【正文】 ECRLeu－ αTARAla－ 110g/L （加 Hse、 Leu，限量加 Ala， αTA是 Leu結(jié)構(gòu)類似物） Asp Asp激酶 AspP Aspβ –半醛 Hse Met Thr Lys Ile DDP 協(xié)同反饋抑制 DDP還原酶 DDP合成酶 反饋抑制 Ala Leu 反饋?zhàn)瓒? 第六節(jié) 產(chǎn)氨基酸菌種的分離、檢測(cè)原理與方法 營(yíng)養(yǎng)缺陷型補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)檢測(cè)法 影印接種 His產(chǎn)生菌 大量 UV照射 細(xì)胞死亡 鑒定生長(zhǎng)區(qū) 豐富細(xì)菌 培養(yǎng)基平板分離 產(chǎn)氨基酸培養(yǎng)基 基本培養(yǎng)基 E. coli His－ 混合上層培養(yǎng)基 鑒定菌： 可逆抑制測(cè)定法 β2噻吩丙氨酸（ 抑制劑 ） L苯丙氨酸（解除抑制劑） ＋ 培養(yǎng)基 枯草桿菌（指示菌） 生長(zhǎng) 不生長(zhǎng) 原理：指示菌在抑制劑存在條件下生長(zhǎng)，證明存在解除抑制劑；指示菌不生長(zhǎng)，證明不存在解除抑制劑。 ? 發(fā)酵法 L賴氨酸生產(chǎn)起步于 20世紀(jì) 70年代，當(dāng)時(shí)僅有上海天廚味精廠少量生產(chǎn)，以實(shí)用為主， 1981年在廣西建成年產(chǎn) 100噸食品級(jí) L賴氨酸試驗(yàn)工廠，于 1987年投產(chǎn)。氨基酸工業(yè)代謝控制發(fā)酵 課程教學(xué)的基本要求 ? 了解氨基酸發(fā)酵行業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀與中國(guó)氨基酸行業(yè)存在問(wèn)題，氨基酸發(fā)酵行業(yè)發(fā)展方向 ? 掌握谷氨酸的生物合成途徑和谷氨酸發(fā)酵調(diào)節(jié)機(jī)制，掌握谷氨酸細(xì)胞膜滲透性的控制方法 ? 了解谷氨酸生產(chǎn)菌的主要特征以及谷氨酸生產(chǎn)菌在發(fā)酵過(guò)程中的形態(tài)變化，掌握谷氨酸發(fā)酵的代謝控制育種策略 第一節(jié) 氨基酸工業(yè)現(xiàn)狀及發(fā)展方向 ?近 40多年來(lái)，國(guó)內(nèi)外在研究、開(kāi)發(fā)和應(yīng)用氨基酸方面均取得重大進(jìn)展，新發(fā)現(xiàn)的氨基酸種類和數(shù)量已由 20世紀(jì) 60年代 50種左右，發(fā)展到 20世紀(jì) 80年代的 400種，目前已達(dá) 1000多種。隨著酶制劑的應(yīng)用和生產(chǎn)工藝及裝備的改進(jìn)，技術(shù)水平不斷提高，進(jìn)一步推動(dòng)了味精生產(chǎn)的快速發(fā)展。 第五節(jié) Lys代謝控制發(fā)酵 1. 生產(chǎn)菌種 谷氨酸棒桿菌（ ） 黃色短桿菌 (B. flavum) 乳糖發(fā)酵短桿菌 () 谷氨酸棒桿菌、黃色短桿菌 Lys合成途徑及正常調(diào)控機(jī)制 Asp 天冬氨酸 Asp 激酶 天冬氨酸 P 天冬氨酸 β –半醛 高絲氨酸 二氫吡啶 2,6二羧酸 O琥珀酰 高絲氨酸 蛋氨酸(Met) 高絲氨酸 P 蘇氨酸（ Thr） 異亮氨酸（ Ile） Thr脫氫酶 賴氨酸 (Lys) Hse脫氫酶 DDP合成酶 合成酶 (1) Asp三分支途徑優(yōu)先合成 Met，后合成 Thr、Ile，最后合成 Lys (2) Thr和 Lys對(duì) Asp激酶有協(xié)同反饋抑制 (3) Thr對(duì) Hse脫氫酶有反饋抑制 (4) Ile對(duì) Thr脫氫酶有反饋抑制 (5) Met對(duì) O琥珀酰高絲氨酸合成酶有反饋?zhàn)瓒? 3. Lys 代謝控制發(fā)酵 菌種的遺傳改造 (1)切斷支路代謝 ——Hse營(yíng)養(yǎng)缺陷型 (Hse)菌株篩選 選育 Hse脫氫酶缺失的 Hse菌株，使代謝流向Lys合成，控制 Hse添加量，既滿足菌體對(duì) Met、Thr和 Ile生長(zhǎng)需要又不形 Thr和 Lys對(duì) Asp激酶的協(xié)同反饋抑制，積累 Lys (2)用 Hse菌株選育解除 Lys反饋抑制突變株 Hse 誘變