【正文】 的微生物徹底殺死，又要求盡可能少傷害外植體組織和表層細(xì) 胞。它可隨培養(yǎng)材料、用具等傳播；也可出現(xiàn)在培養(yǎng)基表面，或呈滴形云霧狀存在培養(yǎng)基內(nèi)，若出現(xiàn)時(shí)應(yīng)嚴(yán)格滅菌，清洗和消毒 用具，并更換消毒酒精 [6]。 8 第 5 章 污染的原因和預(yù)防措施 通常污染 在培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)材料附近經(jīng)常出現(xiàn)黏液或混濁的水跡，并有發(fā)酵狀泡沫。 預(yù)防方法和措施 基本方法 通風(fēng)：經(jīng)常開(kāi)窗，保持室內(nèi)空氣流通．可以使室內(nèi)真菌數(shù)量減少。還有使用時(shí)要調(diào)到適合的濃度 [16]。 本文從材料的收集到撰都是在老師和同學(xué)們的關(guān)心和鼓舞下順利進(jìn)行的。三次放氣后，關(guān)閥再通電，壓力表上升達(dá) 0． 1～ 0． 15Mpa 時(shí)，維持 15～ 20min。操作中可 采用 250 或 500ml 的廣口瓶，放入 95%的酒精，以便插入工具。這種方法簡(jiǎn)便，只需要把消毒的空 間關(guān)閉緊密即可。s antibacterial properties of the progress of applied research [J]. Liaoning Chemi cal, 2020,1234 (12) :541544. [6]Yu Hanshou, Wu Zhang, Yang Bing. Chitosan inhibit research progress of plant diseases[J].Natural products research and development,1999,12 (3) :9497. [7]Li Fang,shishaowei. Chitosan Preparation and application in the food industry Mechanism [J]. Food and Drug, 2020 (03A) :1922. [8]Wu, Xia water. Nonbiological factors on the antibacterial activity of chitosan [J]. Food Science, 2020,25 (7) :5355. [9]wuxiaoyong, QingXiao Zeng, MOshaofang. Several of the antibacterial properties of chitosan [J]. Food and Fermentation Industry, 2020,206 (2) :1821. 23 [10]Hu, ZHANG Lijun,baixuemei, et al. Plant Tissue Culture Pollution Analysis and the disinfection of explants [J]. Anhui Agricultural Science, 2020,35 (3) :680681. [11]Qiuping, Chitosan on mango Colletotrichum gloeosporioides, Diplodia antagonism bacteria [J]. Food and machinery, 2020,21, (1) :2527. 24 殼聚糖對(duì)紅掌組培污染菌的抑制作用 摘要： 在污染的紅掌繼代培養(yǎng)基中提取污染菌并進(jìn)行了分離及純化，初步鑒定為為半知菌亞門(mén)（ Deuteromycotina),絲孢綱（ Hyphpmycetes),絲孢目（ Hyphomycetales ） , 淡色孢科（ Dematiaceae ） , 木霉屬（ trichoderma）。 污染菌的鑒定 連續(xù)觀察純化后的菌落形態(tài)。 在第 5d， 3000 分子量的抑菌率超過(guò)其它兩 種分子量的抑菌率，而 3000 分子量的抑菌率也達(dá)到最高值。 3 討論與結(jié)論 殼聚糖成為新型抑菌劑的可能 植物組培的污染大致可分為兩種，一種是操作中產(chǎn)生得污染，主要是霉菌的污染；一種是外植體自身所帶雜菌主要是由真菌和細(xì)菌的污染 [10]。 抑菌試驗(yàn) 稱(chēng)取不同分子量殼聚糖用 1M 的乙酸溶液溶解后與 PDA 培養(yǎng)基混合，制成殼聚糖終濃度分別為（ 、 、 、 、 、 ） mg/ml 的培養(yǎng)基，用 1M 的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié) pH 值為 ，對(duì)照除不加殼聚糖外，其他與加有殼聚糖的培養(yǎng)基相同 [7]。結(jié)果表明：殼聚糖對(duì)該污染菌有抑制作用， 5 萬(wàn)和 25 萬(wàn)分子量的抑菌效果高于 3000 分子量，濃度越高，抑菌效果越好。熏蒸時(shí)，房間可預(yù)先噴濕以加強(qiáng)效果。 C 的溫度來(lái)殺死微生物。而培養(yǎng)基要嚴(yán)格遵守保壓時(shí)間，既要保壓徹底，又要防止培養(yǎng)基中的成分變質(zhì)或效力降低，不能隨意延長(zhǎng)時(shí)間。同學(xué)們也不亦樂(lè)乎的為我提供幫助，他們積極的為我查資料并相互檢查錯(cuò)誤共同提高。在紅掌的組織培養(yǎng)中，除去培養(yǎng)基中的 VB VB煙酸等（保留肌醇）有機(jī)成分，經(jīng) 2～ 3 代培養(yǎng)后，能抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，對(duì)叢生芽生長(zhǎng)增殖沒(méi)有影響。 去濕：保持室內(nèi)空氣干燥，如使用空調(diào)“除濕”功能，也可減少真菌生長(zhǎng)繁殖。主要有以下幾類(lèi)：黃單胞菌屬、芽孢桿菌屬、假單胞菌屬、土壤桿菌屬、棒狀桿菌屬、歐文氏菌屬等。因?yàn)橛泻芏嘟M織培養(yǎng)的失敗，從材料、培養(yǎng)基條件等方面檢查均無(wú)問(wèn)題，只是由于操作技術(shù)不熟練，如脫毒培養(yǎng)抽取莖尖很小，操作時(shí)間長(zhǎng)了就會(huì)使莖尖失水變干，或不慎感染雜菌，再同時(shí)接種的環(huán)境又不是絕對(duì)無(wú)菌的。 常用消毒劑的消毒效果比較見(jiàn)表 21: 表 21 常用消毒劑的消毒效果比較 消毒劑 使用濃度（ %） 去除難易 消毒時(shí)間（ min） 效果 次氯酸鈣 9～ 10 易 5～ 30 很好 次氯酸鈉 2 易 5～ 30 很好 漂白粉 飽和溶液 易 5～ 30 很好 過(guò)氧化氫 10～ 12 最易 5～ 15 好 升汞 ～ 1 較難 20～ 30 好 酒精 70～ 75 易 幾秒至幾分鐘 好 抗菌素 4～ 5(mg/L) 中 30～ 60 較好 5 第 3 章 接種前的準(zhǔn)備工作 器皿、工具的滅菌 器皿與金屬器械的滅菌 玻璃器皿的滅菌 可采用濕熱滅菌法，即將玻璃器皿包扎后置入蒸汽滅菌器中進(jìn)行高溫高壓滅菌，滅菌時(shí)間可長(zhǎng)到 25～ 30min。培養(yǎng)基滅菌時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)，否則容易引起培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)成分的損失，并且瓊脂也會(huì) 隨 滅菌時(shí)間的延長(zhǎng)，凝固能力下降， 甚至不能凝固。 15 外文資料翻譯 9 檢查培養(yǎng)容器是否存在問(wèn)題 8 內(nèi)源性污染 其花色艷麗，花莖挺拔，葉型翠綠美觀，是當(dāng)今世界著名的切花和盆栽花卉之一，市場(chǎng)潛力大，具有極高的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。 8 預(yù)防方法和措施 10 結(jié) 論 其花色艷麗，花莖挺拔，葉型翠綠美觀，是當(dāng)今世界著名的切花和盆栽花卉之一，市場(chǎng)潛力大，具有極高的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。 C下滅菌所 必須的最少時(shí)間（ min） 2050 15 75150 20 250500 25 1000 30 1500 35 2020 40 當(dāng)滅菌鍋里的熱溶液冷卻時(shí)，必須十分小心，如果壓力下降過(guò)急，超過(guò)了溫度下降的速率，就會(huì)使液體滾沸，從培養(yǎng)容器之中溢出。這一步在無(wú)菌操作中有要反復(fù)進(jìn)行。 操作前要用 70% 的酒精擦洗工作人員的手，操作中要經(jīng)常用酒精擦洗手。而在外植體培養(yǎng)后 3～ 5 天內(nèi)并未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌污染，以后則不 段 出現(xiàn)明顯的或不明顯的細(xì)菌菌落，就可能是由內(nèi) 生細(xì)菌引起的污染[10]。 防霉：污染物品和污染培養(yǎng)基不要在培養(yǎng)室近距離開(kāi)瓶洗刷。 11 結(jié) 論 污染 問(wèn)題，是 紅掌 組織培養(yǎng)過(guò)程 中 難以杜絕的現(xiàn)象。 老師始終為人師表，不厭其煩，令我感到無(wú)比欽佩。高壓滅菌前后的培養(yǎng)基，其 pH 值下降 ～ 單位。包扎可用耐高溫的塑料。一般說(shuō)來(lái)，溫度越高，作用時(shí)間越長(zhǎng)，殺菌效果越 好。污染、褐化、玻璃化等是組織培養(yǎng)存在的主要問(wèn)題，其中污染最普遍 [2]。菌絲有隔，分生孢子梗長(zhǎng)，產(chǎn)生側(cè)向分枝，分 生枝上輪生短的產(chǎn)孢瓶體。但總體考慮到價(jià)格及其操作因素上本實(shí)驗(yàn)的結(jié)論是 5 萬(wàn)分子量 。抑菌率和時(shí)間上也沒(méi)有緊密的聯(lián)系。 培養(yǎng)基 PDA 培養(yǎng)基 土豆 200g，葡萄糖 20g，瓊脂 20g，蒸餾水 1000ml， pH 值自然。 inhibition effect Plant tissue culture, not only in plant breeding, rapid propagation of seedlings and the production of useful secondary metabolites, such as the use of a wide range of plant geic engineering is and Plant Mole cular Biology, one of the important foundation for the study [1]. Pollution, browning, glass and tissue culture are the main problems, including pollution of the most mon [2]. Therefore take effective prevention and control measures to reduce the chance of contamination occurred, tissue culture is an important guarantee for success. Chitosan (chitosan) is the chitin in strong alkaline conditions from B After the formation of acyl an important derivative is determined by a number of Nacetyl glucosamine through β(14) glycosidic bond linking the nature of 19 it more lively. Has natural antibacterial properties of chitosan, and a broad spectrum antimicrobial, in recent years, chitosan in various fields such as agriculture， medicine [3], manufacture [4], food [5], etc. The use of great importance. Tissue culture of the chitosan in the application of inhi