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高效液相色譜法hplc(留存版)

2025-09-15 14:31上一頁面

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【正文】 2022 不溶于水 同系物 分配色譜 異構(gòu)體 吸附色譜 溶于水 不離解 反相液液色譜 可離解 陰離子交換色譜 陽離子交換色譜 離子對色譜 離子色譜 六、高效液相色譜分析法的應(yīng)用 由于高效液相色譜具有高速、高效、高靈敏度等特點(diǎn),近年來,國內(nèi)外許多專家學(xué)者將高效液相色譜技術(shù)應(yīng)用于天然產(chǎn)物(主要是中藥)、 農(nóng)藥和食品等行業(yè)中, 取得了明顯的效果。因此 , 如何快速、準(zhǔn)確分析乳制品中的三聚氰胺成為多方關(guān)關(guān)注的問題。 峰寬 在色譜峰兩側(cè)拐點(diǎn)處所作切線與峰底相交兩點(diǎn)間的距離。樣品分析的操作條件,必須嚴(yán)格控制于繪制校正曲線時的條件。該方法適用于肉制食品中鄰苯二甲酸酯類的檢測。此法特別適用于揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。 色譜條件:填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠(C18,10um);色譜柱為 250mmX46mm;流動相為磷酸二氫鈉液 ()— 磷酸氫二鈉液()— 甲醇 (含氫氧化四丁基銨)(425:425:100);檢測波長為 254nm;流速為 。 反相高效液相色譜法 即指 流動相的極性大于固定相極性 的色譜方法。 被測物由進(jìn)樣器注入,并隨流動相通過色譜柱,在柱上進(jìn)行分離后進(jìn)入檢測器,檢測信號由數(shù)據(jù)處理設(shè)備采集與處理,并記錄色譜圖。 類比 液柱色譜法和跑道賽跑 二、液相色譜分析法的特點(diǎn) 在技術(shù)上采用了高壓泵、高效固定相和高靈敏度檢測器,實(shí)現(xiàn)了分析速度快、分離效率高和操作自動化。 特點(diǎn):適用于分離相對分子質(zhì)量中等的油溶性試樣,對具有官能團(tuán)的化合物和異構(gòu)體有較高選擇性; 缺點(diǎn):非線形等溫吸附,常引起峰的拖尾 舉例: 苯乙胺類藥物 中重酒石酸去甲腎上腺素注射液的高效液相色譜測定法。 反相離子對色譜 是分離有機(jī)離子的有效方法,離子對試劑和其他添加劑的選用規(guī)則: — COOH,—SO3H基團(tuán)時,選用的離子對試劑應(yīng)是帶正電荷的有機(jī)銨鹽,以增加樣品陰離子在反響色偶中的保留值,選用的流動相一般是甲醇 /水; 離子對試劑,還要加入磷酸鹽或者其他緩沖液,以控制流動相的酸度; — NH2和 —NH基團(tuán)或其他陽離子時,選用的離子對試劑應(yīng)是烷基磺酸鹽或硫酸鹽; — NH2, —COOH,— SO3H等不同性質(zhì)的基團(tuán)時則以上規(guī)則選用的離子對試劑和添加劑都合理。 這種固載化的配基將只能和具有親和力特性吸附的生物大分子作用而被保留。 王美麗、陳海婷等建立了利用 HPLC檢測肉制食品中 5種鄰苯二甲酸酯類增塑劑 (PAEs)含量的方法。理想地說,內(nèi)標(biāo)物應(yīng)當(dāng)是一個能得到純樣的己知化合物,這樣它能以準(zhǔn)確、已知的量加到樣品中去,它應(yīng)當(dāng)和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學(xué)性質(zhì) (如化學(xué)結(jié)構(gòu)、極性、揮發(fā)度及在溶劑中的溶解度等 )、色譜行為和響應(yīng)特征,最好是被分析物質(zhì)的一個同系物。如果用極性柱分離時還與組分的極性有關(guān)。內(nèi)標(biāo)法是將一定重量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物,加到一定量的被分析樣品混合物中,然后對含有內(nèi)標(biāo)物的樣品進(jìn)行色譜分析,分別測定內(nèi)標(biāo)物和待測組分的峰面積(或峰高)及相對校正因子,按公式即可求出被測組分在樣品中的百分含量: 按各品種項(xiàng)下的規(guī)定,精密稱(量)取對照品和內(nèi)標(biāo)物,分別配成溶液,精密量取各溶液,配成校正因子測定用的對照溶液。如表 2列出的便是其中幾種。這種色譜技術(shù)稱為離子色譜。 離子交換色譜 基本原理:組分在固定相上發(fā)生的反復(fù)離子交換反應(yīng);組分與離子交換樹脂(固定相)之間親和力的大小與離子半徑、電荷、存在形式等有關(guān)。 其次 ,當(dāng)不同組分在色譜柱中運(yùn)動時,譜帶隨柱長展寬,分離情況與兩相
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