【正文】 而且每種酶的切點(diǎn)最好只有一個。根據(jù) PCR 反應(yīng) 原理，每次循環(huán)可分為在 95 ℃ 時進(jìn)行變性，在 55 ℃ 時進(jìn) 行復(fù)性，在 72 ℃ 時延伸，該過程需要耐熱的 DNA聚合酶。 圖中 ①② 過程為防止質(zhì)粒和含目的基因的外源 DNA 片段自身環(huán)化，應(yīng)選用 ________酶對外源 DNA、質(zhì)粒進(jìn)行切割。 (6) 如果利用 DNA 分子 雜交原理對再生植物進(jìn)行檢測， D 過程應(yīng)該用_______________________________________________________作為探 針。 A．顯微注射法 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 B．基因槍法 花粉管通道 法 C．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 顯微注射法 D．基因槍法 顯微注射法 解析 本題考查將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法，解題關(guān)鍵是理解針對不同受體細(xì)胞采取的不同方法。乙方法需要逆轉(zhuǎn)錄酶和脫氧核苷酸為原料。 ③ 有一定的標(biāo)記基因，便于篩選。 (2)從圖中信息可知， Sma Ⅰ 酶的切割位點(diǎn)位于目的基因和 M 抗生素抗性基因上。 (2)已知幾種限制酶識別序列及其切割位點(diǎn) (如下表 )： 限制酶 BamHⅠ Hind Ⅲ EcoR Ⅰ Sma Ⅰ 識別序列及 切割位點(diǎn) ↓GGATCCCCTAGG↑ )) ↓AAGCTTTTCGAA↑ )) ↓GAATTCCTTAAG↑ )) ↓CCCGGGGGGCCC↑ )) 用圖中的質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用 Sma Ⅰ 酶切割，原因是__________________________________________________________________ ______________