【正文】 節(jié) (多肽激素等 )；免疫保護 (免疫球蛋白 ,補體等 )；物質(zhì)轉(zhuǎn)運和貯存 (離子通道 ,轉(zhuǎn)運載體等 )；運動與支持 (肌蛋白 )；生長、繁殖、遺傳和變異；生物膜的功能和受體等。 球蛋白：分子形狀似球形，較易溶于水一類活性蛋白，如肌紅蛋白、血紅蛋白和胰島素等。 二面角 (φ， ψ)：決定了相鄰肽平面的相對空間位置的 NCa 鍵在（－ 180176。 Edman反應(yīng)：堿性條件下氨基酸 αNH2 的 H原子被異硫氰酸苯酯（ PITC）烴基苯氨基硫甲?；〈杀桨被蚣柞０被幔?PTC氨基酸），無水 HF 中生成苯乙內(nèi)酰硫脲衍生物（ PTH氨基酸：無色）的烴基化反應(yīng)。 動態(tài)生物化學：構(gòu)成生物體的基本化學成分在生命活動過程中的變化規(guī)律（物質(zhì)代謝和能量代謝）。 包括 Thr、 Lys、 Phe、 Met、 Trp、 Leu、 Ile、 Val八種。 蛋白質(zhì)：由不同的 α氨基酸按一定的序列通過肽鍵縮合而成的，具有較穩(wěn)定的構(gòu)象并具有一定生物功能的大分子。 同源蛋白質(zhì)：在不同生物體中行使相同或相似功能且具有明顯的氨基酸序列相似性的蛋白質(zhì)。 凝膠過濾層析：一種利用帶孔凝膠珠作基質(zhì)，按照分子大小分離蛋白質(zhì)或其他分子混合物的層析技術(shù)。 ? 多肽鏈部分 斷裂，蛋白質(zhì)分解為小片段，肽段分離（至少兩套） 酶水解法：內(nèi)肽酶（肽鏈內(nèi)切酶） 胰蛋白酶法：水解 Lys或 Arg的羧基形成的肽鍵 糜蛋白酶（胰凝乳蛋白酶）法：水解 Phe、 Trp和 Tyr等疏水氨基酸的羧基形成的肽鍵 胃蛋白酶法：被斷裂鍵兩側(cè)的殘基都是疏水性氨基酸如： PhePhe 化學法 ——CNBr法：裂解由 Met羧基形成的肽鍵。 ? 特點：多肽鏈在二級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上高度折疊成緊密球形或橢球形結(jié)構(gòu)；大多數(shù)可離子化的親水的氨基酸殘基都位于分子表面（表面也含有疏水的氨基酸殘基），疏水氨基酸殘基大部分埋藏在分子內(nèi)部（特別是一些疏水性強的氨基酸，如纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸和蛋氨酸，通常水分子被排除在蛋白內(nèi)部）；三級結(jié)構(gòu)可將某些局部的二級結(jié)構(gòu)聚合在一起，形成特定的結(jié)構(gòu)區(qū)域，大多為口袋狀，核心多為疏水氨基酸，結(jié)合蛋白質(zhì)的輔基常位于其中，多為蛋白質(zhì)的活性中心；穩(wěn)定維系三級結(jié) 構(gòu)的作用力有：氫鍵、鹽鍵、疏水鍵、范德華力、二硫鍵和配位鍵。 14制備生物大分子的基本步驟是什么 ? 基本步驟 ① 確定制備生物大分子的目的和要求（科研、開發(fā)、發(fā)現(xiàn)新物質(zhì)）。吸附層析、 鹽析、凝膠過濾、離子交換層析、親和層析、等電聚焦制備電泳、制備 HPLC等。 下面的數(shù)據(jù)是從一個八肽降解和分析得到的，其組成是： Ala、 Gly Lys、Met、 Ser、 Thr、 Tyr。 不可逆抑制：與酶的必需基團共價結(jié)合 ,使酶喪失活性 ,不能用透析超濾等物理方法除去抑制劑使酶恢復活性。 多酶復合體：功能相關(guān)，不同種類的酶非共價彼此鑲嵌形成的復合體 酶的回收率：（每次總活力 ∕第一次總活力） 100 酶的提純倍數(shù)： 每次比活力 ∕第一次比活力 比活力：每毫克蛋白所含有的酶活力單位數(shù)。常見的有消旋和變旋、醛酮異構(gòu)、順反異構(gòu)和變位酶類。功能基團有氨基、羧基、咪唑基、巰基和酚基等。 求法： ① 根據(jù)實驗數(shù)據(jù)作 v與 [S]的關(guān)系曲線直接求得：先測定不同底物 濃度的反應(yīng)初速度（ v），從 v與 [S]的關(guān)系曲線求得 Vm，然后再從 1/2Vm求得相應(yīng)的 [S]即為 km（近似值）。 ② 酶的可逆共價修飾 例：肌肉中糖原磷酸解為１－磷酸葡萄糖磷酸化酶在蛋白激酶催化下使無活性的磷酸化酶 b磷酸化形成有活性磷酸化酶 a，磷酸酶催化下使有活性的磷酸化酶a去磷酸化形成無活性磷酸化酶 b。 核酸雜交： DNA單鏈與互補的異源 DNA單鏈或 RNA鏈形成雙螺旋結(jié)構(gòu)。 （ 3） tRNA的三級結(jié)構(gòu)：三葉草型二級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，突環(huán)上未配對的堿基由于整個分子的扭曲而配成對，為倒 L字母型。 ?這類輔酶有什么功能 ?其功能基團是什么 ? 不需氧脫氫酶輔酶 NAD+或 NADP+。 二 .簡答題 、多糖、脂等徹底分解的基本代謝過程。原核生物中，位于細胞膜上。是指營養(yǎng)物在生物體內(nèi)氧化分解成水和 CO2并釋放能量的過程。 ? 參與羥化反應(yīng) (脯氨酸羥化酶的輔酶。噻唑環(huán)的 C2。 ② 3′末端都具有 CpCpAOH的結(jié)構(gòu)。 融解溫度 (Tm)：熔解溫度或 DNA的熔點， DNA的變性達到 50%時，即增色效應(yīng)達到一半時的溫度。 。 ? 特定條件 下，酶原被水解一個或幾個特定肽段致使酶分子構(gòu)象發(fā)生重塑，表現(xiàn)出酶活性的過程。 ? 酶活性中心與底物通過誘導契合（ inducedfit）模式迅速可逆的、非共價的結(jié)合形成酶－底物復合物 ES，促進底物形成過渡態(tài)且穩(wěn)定底物的過渡態(tài)，酶與底物的過渡態(tài)互補，親合力最強，釋放出結(jié)合能，使 ES的過渡態(tài)能級降低，有利于底物分子跨越能壘，加速酶促反應(yīng)速度。 水解酶類（ hydrolases）：催化底物的加水分解反應(yīng)。 共價調(diào)節(jié)酶：能通過可逆共價修飾調(diào)節(jié)活性的酶。 酶的最適 pH：表現(xiàn)出酶最大活性的 pH值。 ② 精氨酸和甲硫氨酸： pH7． 0精氨酸凈電荷＋ 甲硫氨酸凈電荷接近零，甲硫氨酸先洗脫。 以溶解度的差異為依據(jù)：鹽析、萃取、分配層析、選擇性沉淀和結(jié)晶等。但若溶液 pH與蛋白質(zhì)的 pI差別較大 ,蛋白質(zhì)仍不易沉淀。；重復單位 。 還原法（含巰基 化合物使 S—S還原產(chǎn)生兩個半胱氨酸殘基（ CysSH） ,烷化劑（如碘乙酸）修飾 SH，阻止二硫鍵再生成）； 氧化法（過甲酸使 S—S氧化斷裂，生成半胱氨磺酸）。 透析：通過小分子能透過半透膜擴散到水或緩沖液的原理，將小分子與生物大分子分開的一種分離純化技術(shù)。 結(jié)構(gòu)域：球狀蛋白質(zhì) 的折疊單位，多肽鏈上某些模體或模序相互聯(lián)系，進一步形成可明顯區(qū)分空間結(jié)構(gòu)區(qū)域 ,并具有特定的生物學功能的緊密的近似球形的結(jié)構(gòu)。 多肽：多于 25個氨基酸殘基形成的肽。如功能基因組學、蛋白組學、藥物基因組學等研究。如脂類、糖類和氨基酸性質(zhì)的系統(tǒng)研究； 發(fā)現(xiàn)可溶性催化劑 (酶 ) 建立與發(fā)展階段 (20c 初 20c 中葉 )：重要分子的發(fā)現(xiàn)和物質(zhì)代謝途徑的確定。 肽鍵：一個氨基酸的 α羧基與另一氨基酸的 α氨基脫水縮合形成的鍵。）旋轉(zhuǎn)的旋轉(zhuǎn)角度 ψ角。 但聚集沉淀析出。 ？ 一級結(jié)構(gòu)測定步驟： ? 純化樣品， N端或 C端末端分析，測定由幾條肽鏈組成。；重復單位 。 變性特征 : 1）生物活性喪失（主要標志）。 攪拌與氧化：溫和 攪拌，加入少量巰基乙醇或半胱氨酸防止巰基氧化。 pH：保存液態(tài)樣品時注意其穩(wěn)定 pH范圍 時間：生化和分子生物學樣品不可能永久存活。 活性部位（ activesite）：酶分子中直接與底物結(jié)合，并和酶催化作用直接有關(guān)的部位。 Vmax和表觀 Km都減小。 ? 國際系統(tǒng)分類法： 1961 年國際酶學委員會（ EnzymeCommittee,EC）根據(jù)酶所催化的反應(yīng)類型和機理，分成 6大類： 氧化 還原酶類（ Oxidoreductases）：催化氧化 還原反應(yīng)，主要是氫的轉(zhuǎn)移或電子傳遞的反應(yīng)。 幾何異構(gòu) 專一性：選擇性催化幾何異構(gòu)體的一種構(gòu)型潛 (前 )手性專一性 ?什么是誘導契合學說 ?此學說說明了什么 ? 鎖鑰學說：酶和底物的關(guān)系就象鎖與鑰匙那樣的剛性關(guān)系，酶活性中心結(jié)構(gòu)與底物的結(jié)構(gòu)互相吻合，緊密結(jié)合成中間絡(luò)合物。 ⑤ 第二個底物水為 His57提供質(zhì)子，羥基Ｏ親核攻擊羰基Ｃ形成帶氧陰離子的四面體中間物。 ① 不可逆抑制：與酶的必需基團共價結(jié)合 ,使酶喪失活性 ,不能用透析超濾等物理方法除去抑制劑使酶恢復活性。 核小體： DNA雙鏈 146bp以左手螺旋纏繞組蛋白八聚體 (H2A、 H2B、 H H4各 2個 )核心 13∕4 圈形成。生物學意義： 20世紀最偉大的發(fā)現(xiàn)之一，第一次闡述了遺傳信息的儲存方式及 DNA復制的機理，準確地回答了 DNA是如何成為遺傳物質(zhì)的，推動了分子生物學和分子遺傳學的發(fā)展。 缺乏癥：夜盲癥、干眼病、佝僂病、軟骨病、凝血時間延長、腳氣病、口角炎 、癩皮病、壞血病、惡性貧血等。四氫葉酸的 N5和 N10位可與多種一碳單位結(jié)合作為它們的載體，為一碳單位轉(zhuǎn)移酶輔酶。 伴隨著物質(zhì)分解代謝產(chǎn)生了大量的化學能，這些能量一般都是以核苷三磷酸（例如 ATP或 GTP）和還原型輔酶（例如 NADH或 FADH2）的形式保存的。 二 .簡答題 ⒈ 呼吸鏈有哪些組分 ?它們都有什么生化作用 ?在線粒體內(nèi)膜上如何排列 ? 多組分組成：煙酰胺脫氫酶類、黃素脫氫酶類、鐵硫蛋白類、細胞色素類、輔酶 Q類（非蛋白）等。 Ⅱ 階段：構(gòu)件分子進一步代謝生成少數(shù)幾種分子，如丙酮酸、乙酰 CoA、氨。?；d體。 Sanger的雙脫氧鏈終止法測序的原理和步驟。 雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的主要特點是什么 ?此模型有何生物學意義 ?維持 DNA分子雙螺旋結(jié)構(gòu)的作用力是什么 ? 特點： ① 兩條反向平行 DNA 鏈沿同一根軸盤繞，形成右手雙螺旋，結(jié)構(gòu)上有大溝和小溝。 1）別構(gòu)抑制