【正文】 復(fù)壯 （一） 常見的菌種退化現(xiàn)象 （ 二 ） 菌種退化的原因 菌種退化的主要原因是有關(guān)基因的負(fù)突變 。 ? 2． 處理目的基因 根據(jù)基因工程的 “ 設(shè)計(jì)藍(lán)圖 ” 的要求 ， 在從供體細(xì)胞中提取出的目的基因中加入專一性很強(qiáng)的限制性核酸內(nèi)切酶進(jìn)行處理 ， 從而獲得帶有特定基因并暴露出粘性末端的DNA單鏈部分 。是由兩個(gè)非異配型核的細(xì)胞接合后 ， 形成異核體細(xì)胞 ， 兩核能發(fā)生低頻率的接合與交換 ， 產(chǎn)生具有新性狀的個(gè)體 。 一、原核微生物的基因重組（三）接合（ conjugation ） ? 通過供體細(xì)菌和受體細(xì)菌完整細(xì)胞間的直接接觸而傳遞大段 DNA 的過程，稱為接合（有時(shí)也稱雜交）。 ? X 射線和 ? 射線為電離輻射，含有很高的能量，能產(chǎn)生電離作用，因而能直接或間接地改變 DNA 結(jié)構(gòu)。 ② 烷基在鳥嘌呤 引起 脫嘌呤作用 ， 使鳥嘌呤從 DNA 鏈上脫落下來 ， 進(jìn)而引起 DNA 復(fù)制時(shí)堿基對(duì)的缺失和置換 。 ? （ 5） 抗原突變型 。 ? 讓這種 T2 噬菌體侵染不含標(biāo)記元素的大腸桿菌，并在 T2 噬菌體完成了吸附和侵入后， ? 強(qiáng)烈攪拌 洗滌 ， 以便使吸附在菌體外表的 T2 噬菌體蛋白質(zhì)外殼脫離細(xì)胞并均勻分布 ，再進(jìn)行離心沉淀 ， 分別測(cè)定沉淀物和上清液中的同位素標(biāo)記 。第六章 微生物的遺傳變異與菌種選育 ? 在應(yīng)用微生物加工制造和發(fā)酵生產(chǎn)各種食品的過程中 ， 要想有效地大幅度提高產(chǎn)品的產(chǎn)量 、 質(zhì)量和花色品種 ,首先必須選育優(yōu)良的生產(chǎn)菌種 ， 才能達(dá)到目的 。 ? 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，幾乎全部 35S 都在上清液中，而幾乎全部 32P 和細(xì)菌一起出現(xiàn)在沉淀物中。 ? （ 6）其他突變型。 間接引起置換的誘變劑 A:BU /G:BrU ↗ G:BrU →G :C 5BU ↗ A:T－ → A:BU → A:T (a) G:BrU /A:BU ↗ A:BU→A :T 5BrU ↗ G:C→G :BrU →G :C (b) 5溴尿嘧啶的誘變效應(yīng) ； 5氨基尿嘧啶（ 5AU）、 8氮鳥嘌呤（ 8NG）、 α 氨基嘌呤（ α AP） 及 6氮嘌呤（ 6NP） 等。直接的效應(yīng)是堿基的化學(xué)鍵，脫氧核糖的化學(xué)鍵和糖 — 酸相連接的化學(xué)鍵斷裂； 第三節(jié) 微生物的基因重組 ? 基因重組又稱為遺傳重組 ， 它是指把兩個(gè)不同性狀個(gè)體內(nèi)的遺傳基因轉(zhuǎn)移到一起 ， 經(jīng)過遺傳分子的重新組合后 ， 形成新遺傳型個(gè)體的過程 。 ? 在細(xì)菌中，接合現(xiàn)象研究最清楚的是大腸桿菌。 其主要過程包括以下基本過程： ? 1． 菌絲聯(lián)結(jié) 發(fā)生在一些形態(tài)上沒有區(qū)別的 ， 但在遺傳性狀上可以有差別的兩個(gè)同種親本的體細(xì)胞 （ 單倍體 ） 間 。 必要時(shí)這種粘性末端也可用人工方法合成 。 （ 三 ） 防止菌種退化的措施 1． 控制傳代次數(shù) 2． 創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件 3． 利用不同類型的細(xì)胞進(jìn)行移種傳代 4． 采用有效的菌種保藏方法 （ 四 ） 退化菌種的復(fù)壯 。 ? 3． 體外重組 將上述分別處理過的目的基因和細(xì)菌質(zhì)粒 DNA片段 （ 或噬菌體核酸 ） 放在試管中 ， 在較低溫度 （ 5～ 6℃ ） 下混合 “ 退火 ” 。 異核體能夠獨(dú)立生活 。 ? F 因子又稱致育因子，是一種質(zhì)粒，分子量為 5 107 道爾頓 ； ? 雌性細(xì)菌不含 F 因子，稱為 F 菌株 ， ? 雄性細(xì)菌含有游離存在的 F 因子，稱為 F + 菌株 ， ? 當(dāng) 雄性細(xì)菌細(xì)胞中所含的 F 因子被整合在細(xì)胞核的 DNA 上，不呈游離狀態(tài)存在稱為 Hfr 菌株 （ 高頻重組菌株 ） ； ? 有 時(shí) 被整合在細(xì)胞核 DNA 上 的 F 因子，從 DNA上面脫落下來，呈游離存在，但在脫落時(shí)， F 因子有時(shí)能帶一小段細(xì)胞核 DNA。 ? 雜交中必然包含著重組 ， 而重組則不限于雜交一種形式 。在這些堿基類似物中，最常被應(yīng)用的是 5溴尿嘧啶（ 5BrU）和 α 氨基嘌呤（ α AP）。 （ 1） 不對(duì)應(yīng)性 。 ? 后來他又將甲 、 乙兩種變種的煙草花葉病毒拆開 ， 在體外分別將甲病毒的 RNA和乙病毒的蛋白質(zhì)結(jié)合 ， 將乙病毒的 RNA 和甲病毒的蛋白質(zhì)結(jié)合進(jìn)行重組 。遺傳和變異是相互關(guān)聯(lián) ， 同時(shí)又相互矛盾對(duì)立的兩個(gè)方面 ， 在一定條件下 ， 二者是相互轉(zhuǎn)化的 。 第一節(jié) 微生物遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ) ? 證明核酸是遺傳變異物質(zhì)基礎(chǔ)的經(jīng)典實(shí)驗(yàn) ? 肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn) ? 噬菌體的感染實(shí)驗(yàn) ? 煙草花葉病毒的拆開與重組實(shí)驗(yàn) 肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn) 注射 R 型活菌 小鼠不發(fā)病（存活） 注射 S 型滅活菌 小鼠不發(fā)?。ù婊睿? 注射 S 型活菌 小鼠發(fā)病死亡 注射 R型活菌 +S 型死菌 小鼠發(fā)病死亡 心血分離到 S 型活菌 ⑴ 動(dòng)物試驗(yàn)