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正文內(nèi)容

廣石化分子生物學(xué)重點(diǎn)筆記含試題及答案(留存版)

  

【正文】 加工過(guò)程中消失的DNA序列,稱內(nèi)含子??蛇B續(xù)進(jìn)行,以親代5’→3’鏈為模板時(shí),子鏈不能以3’→5’方向合成,而是先合成出許多5’→3’方向的岡崎片段,然后連接起來(lái)形成一條子鏈;③終止:當(dāng)一個(gè)岡崎片段的339。在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控中,一種方式就是不同σ因子的表達(dá)和大量使用。9.DNA生物合成的起始,需要一段___ RNA ____為引物,引物由__引物_____酶催化完成,該酶需與—些特殊___蛋白質(zhì)____結(jié)合形成___引物體____復(fù)合物才有活性。24.在細(xì)菌細(xì)胞中,獨(dú)立于染色體之外的遺傳因子叫__質(zhì)粒_____。①與單鏈DNA結(jié)合防止堿基重新配對(duì)②保護(hù)復(fù)制中單鏈DNA不被核酸酶降解③與單鏈DNA結(jié)合,降低雙鏈DNATm值④以上都不對(duì)9.紫外線對(duì)DNA的損傷主要是(②)。①終止子②ρ因子③δ因子④dnaβ蛋白⑤α亞基23.RNA與DNA生物合成相同的是(②④⑤)。(√)15.以單鏈DNA為遺傳載體的病毒,DNA合成時(shí)一般要經(jīng)過(guò)雙鏈的中間階段。(√)11.DNA聚合酶I切除引物RNA屬3’→5’外切酶作用,切除錯(cuò)配的核苷酸屬5’→3’外切酶作用。①腺嘌呤取代胞嘧啶②胞嘧啶取代尿嘧啶③缺失三個(gè)核苷酸④插入二個(gè)核苷酸19.Crick于1958年提出的中心法則包括(①③⑤)。4.修補(bǔ)胸腺嘧啶有數(shù)種方法,其中之一是用DNA連接酶、DNA聚合酶等催化進(jìn)行,試問(wèn)這些酶按下列哪種順序發(fā)揮作用(③):①DNA連接酶→DNA聚合酶→核酸內(nèi)切酶②DNA聚合酶→核酸內(nèi)切酶→DNA連接酶③核酸內(nèi)切酶→DNA聚合酶→DNA連接酶④核酸內(nèi)切酶→DNA連接酶→DNA聚合酶5.DNA聚合酶在分類時(shí)屬于六大酶類中的哪一種(①)。形成的分子基礎(chǔ)是__堿基互補(bǔ)配對(duì)_____。5.解旋酶的作用是___使DNA雙螺旋打開(kāi)____,反應(yīng)需要ATP_提供能量,結(jié)合在后隨鏈模板上的解旋酶,移動(dòng)方向__ 5’→3’____,結(jié)合在前導(dǎo)鏈的rep蛋白,移動(dòng)方向___ 3’→5’____。提示:①目的不同,所使用的酶、原料及其它輔助因子不同,轉(zhuǎn)錄是合成RNA,復(fù)制是合成DNA;②方式不同:轉(zhuǎn)錄是不對(duì)稱的,只在雙鏈DNA的一條鏈上進(jìn)行,只以DNA的一條鏈為模板,復(fù)制為半不連續(xù)的,分別以DNA的兩條鏈為模板,在DNA的兩條鏈上進(jìn)行;③復(fù)制需要引物,轉(zhuǎn)錄不需要引物;④復(fù)制過(guò)程存在校正機(jī)制,轉(zhuǎn)錄過(guò)程則沒(méi)有;⑤轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物需要加工,復(fù)制產(chǎn)物不需要加工;⑥復(fù)制與轉(zhuǎn)錄都經(jīng)歷起始、延長(zhǎng)、終止階段,都以DNA為模板,新鏈按堿基互補(bǔ)原則,539。3.試述DNA復(fù)制過(guò)程,總結(jié)DNA復(fù)制的基本規(guī)律。29.非模板鏈(nontemplatestrand)[又稱正(+)鏈,編碼鏈(codingstrand),有意義鏈(sensestrand)]:與模板鏈互補(bǔ)的那條DNA鏈,稱非模板鏈。分點(diǎn)突變和結(jié)構(gòu)畸變。反應(yīng)需要能量。(√)11.每種氨基酸只能有一種特定的tRNA與之對(duì)應(yīng)。①UAA②UAU③UAC④UAG⑤UGA12.根據(jù)擺動(dòng)假說(shuō),當(dāng)tRNA反密碼子第1位堿基是I時(shí),能夠識(shí)別哪幾種密碼子(①②⑤)①A②C③G④T⑤U13.下列哪些因子是真核生物蛋白質(zhì)合成的起始因子(③④⑤)。l0.每形成一個(gè)肽鍵要消耗____4____個(gè)高能磷酸鍵,但在合成起始時(shí)還需多消耗____1____個(gè)高能磷酸鍵。,將正常的蛋白質(zhì)和突變體蛋白質(zhì)用胰蛋白酶消化后,進(jìn)行指紋圖分析。(2)轉(zhuǎn)移在合成酶催化下將氨基酸從氨基酸—AMP—酶復(fù)合物上轉(zhuǎn)移到相應(yīng)的tRNA上,形成氨酰tRNA。2.遺傳密碼是如何破譯的?提示:三個(gè)突破性工作(1)體外翻譯系統(tǒng)的建立;(2)核糖體結(jié)合技術(shù);(3)核酸的人工合成。當(dāng)外源DNA插入后,LacZ基因不能表達(dá),菌株呈白色,以此來(lái)篩選重組細(xì)菌。當(dāng)大腸桿菌生長(zhǎng)在缺乏葡萄糖的培養(yǎng)基中時(shí),CAP合成量增加,CAP具有激活乳糖(Lac)等啟動(dòng)子的功能。c、縮短長(zhǎng)度,切去不必要的片段,提高導(dǎo)入效率,增加裝載量。19.目前對(duì)昆蟲(chóng)病毒的基因工程改造主要集中于桿狀病毒,表現(xiàn)在引入(外源毒蛋白基因);(擾亂昆蟲(chóng)正常生活周期的基因);(對(duì)病毒基因進(jìn)行修飾)。11.半乳糖對(duì)細(xì)菌有雙重作用;一方面(可以作為碳源供細(xì)胞生長(zhǎng));另一方面(它又是細(xì)胞壁的成分)。當(dāng)外源DNA插入后,LacZ基因不能表達(dá),菌株呈白色,以此來(lái)篩選重組細(xì)菌。2.標(biāo)準(zhǔn)折疊單位:蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元α-螺旋與β-折疊通過(guò)各種連接多肽可以組成特殊幾何排列的結(jié)構(gòu)塊,此種確定的折疊類型通常稱為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。14.單克隆抗體:只針對(duì)單一抗原決定簇起作用的抗體。8.hnRNA與mRNA之間的差別主要有兩點(diǎn):(hnRNA在轉(zhuǎn)變?yōu)閙RNA的過(guò)程中經(jīng)過(guò)剪接,)、(mRNA的5′末端被加上一個(gè)m7pGppp帽子,在mRNA3′末端多了一個(gè)多聚腺苷酸(polyA)尾巴)。1轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的基本過(guò)程通常包括:①將克隆的外源基因?qū)氲揭粋€(gè)受精卵或胚胎干細(xì)胞的細(xì)胞核中;②接種后的受精卵或胚胎干細(xì)胞移植到雌性的子宮;③完成胚胎發(fā)育,生長(zhǎng)為后代并帶有外源基因;④利用這些能產(chǎn)生外源蛋白的動(dòng)物作為種畜,培育新的純合系。26.轉(zhuǎn)基因動(dòng)物常用的方法有:(逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法)、(DNA顯微注射法)、(胚胎干細(xì)胞法)。根據(jù)這一方法,就可得到一組以ddNTP結(jié)尾的長(zhǎng)短不一的DNA片段。但不能區(qū)分是否已重組。8.反密碼子(anticodon):指tRNA反密碼子環(huán)中的三個(gè)核苷酸的序列,在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中通過(guò)堿基配對(duì),識(shí)別并結(jié)合到mRNA的特殊密碼上。(1)二位點(diǎn)模型A位:氨酰tRNA進(jìn)入并結(jié)合的部位;P位:起始氨酰tRNA或正在延伸的肽基tRNA結(jié)合部位,也是無(wú)載的tRNA從核糖體上離開(kāi)的部位。對(duì)于具有四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì),其亞基可以由一個(gè)基因編碼的相同肽鏈組成,也可以由不同肽鏈組成,不同肽鏈可以通過(guò)一條肽鏈加工剪切形成,或由幾個(gè)不同單順?lè)醋觤RNA翻譯,或由多順?lè)醋觤RNA翻譯合成。7.氨酰tRNA合成酶對(duì)___氨基酸_______和相應(yīng)的__tRNA______有高度的選擇性。①空載tRNA的脫落發(fā)生在“A”位上②核糖體沿mRNA的3’→5’方向相對(duì)移動(dòng)③核糖體沿mRNA的5’→3’方向相對(duì)移動(dòng)④核糖體在mRNA上一次移動(dòng)的距離相當(dāng)于二個(gè)核苷酸的長(zhǎng)度9.在蛋白質(zhì)合成中,下列哪一步不需要消耗高能磷酸鍵(①)。(√)8.在大腸桿菌中,一種氨基酸只對(duì)應(yīng)于一種氨酰tRNA合成酶。6.單鏈DNA結(jié)合蛋白(singlestrandbindingprotein,SSB):是一類特異性和單鏈區(qū)DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)。逆轉(zhuǎn)錄酶具有多種酶活性:依賴RNA的DNA聚合酶活性;依賴DNA的DNA聚合酶活性,RNA水解酶活性,DNA合成方向5’→3’。26.基因工程(又稱基因重組技術(shù))(gene/geneticengineering):是將外源基因經(jīng)過(guò)剪切加工,再插入到一個(gè)具有自我復(fù)制能力的載體DNA中,將新組合的DNA轉(zhuǎn)移到一個(gè)寄主細(xì)胞中,外源基因就可以隨著寄主細(xì)胞的分裂進(jìn)行繁殖,寄主細(xì)胞也借此獲得外源基因所攜帶的新特性。E.coliDNA聚合酶I是多功能酶,具有:①DNA聚合酶活性,能按模板要求,以5’→3’方向合成DNA,在DNA復(fù)制中,常用以填補(bǔ)引物切除后留下的空隙;②539。提示:①獲取外源目的基因;②尋找基因載體(通常為質(zhì)粒、噬菌體等)使用限制性內(nèi)切酶,使目的基因與載體產(chǎn)生相同粘性末端,兩個(gè)末端互補(bǔ)連接,形成重組DNA;③通過(guò)轉(zhuǎn)化(或感染)將重組DNA引入寄主細(xì)胞;④從大量的寄主細(xì)胞中篩選出帶有重組體的細(xì)胞進(jìn)行克隆。DNA聚合酶Ⅱ主要負(fù)責(zé)DNA的___修復(fù)____作用。18.真核生物RNA聚合酶共三種___ RNA聚合酶I ___、___ RNA聚合酶Ⅱ___、__ RNA聚合酶Ⅲ____,它們分別催化__ rRNA _____、__ mRNA _____和___ tRNA 5SrRNA ____的生物合成。③RNA鏈的延長(zhǎng)方向是5’→3’。→539。(√)8.依賴DNA的RNA聚合酶由緊密結(jié)合的α2ββ’σ亞基組成,其中σ因子具有識(shí)別起始部位和催化RNA合成的功能。()18.RNA也能以自身為模板合成一條互補(bǔ)的RNA鏈。()2.原核生物DNA的合成是單點(diǎn)起始,真核生物為多點(diǎn)起始。①以RNA為模板合成DNA②需要一個(gè)具有3’OH末端的引物③以5’→3’方向合成,也能3’→5’方向合成④以dNTP為底物12.體內(nèi)參與甲基化反應(yīng)的直接甲基供體是(②)。不在mR—NA上出現(xiàn),不代表蛋白質(zhì)的DNA序列叫__內(nèi)含子_____。12.DNA突變主要分為_(kāi)_點(diǎn)突變_____和__結(jié)構(gòu)畸變_____兩大類。結(jié)合(binding):σ與RNApol結(jié)合,大大降低了后者與DNA鏈的非特異性結(jié)合,而到了正確的promoter處,其親和力提高了100倍;解旋(unwinding):RNApol將使約17bp的DNA解螺旋,形成一個(gè)openplex;起始(initiation):RNApol合成810個(gè)nt,σ因子被釋放;延長(zhǎng)(elongation):形成一個(gè)轉(zhuǎn)錄泡,開(kāi)始延長(zhǎng);終止(termination):(1)不依賴于ρ蛋白的terminator形成一個(gè)大發(fā)夾,在新合成RNA中其后有一段寡聚U,導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄終止,RNApol被釋放;(2)依賴于ρ蛋白的terminator也形成一個(gè)發(fā)夾,但由于沒(méi)有長(zhǎng)段U,所以需要ρ蛋白幫助,終止RNA合成。DNA復(fù)制基本規(guī)律:①?gòu)?fù)制過(guò)程為半保留方式;②原核生物單點(diǎn)起始,真核生物多點(diǎn)起始,復(fù)制方向多為雙向,也有單向;③復(fù)制方式呈多樣性,(直線型、Q型、滾動(dòng)環(huán)型…等);④新鏈合成需要引物,引物RNA長(zhǎng)度—般為幾個(gè)~10個(gè)核苷酸,新鏈合成方向5’→3’,與模板鏈反向,堿基互補(bǔ);⑤復(fù)制為半不連續(xù)的,以解決復(fù)制過(guò)程中,兩條不同極性的鏈同時(shí)延伸問(wèn)題,即…—條鏈可按5’→3’方向連續(xù)合成稱為前導(dǎo)鏈,另一條鏈先按5’→3’方向合成許多不連續(xù)的岡崎片段(原核生物一般長(zhǎng)10002000個(gè)核苷酸,真核生物一般長(zhǎng)100200個(gè)核苷酸),再通過(guò)連接酶連接成完整鏈,稱后隨鏈,且前導(dǎo)鏈與后隨鏈合成速度不完全—致,前者快,后者慢;⑥復(fù)制終止時(shí),需切除前導(dǎo)鏈、岡崎片段的全部引物,填補(bǔ)空缺,連接成完整DNA鏈;⑦修復(fù)和校正DNA復(fù)制過(guò)程出現(xiàn)的損傷和錯(cuò)誤,以確保DNA復(fù)制的精確性。36.核內(nèi)不均一RNA(hnRNA):是真核生物細(xì)胞核內(nèi)的mRNA前體分子,分子量較大,并且不均一,含有許多內(nèi)含子。23.重組修復(fù)(rebinationrepair):DNA在有損傷的情況下也可以復(fù)制,復(fù)制時(shí)子代鏈躍過(guò)損傷部位并留下缺口,通過(guò)分子間重組,從完整的另一條母鏈上將相應(yīng)的核苷酸序列片段移至子鏈缺口處,然后用再合成的多核苷酸的序列補(bǔ)上母鏈的空缺,此過(guò)程稱重組修復(fù)。12.岡崎片段(Okazakifragment)、后隨鏈(1aggingstrand):在DNA復(fù)制過(guò)程中,以親代鏈(5’→3’)為模板時(shí),子代鏈的合成不能以3’→5’方向進(jìn)行,而是按5’→3’方向合成出許多小片段,因?yàn)槭菍榈热搜芯堪l(fā)現(xiàn),因此稱岡崎片段。最初由Crick(1958)提出,經(jīng)后人的不斷補(bǔ)充和修改,現(xiàn)包括反轉(zhuǎn)錄和RNA復(fù)制等內(nèi)容。()2.密碼子在mRNA上的閱讀方向?yàn)?’→3’。①線粒體②葉綠體③高爾基體④核糖體3.真核生物的延伸因子是(④)。氨酰tRNA __為原料直接供體,以__核糖體_____為合成楊所。8.蛋白質(zhì)合成中如何保證其翻譯的正確性?提示:(1)氨基酸與tRNA的專一結(jié)
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