【正文】 。 血紅蛋白提取和分離的實(shí)驗(yàn)操作與評(píng)價(jià) 樣品處理 粗分離 純化 純度鑒定 低速短時(shí)間離心 生理鹽水 除去雜質(zhì) (2)血紅蛋白的釋放 將洗滌好的紅細(xì)胞依次加入 至原血液體積 、 40%體積的 ， 置于磁力攪拌器上攪拌 10 min， 使紅細(xì)胞吸水 ， 血紅蛋白釋放出來(lái) 。 (2)血紅蛋白的釋放 紅細(xì)胞在蒸餾水和甲苯的作用下破裂 ， 釋放出血紅蛋白 。 答案 B 特別提醒 血紅蛋白的分離方法及相關(guān)原理比較： 方法 原理 凝膠色譜法 根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì) 電泳法 根據(jù)各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不同進(jìn)行分離 【 例 2】 下 圖是用除去 DNA的濾液進(jìn)行血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)的裝置，下列有關(guān)敘述不正確的是 ( )。 緩沖溶液通常是由一或兩種化合物 (緩沖劑 )溶解于水中制得 ，調(diào)節(jié)緩沖劑的配比就可制得不同 pH范圍的緩沖液 。 5． 答案 血 紅蛋白是有色蛋白，因此在凝膠色譜分離時(shí)可以通過(guò)觀察顏色來(lái)判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集洗脫液。 相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，只能分布在顆粒之間，通過(guò)的路程較短，移動(dòng)速度較快；相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子容易進(jìn)入凝膠內(nèi)的通道，通過(guò)的路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度較慢。 答案 D 【 例 1】 下 圖中，可表示為相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的移動(dòng)過(guò)程的是 ( )。 (4)蛋白質(zhì)的分離 如果 ， 說(shuō)明色譜柱制作成功 。 相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離 。 (2)配制 由 1～ 2種 溶解于水中配制而成 ， 通過(guò) 就可以得到在不同 pH范圍內(nèi)使用的緩沖液 。 酸和堿 基本不變 緩沖劑 調(diào)節(jié)緩沖劑 的比例 3． 電泳 (1)概 念 指 在電場(chǎng)的作用下發(fā)生 的過(guò)程 。 答案 B 1． 蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步 ： 、 、 和 。 氣泡 洗脫次序 紅色區(qū)帶均勻一致地移動(dòng) [思維激活 2] 透 析的目的是什么 ？ 依據(jù)了什么原理 ？ 提示 透析的目的在于去除血紅蛋白溶液中相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì) ， 透析依據(jù)的原理是半透膜只允許小分子透過(guò) ， 不允許大分子透過(guò) 。 血紅蛋白提取和分離的基本原理 思維導(dǎo)圖： 深度剖析 本題考查凝膠色譜法原理 。因此，樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流出，相對(duì)分子質(zhì)量中等的分子后流出，相對(duì)分子質(zhì)量最小的分子最后流出，這種現(xiàn)象又叫分子篩現(xiàn)象。這使血紅蛋白的分離過(guò)程非常直觀，大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。 2． 答案 在 一定范圍內(nèi) ， 能對(duì)抗外來(lái)少量強(qiáng)酸 、 強(qiáng)堿或稍加稀釋不引起溶液 pH發(fā)生明顯變化的作用叫做緩沖作用 ， 具有緩沖作用的溶液叫做緩沖溶液 。因此 ， 樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流出 ， 相對(duì)分子質(zhì)量最小的分子最后流出 ， 故選 B。 ② 方法 a． 采集血樣 → → → → e.低速離心 → 重復(fù) d、 e步驟三次 。 目的是 ， 以利于后續(xù)步驟的分離純化 。