【正文】 予和 其 自然 光 周期 一 致的 光 照條 件 有利 于 幼胚 發(fā) 育。 B 、 大 多 數(shù) 被 子 植 物 的 胚 乳 是 三 倍 體 ， 能 否 通 過 胚 乳 培 養(yǎng) 獲 得 三 倍 體 植 株 而 得 到 無 籽 結(jié) 實(shí) ； C 、 研 究 離 體 培 養(yǎng) 條 件 下 胚 和 胚 乳 的 關(guān) 系 到 目 前 為 止 ， 已 有40 多 種 植 物 的 胚 乳 進(jìn) 行 了 培 養(yǎng) 。 ? 3 、植物激素 ? 在單子葉植物中，為了誘導(dǎo)愈傷組織，培養(yǎng)基中一般附加一定濃度的2,4D ，并配 合一定濃 度的細(xì)胞 分裂素。 在 誘 導(dǎo) 期 一 般 需 要 高 濃 度 的 生長 素 、 較 高 的pH， 分 化 期 需 要 較 高 濃 度 的 細(xì) 胞 分裂 素 。 ? 由于花粉粘連，撒播不均勻，因而影響撒播質(zhì)量；若待花囊自行裂開后再用，又不能保證花粉具有高的萌發(fā)率和受精率。 ? （2 ） 花粉萌發(fā)和花粉管的 生長 ? 應(yīng)注重篩選適合花粉萌發(fā)和花粉管伸長的培養(yǎng)基，特別要注意鈣和硼對(duì)促進(jìn)花粉萌發(fā)和花粉管伸長的作用。 ? 胚珠的剝離時(shí)間 ? 在開花后12 天剝離的胚珠，比在開 花當(dāng)天 剝離的胚珠結(jié)實(shí)率高。 三、離體授粉的技術(shù) ? （一）子房或胚珠的準(zhǔn)備 ? ? 母本花蕾在開花前去雄套袋，開花后1~2天取下花蕾帶回實(shí)驗(yàn)室備用。 細(xì)胞型胚乳 4 ．影響胚乳培養(yǎng)的因素 ? 胚 乳 是 一 種 獨(dú) 特 的 組 織 ， 在 被 子 植 物 中 它 是 雙 受精 的 產(chǎn) 物 ， 在 倍 性 上 屬 于 三 倍 體 ， 我 們 培 養(yǎng) 胚 乳的 首 要 目 的 也 是 為 了 直 接 獲 得 三 倍 體 植 株 。 二、胚乳培養(yǎng)的方法 ? 1 、取有胚乳的果實(shí)或種子 ，表面 消毒， 無菌剝?nèi)∨呷榻臃N培養(yǎng)。 ? 誘 導(dǎo) 培養(yǎng) 階 段蔗 糖 濃度 高 。 最 有 效 的 是 谷 胺 酰 胺 ， 常 用 的 有甘 氨 酸 、 丙 氨 酸 、 谷 氨 酸 、 天 冬 氨 酸 。 Monnier(1976,1978) 介 紹 了 一 種 培 養(yǎng) 方 法 胚乳看護(hù)培養(yǎng) Ziebur 等 (1951) 報(bào)道，在進(jìn)行大麥未成熟胚離體培養(yǎng) 時(shí)，培養(yǎng)基上存在來自同一物種另一種子的離體胚乳，對(duì)胚 的生長有明顯的促進(jìn)作用。 （2 ）幼胚培養(yǎng) 幼 胚 是指 子 葉期 以 前的 幼 小胚 ， 由于幼 胚 培養(yǎng) 在 遠(yuǎn)緣 雜 交育 種 上有 極 大的 利 用價(jià) 值 ，因 此 ，其 研 究和 應(yīng) 用越 來 越深 入 和廣泛。 孤雄胚： 由小孢子或花粉粒形成的胚 在離體或活體條件下由除合子 之外的孢子體細(xì)胞形成的胚 由未受精卵形成的胚 （一）胚齡與胚性發(fā)育的關(guān)系 ? 一般胚齡越大，對(duì)培養(yǎng)條 件越寬 松，離 體培養(yǎng)的成功率就越高，相 反胚齡 越小成 功率越低。 ? 根 據(jù) 在培 養(yǎng) 中所 取 的外 植 體的 部 位不 同 ，植 物 胚胎 培 養(yǎng)包 括 胚培 養(yǎng) 、 胚 乳 培養(yǎng) 、 胚珠培養(yǎng) 、 子 房培 養(yǎng) 。 F 、 用 于 基 礎(chǔ) 研 究 研 究 胚 胎 發(fā) 育 過 程 、 胚 胎 發(fā) 生 的 條 件 以 及 影響 因 素 ， 胚 乳 生 長 發(fā) 育 及 形 態(tài) 建 成 過 程 。 玉米成熟胚的培養(yǎng) （1 ）成熟胚培養(yǎng) ? 植 物 胚胎 發(fā) 育經(jīng) 過 ： 原 胚期 球 形 胚期 心 形 胚期 魚 雷胚 期 子葉期 成熟期 ? 成 熟 胚一 般 指 子 葉 期以 后 至發(fā) 育 完全 的 胚( 胚 芽 、胚 軸 、胚 根 、子 葉) 。 ? 在 培 養(yǎng) 之 前 必 須 對(duì) 所 培 養(yǎng) 的 對(duì) 象 在 自 然 發(fā) 育 條 件下 的 特 性 充 分 了 解 ， 比 如 胚 的 休 眠 問 題 、 是 否 需要 春 化 作 用 、 胚 萌 發(fā) 的 溫 度 等 。 ? 常 用 的是 蔗 糖， 不 同發(fā) 育 時(shí)期 的 胚要 求 蔗糖 的 濃度 不 同， 胚 齡越 小 ，糖 濃 度要 求 越高 。 單核胚囊 3個(gè)反足細(xì)胞（合點(diǎn)端N ） 8核胚囊 1個(gè)中央細(xì)胞（中央2X1N ） (7細(xì)胞胚囊) 2個(gè)助細(xì)胞（珠孔端N ） 1個(gè)卵細(xì)胞（珠孔端N ） 三次有絲分裂 胚囊發(fā)育過程： 2 ． 培 養(yǎng) 基 （1 ） 基本 培 養(yǎng)基 不 同 培 養(yǎng)基 對(duì) 于子 房 培養(yǎng) 產(chǎn) 生愈 傷 組織的 誘 導(dǎo)率 有 直接 影 響， 比 較常 用 的培 養(yǎng) 基是N6 、BN 、MS ， 禾 本 科作 物 以N6 培 養(yǎng) 基較常 用 ，其 它 植物 則 多用MS和BN 。 ? 雙 受 精： 花 粉管 中 的兩 個(gè) 精子 釋 放到 胚 囊中后，2 個(gè) 精 子中 的 一個(gè) 與 卵融 合 ，形 成 受精 卵 ，將 來 發(fā)育 成 胚 。 某 些 合 瓣 花 植 物 ， 如 煙 草 、 芝 麻 、 以 及 番 茄 等 是 屬 于 此 類 。把花粉直接送人子房，實(shí)現(xiàn) 受精作 用是克 服受精前障礙的有效途徑。將胚珠表面先蘸滿有助于花粉發(fā)芽的培養(yǎng)基，然后在胚珠上撒播花粉使之受精。減少穗軸上的子房數(shù)雖不影 響受精 ，但對(duì)子粒的發(fā)育會(huì)產(chǎn)生有害的影響。 （三）離體授粉 ?1 、材料滅菌徹底但又不要使其受到毒害。 ? 直 接 進(jìn)行 器 官分 化 胚乳培養(yǎng)過程 胚乳 胚 狀 體發(fā) 育 成苗 不 定 芽苗 愈 傷 組織 形 態(tài) 發(fā)生 一、胚珠培養(yǎng) 定 義 ：是 指 將胚珠 從 母體 上 分離出 來 ，在 無 菌的人 工 環(huán)境 條 件下培 養(yǎng) ，使 其 生長發(fā) 育 形成 幼 苗的過程。 此后胚乳核繼續(xù)發(fā)育形成細(xì)胞壁，即形成許 多小的 細(xì)胞。 或 加 倍 形 成 六 倍 體 植 株 進(jìn) 行 育 種 。 材 料 基 因 型 不 同， 胚 培養(yǎng) 的 難 易程 度也 不 同。 ③ 愈 傷組 織(callu