【正文】
ts and primer dimers are detected equally well. The LightCycler Instrument allows melting curve analysis Once the melting point of the product has been determined the LightCycler Instrument39。 ? 熒光定量 PCR檢測(cè)的是樣本的 初始濃度 ,而準(zhǔn)確測(cè)定初始濃度需要在 對(duì)數(shù)期 進(jìn)行。 軟件系統(tǒng)可以進(jìn)行參數(shù)設(shè)定、保存數(shù)據(jù)和報(bào)告結(jié)果,并將結(jié)果自動(dòng)保存在計(jì)算機(jī)中。( F1通道) TaqMan水解探針技術(shù) 雜交探針技術(shù)對(duì) PCR產(chǎn)物定量又稱熒光共振能量轉(zhuǎn)移, FRET 需要一對(duì)引物和一對(duì)探針,探針 A的 3`端為熒光染料供體;探針 B的 5`端作為熒光染料受體。 熒光信號(hào)的檢測(cè)方法: DNA結(jié)合染料技術(shù) 水解探針技術(shù)( TaqMan probe)技術(shù) 雜交探針技術(shù) 分子信標(biāo) The biggest disadvantage of SYBR is that it binds to any dsDNA。 ? 系統(tǒng)內(nèi)裝置有半導(dǎo)體 PCR、鹵鎢燈光源激發(fā)熒光信號(hào)、光柵分光、超低溫光電耦合器( CCD)攝象機(jī)收集熒光信號(hào)、計(jì)算機(jī)軟件分析系統(tǒng)等。 相同模板進(jìn)行 96次擴(kuò)增的擴(kuò)增曲線圖。 2個(gè)探針首尾相連,僅差一個(gè)堿基。 因此 , 只要獲得未知樣品的 Ct值 , 即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出該樣品的起始拷貝數(shù) 。 熒光實(shí)時(shí)定量 PCR( realtime quantitative PCR,RQPCR) ? 熒光定量 PCR( fluorescence quantitative PCR,FQPCR)