【正文】 反復(fù)冷凍法：將細(xì)胞或整塊組織置 20℃冰箱內(nèi)凍結(jié)，然后置室溫融化，如此反復(fù)兩次，大部分組織細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)的顆粒可凍融破碎。 ? 掌握：抗血清的鑒定方法、抗血清的純化方法 第一節(jié) 免疫原的制備 免疫原 (immunogen)是能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗體或致敏淋巴細(xì)胞，并能在體內(nèi)外與抗體或致敏淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性反應(yīng)的物質(zhì)。 自溶法：利用組織和微生物的自身酶系統(tǒng)，在一定 PH和溫度下，使其細(xì)胞裂解。 ? 具有離子交換集團(tuán)的交聯(lián)葡萄糖、瓊脂糖和聚丙烯酰胺。 ? 白細(xì)胞介素 2（ IL－ 2）、 IL－ 干擾素、粒細(xì)胞－巨噬細(xì)胞集落刺激因子（ CSF， GM－ CSF）具有佐劑作用。 ? 即使用純抗原，用高度純的 IgG免疫動(dòng)物，出現(xiàn)的抗體總會(huì)有抗 r重鏈的抗體。 2023年 2月 5日星期日 5時(shí) 5分 1秒 05:05:015 February 2023 ? 1做前，能夠環(huán)視四周；做時(shí)，你只能或者最好沿著以腳為起點(diǎn)的射線(xiàn)向前。勝人者有力，自勝者強(qiáng)。 , February 5, 2023 ? 閱讀一切好書(shū)如同和過(guò)去最杰出的人談話(huà)。 :05:0105:05:01February 5, 2023 ? 1他鄉(xiāng)生白發(fā)，舊國(guó)見(jiàn)青山。 ? 鑒定純化方法： SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳（ SDS－ PAGE） 2℃ ～ 8℃ 保存：短期保存 冰凍保存：保存 5年 真空干燥保存：保存 5～ 10年 二、抗血清的保存 第五節(jié) 抗血清的純化 抗原免疫動(dòng)物制備的抗血清是成分復(fù)雜的混合物，除含有特異性抗體外，還存在與目的抗體不相關(guān)的成分。 ? 用木瓜酶水解得到的 Fc段作為抗原制備重鏈血清，胃蛋白酶水解抗體試劑用。 ? 將含多種分子量的樣品溶液 緩慢流經(jīng)凝膠柱時(shí)，各分子 在柱內(nèi)進(jìn)行兩種不同運(yùn)動(dòng)， 垂直向下移動(dòng)和無(wú)定向擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)。 ? 細(xì)胞抗原一般分為三個(gè)部分：膜蛋白抗原、細(xì)胞質(zhì)抗原（細(xì)胞器）和細(xì)胞核與核膜抗原。 顆粒性抗原－ 細(xì)胞、細(xì)菌、寄生蟲(chóng) 可溶性抗原－ 蛋白質(zhì)、糖蛋白、脂蛋白、核酸 細(xì)胞抗原：綿羊紅細(xì)胞 細(xì)菌抗原：菌體抗原、鞭毛抗原 寄生蟲(chóng)體抗原：蟲(chóng)卵 一、顆粒性抗原的制備 顆粒性抗原的制備 顆粒性抗原包括人和各種動(dòng)物細(xì)胞抗原以及各種細(xì)菌抗原和寄生蟲(chóng)體抗原。 ? 酶處理法：溶菌酶、蝸牛酶、纖維素酶等，在一定的條件下能消化細(xì)菌和組織細(xì)胞。 ? 被覆以離子化物質(zhì)的細(xì)粉。 ? 抗寄生蟲(chóng)或腫瘤疫苗研究應(yīng)用中，在細(xì)胞因子佐劑輔助下，刺激機(jī)體產(chǎn)生具保護(hù)作用的細(xì)胞免疫。 親和層析法： 雜抗原交聯(lián) Sepharose 4B柱 吸附劑方法： 借助雙功能試劑用不含特異抗原的抗 原混合液制成固相吸附劑 二、單價(jià)特異性抗血清 1．什么是免疫原？ 2．如何制備可溶性抗原？ 3．常用的細(xì)胞破碎方法有哪些？ 4．連接半抗原的載體有哪些？制備半抗原性免疫原的方法有哪些 5．什么是免疫佐劑？免疫佐劑有哪些種類(lèi)？免疫佐劑的作用機(jī)制有哪些 6．抗血清的鑒定包括哪些內(nèi)容？ 思考題 ? 弗氏完全佐劑的組成包括 ? A 液體石蠟、羊毛脂、卡介苗 ? B 液體石蠟、羊毛脂 ? C 液體石蠟、卡介苗 ? D 羊毛脂、卡介苗 ? E羊毛脂、卡介苗、氫氧化鈉 ? A 反復(fù)凍融法 B 研磨法 ? C 酶處理法 D 超聲破碎法 ? E 表面活性劑處理 ? 哪項(xiàng)不屬于可溶性抗原的制備方法 制備蛋白質(zhì)抗原時(shí)，破碎組織細(xì)胞最常用的方法是 ? 制備免疫球蛋白重鏈片段時(shí)，用于裂解免疫球蛋白的酶最好選用 ? A 木瓜蛋白酶 B 胃蛋白酶 ? C 限制性核酸內(nèi)切酶 D 胰蛋白酶 ? E 胰肽酶 ? 制備人工抗原時(shí)，最常用于偶聯(lián)半抗原的載體是 ? A 牛血清白蛋白 B牛甲狀腺球球蛋白 ? C 人血清白蛋白 D 人甲狀腺球蛋白 ? E 兔血清白蛋白 ? 免疫小鼠采血通常采用的方法是