錄反義 RNA，且能與 ________互補(bǔ)結(jié)合，抑制 PG基因的正常表達(dá)。 (4)要獲取能表現(xiàn)出新性狀的植株， d過(guò)程涉及的生物學(xué)技術(shù)是 ________。 (3)圖 1 步驟 ③ 所用的 DNA 連接酶對(duì)所連接的 DNA 兩端堿基序列是否有專(zhuān)一性要求？________ (4)為將外源基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯，圖 1步驟 ⑥ 轉(zhuǎn)基因所用的細(xì)菌 B通常為 ________。這樣形成的兩個(gè) DNA片段用 DNA連接酶形成重組質(zhì)粒。引物對(duì) B中 C與 G的比例明顯高于引物對(duì) A，因此，引物對(duì) B可采 用較高的退火溫度。以下是與植物疫苗制備過(guò)程相關(guān)的圖和表。 (4)由圖示可知，目的基因整合到了細(xì)胞核染色體上，故獲得的轉(zhuǎn)基因植株相當(dāng)于雜合子，有性生殖產(chǎn)生的后代不一定帶有目的基因，可以利用無(wú)性繁殖技術(shù)確保子代保持轉(zhuǎn)基因番茄的優(yōu)良性狀。 ② 在該基因上游加結(jié)構(gòu) A可確?；虻姆聪蜣D(zhuǎn)錄，結(jié)構(gòu) A上應(yīng)具有 ________結(jié)合位點(diǎn)。 北京檢測(cè) )Ⅰ. 反轉(zhuǎn)錄病毒載體是一種表達(dá)型質(zhì)粒，結(jié)構(gòu)如圖 1所示。 16． (2021其目標(biāo)是根據(jù)人們對(duì)蛋白質(zhì)功能的特定需求，對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計(jì)，但因?yàn)榛驔Q定蛋白質(zhì)，因此對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，歸根到底，還需對(duì)相應(yīng)的基因進(jìn) 行操作，按要求進(jìn)行修飾加工改造，使之能控制合成人類(lèi)需要的蛋白質(zhì)。 2．下列關(guān)于基因工程的說(shuō)法中，正確的是 ( ) A．基因工程的設(shè)計(jì)和施工都是在細(xì)胞水平上進(jìn)行的操作 B．目前基因工程中所有的目的基因都是從供體細(xì)胞中直接分離得到的 C．只要檢測(cè)出受體細(xì)胞中含有目的基因，那么目的基因一定能成功表達(dá) D．基因工程能使科學(xué)家打 破物種界限，定向改造生物性狀 [答案 ] D [解析 ] 基因工程是在分子水平上進(jìn)行的操作，目前獲取目的基因的方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成三種。 6．土壤農(nóng)桿菌含有一個(gè)大型的 Ti質(zhì)粒 (如下圖所示 )，在侵染植物細(xì)胞的過(guò)程中，其中的 T－ DNA片段轉(zhuǎn)入植物的基因組。 12．科學(xué)家將