【正文】 三個基因編碼的三個亞單位組成的酶，具有：核酸外切酶V活性；解旋酶；核酸內(nèi)切酶；ATP酶；ssDNA外切酶活性。這兩個序列是RNA聚合酶與啟動子的結(jié)合位點，能與σ因子相互識別而具有很高的親和力。SL1 因子是一個四聚體蛋白，其作用類似于細(xì)菌，本身對于啟動子沒有特異性，但一旦UBF1 結(jié)合，SL1 就可以協(xié)同UPE結(jié)合到此覆蓋的DNA 延伸區(qū)域，可能其主要功能是使RNA 聚合酶正確的定位在起始位點。eg4: 核苷酸八聚體（Oct,8bp長的序列元件）能增強真核生物啟動子的轉(zhuǎn)錄功能。14. 如何實現(xiàn)真核生物一蛋白基因在大腸桿菌細(xì)胞中受控、穩(wěn)定、分泌和高效表達(dá)。但也可能出現(xiàn)外顯子和內(nèi)含子數(shù)目及所在位置不固定的情況，選擇性剪接的直接后果是一個基因產(chǎn)生多個不同功能的蛋白質(zhì)?，F(xiàn)在, 人們已經(jīng)開始應(yīng)用核酶技術(shù)通過抑制端粒酶活性, 從而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。原核細(xì)胞中幾個功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因常串聯(lián)為一個轉(zhuǎn)錄單位，可以編碼幾種功能相關(guān)的蛋白質(zhì)，稱為多順反子。轉(zhuǎn)錄的調(diào)空是在啟動區(qū)和操縱區(qū)進(jìn)行的。從S2起始的轉(zhuǎn)錄則完全依賴于葡萄糖，高水平的cAMPCAP能抑制由這個啟動子起始的轉(zhuǎn)錄。處于伸展?fàn)顟B(tài)或錯誤折疊的蛋白質(zhì)不但失去了活性，而且還會與其他功能性蛋白質(zhì)結(jié)合形成不溶的聚合體。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)錯誤折疊的蛋白質(zhì)的水平比較低時，分子伴侶DnaK和蛋白酶HflB是游離的，它們與σ32結(jié)合并使之降解。如雌性哺乳動物細(xì)胞有兩個x染色體，其中一個高度異染色質(zhì)化而永久失去活性。而保持完整基因組的細(xì)胞則成為下一代的生殖細(xì)胞。mRNA的二級結(jié)構(gòu)是翻譯起始調(diào)控的重要因素之一。HSP與受損傷蛋白質(zhì)結(jié)合后釋放出HSF單體，HSF單體再聚合成具有轉(zhuǎn)錄活性的的三聚體。GalR與galE、T、K及操縱區(qū)O等離得很遠(yuǎn)，而galR產(chǎn)物對galO的作用與lacIlacO的作用相同。19. 分析大腸桿菌乳糖操縱子的正負(fù)調(diào)控機制。大多數(shù)細(xì)胞可產(chǎn)生二十種不同的氨酰tRNA合成酶，每一種酶既識別tRNA，又能識別氨基酸，對兩者都具有高度專一性。②核酶與多藥耐藥性：多藥耐藥性(Multidrug resistance, MDR) 是腫瘤化療失敗的主要原因。這兩種蛋白質(zhì)表達(dá)自同一種前體mRNA，通過2個539。它們各自被有關(guān)因子識別和結(jié)合。TATA盒傾向于被富含G*C對的序列環(huán)繞，可能是TATA盒起作用的一個因子。C堿基對，而且它們約有85%是一致的。該反轉(zhuǎn)錄酶再以病毒RNA 為模板，轉(zhuǎn)錄出與病毒RNA序列互補的單鏈DNA分子，并以此為模板，利用宿主DNA聚合酶指導(dǎo)合成第二條DNA鏈，以雙鏈DNA形式整合到宿主細(xì)胞基因組中，接著就可以被宿主的Ⅱ型聚合酶轉(zhuǎn)錄。8. 闡述DNA重組中相關(guān)的重要蛋白質(zhì)。堿基切除修復(fù)是先由糖基酶識別和去除損傷的堿基，在DNA單鏈上形成無嘌呤或無嘧啶的空位,這種空缺的堿基位置可以通過兩個途徑來填補：一是在插入酶的作用下以正確的堿基插入到空缺的位置上；二是在核酸內(nèi)切酶的催化下在空位的5’端切開DNA鏈，從而觸發(fā)上述一系列切除修復(fù)過程。這個過程。當(dāng)細(xì)胞中存在足夠的SSB和DNA gyrase時，DnaB的解鏈效率非常高。3. 解釋大腸桿菌DNA復(fù)制的基本過程。α螺旋：肽鏈的某段局部盤曲成螺旋形結(jié)構(gòu)。他們發(fā)現(xiàn)了有些基因不起合成蛋白質(zhì)模板作用，只起調(diào)節(jié)或操縱作用。有的生物基因為RNA。因而從基因轉(zhuǎn)錄效果看，基因由外顯子和內(nèi)含子構(gòu)成。Domain結(jié)構(gòu)域：多肽鏈在二級結(jié)構(gòu)或超二級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上形成三級結(jié)構(gòu)的局部折疊區(qū)，它是相對獨立的緊密球狀實體，稱為結(jié)構(gòu)域。Helicase，任何DNA在被復(fù)制前都必須解開雙鏈，這個過程是由helicase來完成的，它可在ATP的作用下將DNA母鏈不斷解開形成單鏈。DNA子鏈被合成后，母鏈立即被甲基化（稱為hemimethylated）。方向合成DNA的催化活性，每秒可以合成8個核苷酸ε 亞基具有339。新鏈圍繞著環(huán)狀負(fù)鏈模板延伸，直到到達(dá)原點并代替原點。人類細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了一種端粒結(jié)合蛋白，但人類染色體末端的DNA蛋白復(fù)合體的結(jié)構(gòu)還不清楚。重組修復(fù)從 DNA分子的半保留復(fù)制開始，在嘧啶二聚體相對應(yīng)的位置上因復(fù)制不能正常進(jìn)行而出現(xiàn)空缺,在大腸桿菌中已經(jīng)證實這一DNA損傷誘導(dǎo)產(chǎn)生了重組蛋白,在重組蛋白的作用下母鏈和子鏈發(fā)生重組,重組后原來母鏈中的缺口可以通過DNA多聚酶的作用,以對側(cè)子鏈為模板合成單鏈DNA片斷來填補,最后也同樣地在連接酶的作用下以磷酸二脂鍵連接新舊鏈而完成修復(fù)過程。它能結(jié)合到雙鏈的上并使雙鏈解旋并分開，當(dāng)遇到Chi位點時，RecBCD就切開一條單鏈，并失去RecD亞單位，RecBC繼續(xù)解開雙鏈。在35區(qū)和10區(qū)之間的距離17177。發(fā)生在兩個部位的結(jié)合因子之間相互作用的詳細(xì)情況尚不清楚。13. RNA聚合酶III識別的啟動子有哪幾類？其定位因子是什么？RNA聚合酶的啟動子有三種類型結(jié)構(gòu)。需要一種高效的原核表達(dá)載體，包括一個強大并且可以嚴(yán)緊調(diào)節(jié)的啟動子；一位于翻譯起始密碼子5’端大約9bp的SD序列；位于目的基因3’末端的一個高效轉(zhuǎn)錄終止子。mRNA 選擇性剪接涉及生命現(xiàn)象的很多方面，如細(xì)胞分化，個體發(fā)育，免疫機理，某些遺傳病的發(fā)生等等。2．核酶在抗病毒中的應(yīng)用①抗艾滋病病毒HIV：HIV的長末端重復(fù)序列(LTR)參與病毒蛋白生成的調(diào)節(jié)，起著類似“開關(guān)”的作用。真核的mRNA只編碼一種蛋白質(zhì)，稱為單順反子。正調(diào)空機制：cAMPCAP復(fù)合物與 DNA結(jié)合改變了這一區(qū)段 DNA次級結(jié)構(gòu)，促進(jìn)了RNA聚合酶結(jié)合區(qū)的解鏈。當(dāng)有cAMPCAP時，轉(zhuǎn)錄從S1開始，當(dāng)無cAMPCAP時，轉(zhuǎn)錄從S2開始。 大腸桿菌的最適生長溫度是37℃，當(dāng)環(huán)境溫度升至43℃左右時，細(xì)菌還能正常生長。它們還能與正在合成的σ32結(jié)合，阻止其進(jìn)一步的合成。 順式作用元件：如增強子，存在于真核細(xì)胞中，能顯著加強轉(zhuǎn)錄活性，由比較集中的保守序列組成，它與啟動子的相對位置無關(guān)，也無方向性。. 染色體丟失：某些低等真核生物，如蛔蟲，在其發(fā)育早期卵裂階段，所有分裂細(xì)胞出一個外，均將異染色質(zhì)部分刪除掉，從而使染色質(zhì)減少約一半。熱激誘導(dǎo)σ32的合成發(fā)生在翻譯水平。這些變性蛋白的折疊發(fā)生改變，暴露出分子內(nèi)部的疏水區(qū)域，從而導(dǎo)致HSP與其結(jié)合。這3個酶的作用是使半乳糖變成葡萄糖1磷酸。通過翻譯弱化和翻譯偶聯(lián)在翻譯水平上進(jìn)行精確調(diào)節(jié)，具有重要意義。在蛋白質(zhì)翻譯中，每種tRNA分子在它到達(dá)核糖體之前都需與相應(yīng)的氨基酸結(jié)合，這種結(jié)合是在一系列被稱為氨酰tRNA合成酶作用下完成的。核酶的應(yīng)用舉例：1．核酶在腫瘤治療中的應(yīng)用主要集中在以下幾個方面①核酶與癌基因：核酶獨特的切割目的基因的方式有可能阻斷癌基因的表達(dá), 從而逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞惡性增殖, 并誘導(dǎo)其分化和凋亡。一個選擇性剪接的例子就是SV40,當(dāng)它感染細(xì)胞時，引導(dǎo)2種蛋白質(zhì)的合成：大T抗原和小T抗原。（TFⅢB含TBP是真正的轉(zhuǎn)錄因子，A、C可被高鹽除掉，是裝配因子）RNA聚合酶Ⅲ的第Ⅲ類啟動子位于轉(zhuǎn)錄起點的上游，這類啟動子有三個上游元件，負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄snRNA的基因，其元件主要包括：OctPSETATA(Oct 核苷酸八聚體；PSE近端序列元件，提高轉(zhuǎn)錄效率；TATA區(qū)。它可以在所有真核生物中找到。與一般啟動子相比，這兩個區(qū)域都有不尋常的組成，富含G當(dāng)反轉(zhuǎn)錄病毒感染細(xì)胞時，pol基因就被宿主的RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生pol mRNA，并在宿主核糖體上合成包括反轉(zhuǎn)錄酶、整合酶等多個病毒復(fù)制和整合所需要的酶類。引起SOS反應(yīng)的信號消除后，recA蛋白的蛋白酶活力喪失，lexA蛋白又重新發(fā)揮阻遏作用。從切除的對