【正文】 菌，應(yīng)當(dāng)根據(jù)材料的不用采取不同的方法，例如酪素和酪氨酸在110℃滅菌，蛋黃在無菌條件下取用即可 ，兩種菌對偏酸性的抗逆性較低；溶菌酶試驗(yàn)表明編號2C的菌株對溶菌酶具有一定的抗逆性；，通過渾濁度可以直觀地對比出菌株生長或者不生長，但是對于菌株的生長情況比較難以把握，在溶菌酶試驗(yàn)中可以使用固體培養(yǎng)基，用小濾紙片浸沒在溶菌酶中，通過透明圈的大小來判斷抑制情況，編號1B的菌種能對檸檬酸鹽進(jìn)行利用，但該實(shí)驗(yàn)一直到第五天才出現(xiàn)輕微現(xiàn)象，第六天才出現(xiàn)明顯現(xiàn)象，說明芽孢桿菌對檸檬酸鹽的利用能力較低，需要長時(shí)間培養(yǎng)觀察才能做出判定，僅是初步鑒定，缺乏比較嚴(yán)格的重復(fù)和對照，部分項(xiàng)目可能存在誤差，部分項(xiàng)目由于條件限制沒有實(shí)施，實(shí)際操作中對微生物的種的鑒定還應(yīng)該進(jìn)行基因檢測和鑒定才能最終判斷 我們選取淀粉檢驗(yàn)時(shí)透明圈較大的2C作為酶活檢測對象，實(shí)際結(jié)果酶活力較并不高；通過課堂知識和老師講解，我們知道種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基的配方不同是由于微生物的最適生長條件和最適產(chǎn)物條件的不同，對于我們選用的菌株，要得出最適的發(fā)酵配方是需要建立大量的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上的，我們通過查詢資料得帶的配方只能作為參考使用，實(shí)際上可能并非該菌株的最優(yōu)配方；因此測得的酶活力相應(yīng)的只能作為一個參考量，并非該菌株的酶活的最優(yōu)結(jié)果6．綜合討論通過本次實(shí)驗(yàn)，我們對于一個實(shí)驗(yàn)，從開始查閱資料、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)到實(shí)驗(yàn)操作、記錄和總結(jié)有一個比較清晰的了解，同時(shí)也確實(shí)體會到了做實(shí)驗(yàn)的辛苦。而生理生化鑒定由于條件限制我們只能進(jìn)行部分項(xiàng)目，總體情況良好，對于某些項(xiàng)目，例如卵黃實(shí)驗(yàn)、溶菌酶試驗(yàn)、酪素、酪氨酸、還存在一些不同，在老師講解過來，還需要經(jīng)過討論、理解后才開始實(shí)施，實(shí)驗(yàn)操作也存在一些差錯導(dǎo)致項(xiàng)目重來的情況，造成時(shí)間和材料的浪費(fèi)，說明實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)和設(shè)計(jì)的時(shí)候在這方面做還存在不足，對項(xiàng)目的了解和認(rèn)識還不夠深入。，若有，則菌株有鞭毛，但是如果是需氧型的話會在培養(yǎng)基表面上形成一薄膜；若是不會運(yùn)動的細(xì)菌，培養(yǎng)基中的穿刺線很清晰，直立生長，則無鞭毛。記錄并編號。并同法完成另一份樣品的稀釋。其方法是先用結(jié)晶紫初染，再加媒染劑碘液以增加染料與細(xì)胞的親和力，使結(jié)晶紫和碘在細(xì)胞膜上形成相對分子質(zhì)量較大的復(fù)合物，然后進(jìn)行脫色（乙醇），最后用沙黃液復(fù)染。平板分離法普遍用于微生物的分離與純化。（1）了解微生物分離純化的原理及微生物分離純化常用方法和技術(shù)；（2）掌握從土壤中篩選產(chǎn)淀粉酶菌株的原理及方法；（3）掌握微生物的搖瓶培養(yǎng)方法及淀粉酶活力測定的原理及方法；（4）培養(yǎng)學(xué)生自行設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)流程、綜合分析解決問題及判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果的能力；（5）對所學(xué)習(xí)過的微生物實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行綜合技能訓(xùn)練；（6）從不同環(huán)境土壤樣品中篩選出能產(chǎn)淀粉酶的芽孢桿菌，并分析比較各產(chǎn)淀粉酶菌株的產(chǎn)淀粉酶活力及總結(jié)各芽孢桿菌在土壤中的分布情況。生孢不被氧所抑制。 用一種染色劑對涂片進(jìn)行染色，簡便易行，適于進(jìn)行微生物的形態(tài)觀察。（3）40℃時(shí)在5min內(nèi)水解淀粉釋放1mg麥芽糖所需的酶量為1個酶活力單位（U）計(jì)算公式:酶活力單位（U）=C酶V酶n（C酶—酶液中麥芽糖的濃度 V酶—提取液的總體積 n—酶液的稀釋倍數(shù)） 土樣2種樣品1：生化樓樓下河道邊樣品2：菊苑飯?zhí)煤箝T附近 牛肉膏 （3g） 蛋白胨（10g） 氯化鈉 （5g） 瓊脂（15g）蒸餾水 （1000ml）pH （淀粉牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基）可溶性淀粉（2g） 牛肉膏（3g） 蛋白胨（10g） 氯化鈉（5g ） 瓊脂（15g） 蒸餾水（1000ml）pH 甲液（+5mol/L醋酸100mL乙液（ + 5mol/醋酸100mL）硝酸鉀() 蛋白胨 (5g)蒸餾水(1000ml)pH 營養(yǎng)瓊脂 () 葡萄糖(1g) 配成100ml培養(yǎng)基 卵黃鹽水(5ml)卵黃、鹽水分別滅菌，按1:1制取培養(yǎng)基與卵黃鹽水混合倒平板蛋白胨 (10g) 氯化鈉 (5g)蒸餾水 (1000ml) pH VP實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基 蛋白胨(10g) 氯化鈉 (5g) 葡萄糖 (5g) 蒸餾水 (1000ml)pH 葡萄糖/木糖/甘露醇/阿拉伯糖 （10g） 蛋白胨(10g) 氯化鈉 (5g) K2HP04() 1％溴甲酚紫(3ml) 蒸餾水 (1000ml) pH 酪氨酸()營養(yǎng)瓊脂() （分開滅菌，酪氨酸溶液110℃，營養(yǎng)瓊脂121℃，用時(shí)再混合，） 脫脂奶粉（5g，稀釋到50ml） 瓊脂（）（分開滅菌，酪素110℃，營養(yǎng)瓊脂121℃，現(xiàn)用現(xiàn)倒） 可溶性淀粉（2g） 牛肉膏(3g)蛋白胨(10g) 氯化鈉(5g)瓊脂 (5g)蒸餾水 (1000ml)pH (制斜面）氯化鈉(5g)　 硫酸鎂(MgSO4(按每種土樣選取5種菌計(jì)算，約10=25個平板)。在不同培養(yǎng)基中挑選所得滿足條件的菌種并編號A、B、C......假設(shè)一共n種菌。 發(fā)酵液的制備，選擇一個菌株，接三環(huán)菌種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，搖床培養(yǎng)，160 rpm/min , 37 ℃，48 h后，取1ml發(fā)酵液于離心管中，4000 rpm/min離心10 min，收集上清液，加1%淀粉溶液1mL、緩沖液3mL，于60℃水浴中預(yù)熱5min，于60℃水浴中保溫30min，沸水浴5min，迅速冷卻，加蒸餾水定容至20 mL。而我們本次實(shí)驗(yàn)中著重檢測其產(chǎn)淀粉酶的情況，檢測結(jié)果酶活偏低，但不能因此說明此菌的淀粉酶缺乏應(yīng)用價(jià)值，對于某種菌的最適生長培養(yǎng)條件和最適培養(yǎng)條件都是需要我們通過大量的實(shí)驗(yàn)來得到，我們在