【正文】 耐高溫的 、 需要保持干燥的物品的滅菌 )、 高壓蒸汽滅菌法(適合于培養(yǎng)基等物體的滅菌 )。 解析： 本題主要考查生物技術(shù)實踐中微生物的培養(yǎng)與分離 ，意在考查考生對相關(guān)知識的靈活運用能力 。 (2)滅菌是用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物 ，所以對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌；消毒是用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物 ，操作者的雙手需要進行清洗和消毒 ， 紫外線能使蛋白質(zhì)變性 ，還能損傷 DNA的結(jié)構(gòu) 。 (2)④ 與 ⑤ 培養(yǎng)基的區(qū)別主要是： ④ 中添加的是除 “ 苯酚 ” 以外的碳源 ， ⑤ 中添加的碳源只有苯酚；使用平板分離 (稀釋涂布平板或平板劃線分離 )法可以在平板培養(yǎng)基上獲得單菌落；采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時要倒置培養(yǎng) ， 目的是避免培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的水分影響微生物的生長 ，(3)、 (4)見答案 。 接種的方法除了平板劃線法外 ， 還可以用稀釋涂布平板法進行操作 。 用平板劃線法來培養(yǎng) ， 可進一步純化菌種 。 為防止雜菌污染需要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌 。 與微生物培養(yǎng)明顯不同的是 ， 用于組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中還需要加入 ________。 (2)降低培養(yǎng)液菌體濃度一般用稀釋的方法 。 (4)實驗結(jié)束后 ， 使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行滅菌處理才能掉 ，這樣做的目的是 ________________________。 如果要測定 ② 中活細(xì)菌數(shù)量 ， 常采用 ________法 。 (5)培養(yǎng)大腸桿菌時 ， 在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染 。 (2)純化菌種時 ， 為了得到單菌落 ， 常采用的接種方法有兩種 ， 即 ________和 ________。 一般說來 ， 菌落總數(shù)越多 ， 湖水遭受細(xì)菌污染的程度越 ________。 [2022 (2)利用該分離對象對某種抑菌物質(zhì)的抗性 ， 在混合培養(yǎng)物中加入該抑制物 ， 經(jīng)培養(yǎng)后 ， 原來占優(yōu)勢的微生物生長受抑制 ，而分離對象卻可乘機大大增殖 ， 在數(shù)量上占優(yōu)勢 。 (3)從功能上來看 ， 上述兩種培養(yǎng)基均屬于 ________培養(yǎng)基；從物理性質(zhì)來看 ， A屬于 ________培養(yǎng)基 。 (3)統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低 。 (2)纖維素酶的作用 (3)篩選方法：剛果紅染色法 ， 即通過是否產(chǎn)生 來篩選纖維素分解菌 。 稀釋涂布平板法廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)的研究 。將培養(yǎng)物進行一系列稀釋并接種到平板培養(yǎng) ， 統(tǒng)計培養(yǎng)后平板上的菌落數(shù) ， 就可以計算出原培養(yǎng)物的密度 。 (3)設(shè)置對照：指設(shè)置除了 以外 ， 其他條件都相同的實驗 ， 目的是排除實驗組中 對實驗結(jié)果的影響 ， 提高實驗結(jié)果的可信度 。 為了保證結(jié)果準(zhǔn)確 ， 一般選擇菌落數(shù)在 30～ 300的平板進行計數(shù) 。7H2O KCl 酵母 膏 水解 酪素 5 g 1 g g g g g g g 上述兩種培養(yǎng)基中的物質(zhì)溶解后 ， 均用蒸餾水定容至 1000 mL。 另外當(dāng)兩個或多個細(xì)菌連在一起時平板上只觀察到一個菌落 ， 所以偏小 。 3． 統(tǒng)計的菌落往往比活菌的實際數(shù)目低 。 (3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果 ， 應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于 ________中培養(yǎng) ， 培養(yǎng)的溫度設(shè)定在 37℃ 。課標(biāo)全國 ]有些細(xì)菌可分解原油 ， 從而消除由原油泄漏造成的土壤污染 。 (2)在微生物培養(yǎng)操作過程中 ， 為防止雜菌污染 ， 需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進行 ________(消毒 、 滅菌 )；操作者的雙手需進行清洗和 ________；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅 ， 其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性 ， 還能 ________________。 篩選的主要步驟如圖所示： ①為土壤樣品 。 (2)為了篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生物 ， 向培養(yǎng)基中加入________。 (3)篩選與純化：將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍 ，如果菌落周圍的現(xiàn)象是 ________， 則說明此種菌能夠 ________。 各取 mL已稀釋 103倍的水樣分別接種到三個培養(yǎng)基上培養(yǎng) ， 記錄的菌落數(shù)分別為5 5 57， 則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為 ________。 103 103＝ 108。 (2)下表是某公司研發(fā)一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方 。北京東城一模 ]某實驗小組欲從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌 ， 設(shè)計實驗步驟如下 ， 請給予合理的補充 。 (4)培養(yǎng)基滅菌 ， 接種環(huán)境滅菌 ， 接種過程無菌操作 。 (5)培養(yǎng)大腸桿菌時 ， 在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染 。 (3)降解原油能力越強的菌株 ， 在菌落周圍形成的分解圈越大 。 菌落是由一個細(xì)菌細(xì)胞繁殖而來的 ， 菌落多則說明細(xì)菌的數(shù)目就多 。 [2022 [2022 甲同學(xué)在實驗時得到了如圖所示的結(jié)果 ， 則纖維素分解菌位于( ) A. ③ B. ①② C. ②③ D. ①②③ (2)乙同學(xué)打算從牛胃中分離纖維素分解菌并計數(shù) ， 與分離醋酸菌相比 ， 進行培養(yǎng)時除了營養(yǎng)不同外 ， 最主要的實驗條件差別是 ________________， 該同學(xué)采用活菌計數(shù)法統(tǒng)計的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目 ________。 5． 課題延伸 由于分離分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基上可能生長著以尿素分解菌代謝產(chǎn)物為氮源的其他微生物 ， 因此還需借助生物化學(xué)方法對分離細(xì)菌作進一步鑒定 。 平板劃線法幾次灼燒滅菌的目的比較 第一次操作 每次劃線之前 劃線結(jié)束 目的 殺死接種環(huán)上原有的微生物，避免污染培養(yǎng)物 殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數(shù)目減少 殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者 如圖是微生物平板劃線示意圖 ， 劃線的順序為 12345。 2． 純化大腸桿菌的原理： 在培養(yǎng)基上將聚集的菌種稀釋分散成單個細(xì)胞 ， 形成單個菌落 ， 此菌落是由一個細(xì)胞繁殖而來的子細(xì)胞群體 。 選修一 生物技術(shù)實踐 專題一 微生物的利用 最新考綱 熱點提示 2．某種微生物數(shù)量的測定 3．培養(yǎng)基對微生物的選擇作用 4．利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用。 ⑦ 防止外來雜菌的入侵 3． 措 施 1． 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟： 計算 → →溶化 → →倒平板 。 (4)劃線用力大小要適當(dāng) ， 防止用力過大將培養(yǎng)基劃破 。 (2)以培養(yǎng)基加土壤樣品進行培養(yǎng)為實驗組 ， 培養(yǎng)基不加土壤樣品進行培養(yǎng)為對照組 ，