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第十五章混合斑的檢驗(yàn)(留存版)

2024-11-27 12:53上一頁面

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【正文】 指示紅細(xì)胞: 5% 精漿 ABO血型檢驗(yàn) α 2精漿糖蛋白分子中的 ABH抗原 糖鏈 ABH特異性抗原,用 A、 B、 O紅細(xì)胞和 AB型人血清吸收 蛋白 有器官特異性抗原 解離試驗(yàn) Y +混合斑的浸出液 ELISA夾心法 血清型、酶型 對(duì)比推斷: 血清型 Gm、 Km 酶 型 PGM Fu DNA分析 常染色體: 關(guān)鍵 獲得純凈的精子 DNA差異裂解或二步抽提法 原理: 精子細(xì)胞的表面蛋白含有大量的二硫鍵 , 可以抵抗去垢劑 SDS核蛋白酶 K的消化 , 而其他組織的細(xì)胞膜則可以被這兩種物質(zhì)消化 。 方法: 第一步: 檢材 +1%SDS+100ug/ml蛋白酶 K37度 2~3h 500r/min離心 15min、 去上清 , 精子留在沉淀物中 第二步: +40Mm/L DTT+1%SDS+100ug/ml蛋白酶 K 注意: 消化條件選擇 主要是第一步消化時(shí)間 消化不完全 當(dāng)陰道上皮細(xì)胞過多 , 不能使兩者徹底分離 過渡消化 可能消化一部分精子細(xì)胞
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