【正文】 隆。 需確定最高使用的傳代數(shù)。 復(fù)習(xí)與作業(yè) 何謂動(dòng)物細(xì)胞工程制藥？有何優(yōu)點(diǎn)？ 生產(chǎn)用動(dòng)物細(xì)胞有何要求？如何獲得動(dòng)物工程細(xì)胞？ 四、基因工程細(xì)胞構(gòu)建和 篩選 在生產(chǎn)中采用更多的更有前景的是 融合細(xì)胞及采用基因工程構(gòu)建的各 種工程細(xì)胞。 （ 2）也可用于細(xì)胞遺傳學(xué)、細(xì)胞分化及衰老的研究、以及藥物的細(xì)胞毒性、環(huán)境污染的細(xì)胞學(xué)檢測(cè)。 ⒌ 動(dòng)物細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)基要求高： 必需氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)鹽、 微量元素、葡萄糖、細(xì)胞生 長(zhǎng)因子、貼壁因子等。 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的 優(yōu)點(diǎn) （ 1） 細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)后形成的細(xì)胞系和細(xì)胞株，特征均一。如淋巴細(xì)胞。 ⒈ 原代細(xì)胞 培養(yǎng) 定義：從新鮮供體取得組織細(xì)胞后在體外進(jìn)行首次培養(yǎng)，一般持續(xù) 1－ 4周。 BHK21:從 5只無(wú)性別的生長(zhǎng) 1天的地鼠幼鼠腎臟中分離的 。 ③ 能用以篩選出外源基因已整 合的選擇標(biāo)記。 ⒉ 基因載體的導(dǎo)入和高效表達(dá)工程細(xì)胞株 的篩選 基因載體導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞 常用方法是 ： 磷酸鈣沉淀法 電穿孔法 磷酸鈣沉淀法： 溶解的 DNA 加Na2HPO4和 CaCl2 形成磷酸鈣沉淀， DNA被包在磷酸鈣沉淀中， 形成 DNA— 磷酸鈣共沉淀物，當(dāng) 和細(xì)胞表面接觸時(shí)，則通過(guò)細(xì)胞 吞噬作用而將 DNA導(dǎo)入。培養(yǎng)基為 DMEM加 7%胎牛血清。 二倍體細(xì)胞的培養(yǎng)意義 二倍體細(xì)胞： （ 1）具有二倍性染色體（ 2n），染色體核型正常。如中國(guó)地鼠卵巢細(xì)胞，小鼠 L929細(xì)胞。 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的 歷史 （ 1）開始 1907，Harrison用蝌蚪的髓管放于一滴淋巴液內(nèi)，培養(yǎng)出神經(jīng)元。 ⒊正常二倍體細(xì)胞的生長(zhǎng)壽命是有限的。