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大孔吸附樹脂純化刺玫果總黃酮工藝研究論文(留存版)

2025-08-10 19:19上一頁面

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【正文】 羥基取代以及 B 環(huán)連接的位置等特點,將黃酮類化合物分為以下種類:1.黃酮類黃酮類即以2苯基色原酮為基本母核,且3位上無含氧基團取代的化合物。 刺玫果的開發(fā)前景從上述的刺玫果的藥理作用、營養(yǎng)價值來看,可以知道刺玫果是很有開發(fā)價值的野生果實資源,目前刺玫果正在作為一種天然保健藥物被日益重視和廣泛開發(fā),市場上已經(jīng)出現(xiàn)由該果汁為主開發(fā)研制的保健食品及保健飲品;臨床上也已經(jīng)研制出以刺玫果為原料的注射液及口服液。在測定刺玫果中維生素 C 含量時,我們在相同條件下測定山楂果維生素 C 含量,發(fā)現(xiàn)山楂果中總黃酮含量遠大于刺玫果肉(山楂濃縮汁中總黃硐含量大于 280mg/100mL;但在相同條件下,刺玫果中維生素 C 含量穩(wěn)定性很好,山楂果維生素 C 含量保存率較低,揭示刺玫果中除含有大量類黃酮保護維生素 C 免受破壞外,可能還含有大量抗氧化酶類如谷胱甘肽還原酶(GSSG12) 、過氧氫酶(CAT) 、過氧化物酶(POT)等,可抑制氧化酶系的作用。刺玫果對實驗性酒精、氯仿及亞硝酸鈉+氨基比林分布引起的小鼠肝損傷均有顯著拮抗作用,能抑制這些肝損傷劑對小鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶的增高及肝細胞的纖維化轉(zhuǎn)變,此作用可能與刺玫果富含齊墩果酸及維生素 C 有關(guān) [13]。治吐血、血崩、肋間神經(jīng)痛、月經(jīng)不調(diào)、肺結(jié)核咳嗽、腹瀉。以群叢分布為主,很少單生。目前刺玫果正在作為一種天然保健藥物被日益重視和廣泛開發(fā)。廣泛分布于東北及內(nèi)蒙、山西、河北等省?,F(xiàn)代藥理學研究表明:刺玫果含有豐富的營養(yǎng)成分及生物活性物質(zhì),具有健脾理氣、養(yǎng)血調(diào)經(jīng)、抗衰老、防治心血管疾病、增強免疫及促智等功效。當今社會人口老齡化已成為很多國家面臨的普遍問題,我國人口老齡化的現(xiàn)象也日益突出。并進一步采用單因素探索實驗和正交試驗優(yōu)選其提取工藝的最佳條件。 從刺玫果種籽中提取的脂肪油主要由高級脂肪酸及呋喃類衍生物組成。經(jīng)過現(xiàn)在研究者系統(tǒng)的藥理學研究表明,刺玫果還有如下的藥理作用 [9]: 刺玫果能提高人和小鼠體內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活性,抑制過氧化脂質(zhì)(LPO)和脂褐素的形成,清除體內(nèi)的有害自由基,從而延緩衰老。刺玫果有促進動物 DNA、RNA 及蛋白質(zhì)合成的作用,并且對 DNA 損傷有一定的修復作用。中醫(yī)還認為刺玫果性味甘甜,具有健脾氣、活血保精功效,可用于消化不良、食積、胃病、婦女經(jīng)血不調(diào)、經(jīng)絡(luò)不暢等癥狀。目前市場上出現(xiàn)的有關(guān)刺玫果的產(chǎn)品主要是以野生刺玫果為主加工而成的。6.二氫異黃酮類二氫異黃酮類具有異黃酮的3位被氧化的基本母核。5%氫氧化鈉乙醇液浸出效果好,但浸出液酸化后,析出的黃酮類化合物在稀醇中有一定的溶解度,降低了產(chǎn)品收得率。同時還可以通過控制臨界溫度和壓力的變化,來達到選擇性提取和分離純化的目的。脂溶性黃酮應(yīng)選擇非極性或弱極性樹脂,如 D101,AB8,HPD100,聚酰胺等;黃酮苷等應(yīng)選擇合成原料中加有甲基丙烯酸甲酯或丙烯腈的樹脂,如D201,D301,HPD600,NKA9 等。 總黃酮的含量測定方法 (1)紫外可見分光光度法:以分子吸收光譜為基礎(chǔ)的紫外可見分光光度法具有設(shè)備簡單、適用性廣、準確度和精密度較好等特點,已在中藥總黃酮含量分析中發(fā)揮著重要作用。Liu等測定竹葉中黃酮含量時,因Al(NO 3)3比色法的測量值不穩(wěn)定,采用過濾除去干擾物質(zhì),得到較好收率。黃酮化合物的熒光光度測定法尚不多見,已知桑色素用于鈹?shù)臒晒夤舛葴y定有很高靈敏度。分離最適電解液為20mM硼酸鈉、10mM十二烷基硫酸鈉(SDS)和5%甲醇的緩沖溶液(pH=)。Chiaki Sanbongi在研究巧克力中多酚類化合物在體外免疫系統(tǒng)中的抗氧化活性時,用反相高效液相色譜法進行多酚類化合物的分離,20%乙醇先將雜質(zhì)糖和蛋白質(zhì)洗脫,當用80%的乙醇進行洗脫時,可將大多數(shù)多酚洗脫下來。他們發(fā)現(xiàn),阿魏酸是堿性提取液的主要多酚類物質(zhì);同時在使用陰、陽離子電子噴霧電離質(zhì)譜時發(fā)現(xiàn),陽離子所能探測到的多酚類化合物的范圍較陰離子廣,并且陽離子在化合物結(jié)構(gòu)方面能提供更多的信息。一般為球形顆粒狀,粒度多為 2060 目。(1)檢測波長的選擇取蘆丁對照品溶液、供試品溶液及蒸餾水(配制空白溶液)各 5ml,分別置于 50ml容量瓶中各加 60%乙醇 10ml,搖勻,精密加入 5%亞硝酸鈉溶液 1ml,搖勻,放置 6 分鐘,加 10%硝酸鋁溶液 1ml,搖勻,放置 6 分鐘,加 4%氫氧化鈉溶液 10ml,然后加 60%乙醇稀釋至 50ml,搖勻,放置 10 分鐘。但在藥液倒入樹脂柱時,會沖起表面的樹脂顆粒,使樹脂柱表面形成凹形,藥液經(jīng)過樹脂柱時產(chǎn)生偏流與渦流。(5)重現(xiàn)性試驗取同一批刺玫果粉 5 份,每份 10g,按供試品溶液制備方法制備 5 份供試品溶液,每份取供試品溶液 10ml,置 50ml 容量瓶中,加 60%乙醇 10ml,搖勻,精密加入 5%的亞硝酸鈉溶液 1ml,搖勻,放置 6 分鐘,加入 10%的硝酸鋁溶液 1ml,搖勻,放置 6 分鐘,加入 4%的氫氧化鈉溶液 10ml,然后加入 60%的乙醇稀釋至刻度,搖勻,放置 10 分鐘,以試劑作空白,在 508nm 波長處測吸光度。(5)最佳工藝條件的選擇及驗證。17 / 46大孔樹脂吸附的原理是根據(jù)類似物吸附類似物的原則,一般非極性樹脂宜于從極性溶劑中吸附非極性有機物質(zhì),相反強極性樹脂宜于從非極性溶劑中吸附極性溶質(zhì),而中等極性吸附樹脂,不但能從非水介質(zhì)中吸附極性物質(zhì),也能從極性溶液中吸附非極性物質(zhì)。Veit從犬問荊中提出山柰酚3 氧蘆丁苷 7氧槐糖苷和山柰酚3 氧(6氧丙二?;咸烟擒?7氧葡萄苷。其中II和IV為首次從該植物中分得,同時還利用 2DNMR修正了Niwa對化合物III的 13CNMR的歸屬。東華大學Peng等采用毛細管電泳配合電化學(CEED),檢測中藥Rhododendron dauricumL. 中的黃酮含量,10 7。紫外檢測器(UV)是使用最普遍的檢測器,具有靈敏度高(最小檢出量可達10 71012 g),12 / 46不破壞樣品,可用于梯度洗脫等特點,UV檢測器中的DAD (光電二極管陣列檢測器)又是最常使用的。劉斌等就采用這種方法對蒲黃總黃酮的含量進行了測定, % 。7.超臨界流體提取法隨著國際上超臨界流體提取技術(shù)迅速發(fā)展,用該技術(shù)提取植物中的活性成分愈加廣泛。但超速離心法無法除去糖類等雜質(zhì),除雜也不完全,因此本法常作為膜分離法的前處理工藝。采用這種同時提取銀杏葉中水溶性和脂溶性有效成分的方法,有效成分提取率極高。滲漉法由于保持一定的濃度差,所以提取效率較高,浸液雜質(zhì)較少,但費時較長,溶劑用量大,操作麻煩。近年來,科學家們發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物具有抗氧化、降低脂質(zhì)過氧化反應(yīng)、預(yù)防心血管疾病、抗衰老等作用,隨著研究方法和技術(shù)的不斷提高,發(fā)現(xiàn)了許多新的種類和生理作用,特別是抗自由基和抗癌、防癌的作用,使黃酮類化合物的研究進入了一個新的階段,掀起了黃酮類化合物的研究、開發(fā)、利用的熱潮。果實球形或卵球形,直徑 1~,呈紅色或橙黃色,果肉的果邊萼片基部有茸毛,種實為瘦果,多數(shù)包于花托內(nèi)而成聚合果,果熟時花托肉質(zhì),果實為冬不落果。Se 是人體谷胱甘肽過氧化酶(GSHPX)的重要組成部分,Se 和維生素 E、維生素 C 有協(xié)同作用,蕓香甙類是維生素 C的抗氧化劑,幾種抗氧化劑共為一體,可顯著提高人體抗氧化能力。臨床觀察也發(fā)現(xiàn)刺玫果酒劑能明顯改善老年人失眠多夢、疲勞健忘及性功能衰退等癥狀。止血、理氣、解郁、調(diào)經(jīng)。土壤類型為壤土及沙質(zhì)壤土,耐瘠薄,在有機質(zhì)含量很低的沙灘地和防洪水壩上生長良好,不適宜通透性差的粘重土壤,對水分要求不嚴格,耐干旱,不適宜長期水澇環(huán)境。由此可見,天然刺玫果是一種不可多得的食、藥同源的寶貴資源 [3]。關(guān)鍵詞:刺玫果 總黃酮 大孔樹脂法 純化II / 46AbstractRosa multiflorais is the scientific name of Rosa davurica pall,also known as Wild rosa fruit. Rosa mountain fruit,this fruit is the Rosa mountain fruit of Rosaceae genus is growing in eastnorth China, especially in province of Heilongjiang. Modern pharmaceutical research shows that Rosa davurica Pall contains rich nutrients and bioactive substances, antiaging, prevention and treatment of cardiovascular disease, enhances immunity and the efficacy of nootropic, etc. Total flavonoids in the Rosa davurica Pall possess the function of prevention and treatment of high blood lipids, thrombosis dued to cardiovascular and cerebrovascular diseases. It has properties like highefficiency and the advantages of low toxicity side it is worth in doing research on refining total flavonoids in the fruit. Recently, there are the several mon methods in purifying Flavonoids such as waterextracting alcoholprecipitating,alcoholextracting waterprecipitating,acidbase method, saltdopositing,ioexchange and crystallization,and so practice, there is the limit in all these method new methods are investigated like flocculation precipitation, macroporous resin absorption,ultrafiltration,highspeed centrifugea tion, and so on.  In this thesis, we report extraction of total flavonoids from Rosa davurica pall by using the method of Macroporous was investigated basing on how the type of Eluant,PH of solution,concentration of samples influences Ultraviolet spectrophotometer method to analyze Flavonoids,This method is to know the content of total Flavonoids by measuring Ultraviolet absorption. As a result, it was found that the concentration of Eluant is 75 % ethanol, pH is 5 and the sample concentration is concentration of original solutionl, Adsorption rate is 2Bv / h, Elution rate is 1Bv/h. This method is simple, rapid and highefficient. This research have obtained some scientific results which will board the application of Rosa davurica pall .Keywords:Rosa davurica pall Total Flavonol Macroporous resin purification I / 46目 錄摘 要 ........................................................................................................................IABSTRACT .............................................................................................................II1 緒 論 ....................................................................................................................1 課題背景 ..................................
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