【正文】 的可能，因此，可以用較厚的細胞切片研究細胞的結(jié)構(gòu)，切片的厚度最大可達 1μ m，相當于普通 TEM 樣品厚度的 10 倍。當大量的冰升華之后，對浮雕表面進行鉑 碳復型，并在腐蝕性溶液中除去生物材料 ， 復型經(jīng)重蒸水多次清洗后，置于載網(wǎng)上作電鏡觀察。第二反應是捕捉劑與初級反應產(chǎn)物的作用，稱捕捉反應，產(chǎn)生最終反應產(chǎn)物： 15. 免疫熒光技術(shù) (immunofluorescence) 將免疫學方法 (抗原抗體特異結(jié)合 )與熒光標記技術(shù)結(jié)合起來研究特異蛋白抗原在細胞內(nèi)分布的方法。進動有一定的頻率， 它與所加磁場的強度成正比。 23. 愈傷組織 (callus， culli) 植物受創(chuàng)傷后，在傷面新生的組織稱為愈傷組織。顯微操作儀是在顯微鏡下對細胞進行顯微操作的裝置，可用于細胞核移植、基因注入、染色體微切和胚胎切割等手術(shù)。 離心分離密度大于 ，如 DNA、RNA，需要使用密度比蔗糖和甘油大的介質(zhì)。 (gene engineering) 基因工程是以分子遺傳學為理論基礎， 以分子生物學和微生物學的現(xiàn)代方法為手段， 將不同來源的基因 (DNA分子 )，按預 先設計的藍圖， 在體外構(gòu)建雜種 DNA分子， 然后導入活細胞， 以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、 生產(chǎn)新產(chǎn)品。質(zhì)膜的基本作用是維護細胞內(nèi)微環(huán)境的相對穩(wěn)定 ,并參與同外界環(huán)境進行物質(zhì)交換、能量和信息傳遞。血型糖蛋白是第一個被測定氨基酸序列的蛋白質(zhì) ,有幾種類型，包括 A、 B、 C、 D。 13. 磷脂 (phospholipids) 含有磷酸基團的脂稱為磷脂 ,是細胞膜中含量最豐富和最具特性的脂。 15. 脂質(zhì)體 (liposome) 將少量的磷脂放在水溶液中 ,它能夠自我裝配成脂雙層的球狀結(jié)構(gòu) ,這種結(jié) 構(gòu)稱為脂質(zhì)體，所以脂質(zhì)體是人工制備的連續(xù)脂雙層的球形脂質(zhì)小囊。同脂的結(jié)合有兩種方式，一種是蛋白質(zhì)直接結(jié)合于脂雙分子層，另一種方式是蛋白并不直接同脂結(jié)合，而是通過一個糖分子間接同脂結(jié)合。它與片層結(jié)構(gòu)模型有許多相同之處，最重要的修改是膜脂雙分子層內(nèi)外兩側(cè)蛋白質(zhì)存在的方式不同。 24. 膜蛋白放射性標記法 (radioactive labeling procedure) 研究細胞膜蛋白分布不對稱的一種方法。但是有些細胞含有翻轉(zhuǎn)酶 (flipase)能夠促使某些磷脂從膜脂的一葉翻轉(zhuǎn)到另一葉，所以這些酶在維持膜脂的不對稱分布中起重要作用。斑逐漸聚集擴大 ,當小鼠淋巴細胞質(zhì)膜表面抗體全部同兔子的抗小鼠抗體結(jié)合后 ,將會在細胞表面的一側(cè)形成“帽子”結(jié)構(gòu) ,最后通過內(nèi)吞作用進入細胞。為了克服這些不足 ,發(fā)展了單顆粒示綜(singleparticle tracking,SPT)技術(shù) ,可以用抗體金 (直徑 15～ 40 nm)來標記單個膜蛋白 ,然后通過計算機控制的攝像顯微鏡進行觀察 。根據(jù)改變離子通透性的機制不同 ,將離子載體分為兩種類型 :通道形成離子載體 (channelforming ionophore)和離子運載的離子載 體 (ioncarrying ionophore)。 一般說來 , 氣體分子（如 O CO N2）、小的不帶電的極性分子（如尿素、乙醇）、脂溶性的分子等易通過質(zhì)膜，大的不帶電的極性分子（如葡萄糖）和各種帶電的極性分子都難以通過質(zhì)膜。開放往往只有幾毫秒時間。在動物細胞中已經(jīng)鑒定了水通道蛋白家族中的六個成員 ,在植物中發(fā)現(xiàn)了具有類似功能的蛋白質(zhì)。 ④ ABC 運 輸 蛋 白 (ATPbinding cassettle transportor), 這是一大類以 ATP 供能的運輸?shù)鞍?, 已發(fā)現(xiàn)了 100多種 , 存在范圍很廣 ,包括細菌和人。 在功能上 ,細胞表面是細胞質(zhì)膜功能的擴展 ,它保護細胞 ,使細胞有一個相對穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境；負責細胞內(nèi)外的物質(zhì)交換和能量交換 ,并通過表面結(jié)構(gòu)進行細胞識別、信息的接收和傳遞、進行細胞運動 , 以及維護細胞的各種形態(tài) ,并且與免疫、癌變都有十分密切的關系。在細菌細胞中，這種運輸作用主要是進行一些糖的運輸，如乳糖、葡萄糖、甘露醇等。 ② V型泵 (Vtype pump),或稱 V型 ATPase,主要位于小泡的膜上 ( V代表 vacuole 或 vesicle), 如溶酶體膜中的 H+泵 , 運輸時需要 ATP 供能 , 但不需要磷酸化。載體蛋白對物質(zhì)的轉(zhuǎn)運過程具有類似于酶與底物作用的動力學曲線、可被類似物競爭性抑制、具有競爭性抑制等酶的特性。通道蛋白的運輸作用具有選擇性 ,所以在細胞膜中有各種不同的通道蛋白。 (osmosis) 是指水分子以及溶劑通過半透性膜的擴散。 35. 膜運輸?shù)鞍?(membrane transport protein) 膜運輸?shù)鞍资悄ふ系鞍?, 或是大的跨膜分子復合物 , 功能是參與被動運輸 (促進擴散 )或主動運輸(運輸泵 )。這實際上是膜蛋白不對稱分布帶來膜功能的不對稱?？梢詮耐米拥难褐蟹蛛x這種抗體 ,并將這種抗體共價連接到熒光染料上 ,就可以通過熒光顯微鏡進行觀察。這種運動始終保持脂分子在質(zhì)膜中的排布方向，親水的基團朝向膜表面，疏水的尾指向膜的內(nèi)部。 22. 孔蛋白 (porin) 孔蛋白是存在于細菌質(zhì)膜的外膜、線粒體和葉綠體的外膜上的通道蛋白 ,它們允許較大的分子通過 ,其中線粒體孔蛋白可通過的最大分子為 6000道爾頓 ,而葉綠體的孔蛋白則可通過相對分子質(zhì)量在10,000 到 13,000 之間的物質(zhì)。 20. 單位膜模型 (unit membrane model) 1959 年 所提出。實際上 ,有時外周蛋白與整合蛋白是難以區(qū)分的 ,因為許多膜蛋白是由多亞基組成的 ,其中有的亞基插入在脂雙層 ,有些亞基則是外周蛋白。膽固醇的分子較其他膜脂要小 , 雙親媒性也較低。帶 蛋白本身不同肌動蛋白相連，因為它沒有與肌動蛋白連接的位點。兩個亞基鏈呈現(xiàn)反向平行排列 , 扭曲成麻花狀，形成異二聚體 , 兩個異二聚體頭 頭連接成 200nm 長的四聚體。存在于細胞結(jié)構(gòu)中的膜不 僅薄 , 而 且 具 有 半 透 性(semipermeable membrane),允許一些不帶電的小分子自由通過。那些沒有親和力的蛋白質(zhì)由于不被吸附，直接流出，從而與被分離的蛋白質(zhì)分開，然后選用適當?shù)南疵撘海? 改變結(jié)合條件將被 結(jié)合的蛋白質(zhì)洗脫下來，這種分離純化蛋白質(zhì)的方法稱為親和層析。只要被分離顆粒間的密度差異大于 1% 就可用此法分離。其原理是 : B 淋巴細胞能夠產(chǎn)生抗體， 但在體外不能進行無限分裂 。最常用的原代培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細胞培養(yǎng)。 19. 顯微熒 光光度術(shù) (microfluorometry) 利用顯微分光光度計對細胞內(nèi)原有能發(fā)光的物質(zhì)或?qū)毎麅?nèi)各種化學成分用不同的熒光經(jīng)熒光探針標記后進行定位、定性和定量地測定，稱為顯微熒 光 光 度 術(shù) ， 也 稱 細 胞 熒 光 光 度 術(shù)(cytofluorometry)。 ⑤ 不需任何透鏡， 體積小，有人稱之為 口袋顯微鏡 (pocket microscope)。在真空條件下，用冰刀橫切冰凍樣品，使樣品內(nèi)層被 分開露出兩個表面。 STEM能夠獲得 TEM 所不能獲得 的一些關于樣品的特殊信息。 3. 熒光顯微鏡 (Fluorescence microscope) 以紫外線為光源，用以照射被檢物體，使之發(fā)出熒光，然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。 27. 細胞骨架系統(tǒng) (cytoskeletonic system) 細胞骨架是由蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)搭建起的骨架網(wǎng) 絡結(jié)構(gòu)，包括細胞質(zhì)骨架和細胞核骨架。 23. 中膜體 (mesosome) 中膜體又稱間體或質(zhì)膜體 , 是細菌細胞質(zhì)膜向細胞質(zhì)內(nèi)陷折皺形成的。 16. 酶效應組裝 (enzymatic assembly) 相同的單體分子在不同的酶系作用下 , 生成不同的產(chǎn)物。 11. 分子生物學 (molecular biology) 在分子水平上研究生命現(xiàn)象的科學。 4. 原生質(zhì)體 (potoplast) 脫去細胞壁的細胞叫原生質(zhì)體 , 是一生物工程學的概念。從生命結(jié)構(gòu)層次看，細胞生物學位于分子生物學與發(fā)育生物學之間，同它們相互銜接，互相滲透。支原體形態(tài)多變 ,有圓形、絲狀或梨形，光鏡下難以看清其結(jié) 構(gòu)。引發(fā)體與 DNA 結(jié)合后隨即由引物酶合成 RNA 引物。 25. 生物膜結(jié)構(gòu)體系 (biomembrane system) 細胞內(nèi)具有膜包被結(jié)構(gòu)的總稱 , 包括細胞質(zhì)膜、核膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、線粒體和葉綠體等。 28. 細胞社會學 (cell sociology) 細胞社會學是從系統(tǒng)論的觀點出發(fā)，研究細胞整體和細胞群體中細胞間的社會行為 (包括細胞間識別、通訊、集合和相互作用等 )，以及整體和細胞群對細胞的生長、分化和死亡等活動的調(diào)節(jié)控制。相差顯微鏡和普通顯微鏡的區(qū)別是 :用環(huán)狀光闌代替 可變光闌，用帶相板的物鏡代替普通物鏡，并帶有一個合軸用的望遠鏡。 9. 負染色 (negative stainning) 用重金屬鹽 (如磷鎢酸鈉、醋酸鈾等 )對鋪展在載網(wǎng)上的樣品進行染色，使整個載網(wǎng)都鋪上一層重金屬鹽，而有凸出顆粒的地方則沒有染料沉積。 13. 掃 描 隧 道 顯 微 鏡 (scanning tunneling microscope， STM) 掃描隧道顯微鏡使用電子學的方法，用一個金屬針尖在在樣品表面掃描。由于熒光素所發(fā)的熒光可在熒光顯微鏡下檢出，從而可對抗原進行細胞定位。如在此基礎上再加一個固定頻率的電磁波， 并調(diào)節(jié)外加磁場的強度， 使進動頻率與電磁波頻率相同。其原因是由于受創(chuàng)傷的刺激后，傷面附近的生活組織恢復了分裂機能，加速增生而將傷面愈合。 27. 差速離心 (differential centrifugation) 主要是采取逐漸提高離心速度的方法分離不同大小的細胞器。重金屬鹽氯化銫 (CsCl)是目前使用的最好的離心介質(zhì)，它在離心場中可自行調(diào)節(jié)形成濃度梯度，并能保持穩(wěn)定。基因工程技術(shù)為基因的結(jié)構(gòu)和功能的研究提供了有力的手段。另外 , 在細胞的生存、生長、分裂、分化中起重要作用。血型糖蛋白 B、 C、 D在紅細胞膜中濃度較低。動、植物細胞膜上都有磷脂 , 是膜脂的基本成分 , 約占膜脂的 50%以上。脂質(zhì)體可作為生物膜的研究模型，并可作為生物大分子(DNA 分子 )和藥物的運載體，因此脂質(zhì)體是研究膜脂與膜蛋白及其生物學性質(zhì)的極好材料。 通過與糖的連接被錨定在膜脂上的蛋白質(zhì)主要是通過短的寡糖與包埋在脂雙層外葉中的糖基磷脂酰肌醇 (glycosylphophatidylionositol,GPI)相連而被錨定在質(zhì)膜的外側(cè)。單位膜模型強調(diào)的是蛋白質(zhì)為單層伸展的β折 疊片狀 , 而不是球形蛋白。 實驗中首先要分離細胞膜 ,然后用乳過氧化物酶進行膜蛋白標記。 28. 細胞融合 (cell fusion) 自發(fā)條件下或人工誘導下 , 兩個不同基因型的細胞或原生質(zhì)體融合形成一個雜種細胞。很顯然 ,如果小鼠細胞質(zhì)膜中的抗體蛋白不能自由的進行側(cè)向擴散的話 ,斑和帽都是不能形成的。 31. 電子自旋共振譜技術(shù) (electron spinresonance spectroscopy,ESR) 證明膜脂流動性的一種方法。 37. 短桿菌肽 A(gramicidin A) 是一種由 15 個氨基酸組成的線性肽 ,其中 8 個是L氨基酸 ,7個是 D氨基酸 , 它具有疏水的側(cè)鏈 , 兩個分子在一起形成跨膜的通道 , 所以是一種形成通道的離子載體，它能夠有選擇地將單價陽離子順電化學梯度通過膜，不過它并不顯著提高運輸速度。 42. 促進擴散 (facilitated diffusion) 促進擴散又稱易化擴散、協(xié)助擴散，或幫助擴散。在這短暫瞬息時間里 ,一些離子、代謝物或其它溶質(zhì)順著濃度梯度自由擴散通過細胞膜。膜的水通道蛋白 AQP1是 1988年發(fā)現(xiàn)的 ,開始將這種蛋白稱為通道形成整合蛋白 (CHIP),是人的紅細胞膜的一種主要蛋白。 50. 協(xié)同運輸 (cotransport) 協(xié)同運輸又稱偶聯(lián)主動運輸 ,它不直接消耗 ATP，但要間接利用自由能 ,并且也是逆濃度梯度的運輸。 2. 細胞被 (cell coat) 由碳水化合物形成的覆蓋在細胞質(zhì)膜表面的保護層，稱為細胞被 , 由于這層結(jié)構(gòu)的主要成份是糖 ,所以又稱為糖萼 (glycocalyx),或多糖包被。在這種運輸系統(tǒng)中，涉及幾種酶和一個被稱為 HPr 小分子蛋白；被轉(zhuǎn)移的基團是磷酸烯醇式丙酮酸的高能磷酸鍵上的磷酸基團，運輸中所需要 的能量則由磷酸烯醇式丙酮酸的高能磷酸鍵提供。此類運輸泵運輸時需要磷酸化 (P 是phosphorylation 的縮寫 ),包括 Na+K+泵、 Ca2+離子泵。由載體蛋白進行的被動物質(zhì)運輸 , 不需要ATP 提供能量。通道蛋白本身并不直接與小的帶電荷的分子相互作用 , 這些小的帶電荷的分子可以自由的擴散通過由脂雙層中膜蛋白帶電荷的親水區(qū)所形成的水性通道。所以，擴散是物質(zhì)從自由能高的一側(cè)向自由能低的一側(cè)流動。如植物的根部細胞負責吸收水份和礦物鹽 , 然后將它們運輸?shù)狡渌M織即是這種運輸。