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正文內(nèi)容

動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的制備課件(1)(留存版)

  

【正文】 選? 具有篩選作用的培養(yǎng)基(選擇培養(yǎng)基) ?種 BB 、 B瘤 、 瘤瘤 、 雜交細(xì)胞 如何獲得大量的單克隆抗體? ②免疫 B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的制備 ③細(xì)胞融合 ④雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng) ⑤雜交瘤細(xì)胞的篩選 ⑥分泌單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞系的建立 ⑦單克隆抗體的大量制備 過(guò)程: 抗原 小鼠 效應(yīng) B細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 細(xì)胞融合 篩選 細(xì)胞培養(yǎng) 篩選 能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群 體外培養(yǎng) 體內(nèi)培養(yǎng) 提取出單克隆抗體 ,選用哪兩種細(xì)胞進(jìn)行融合?為什么選擇這兩種細(xì)胞? 漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞 漿細(xì)胞能產(chǎn)生 單一抗體 ,但不能無(wú)限增殖;骨髓瘤細(xì)胞 能無(wú)限增殖 ,但不能產(chǎn)生單一抗體。 ⑵ .誘導(dǎo)方式: 物理法: 電激、振動(dòng)、離心 化學(xué)法: 聚乙二醇( PEG) 生物法: 滅活的病毒 例如:仙臺(tái)病毒 仙臺(tái)病毒 紫外線 喪失感染性 (不感染細(xì)胞) 保留融合活性 (誘導(dǎo)細(xì)胞融合) 細(xì)胞 A 細(xì)胞 B 雜交細(xì)胞 滅活的病毒 物理法 化學(xué)法 滅活的病毒顆粒黏附于細(xì)胞表面 細(xì)胞膜被病毒顆粒穿通 細(xì)胞膜連接 細(xì)胞融合,形成雜交細(xì)胞 (細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性) (三 )動(dòng)物細(xì)胞融合的應(yīng)用 ,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。 在這過(guò)程中進(jìn)行了幾次篩選?分別在哪個(gè)步驟進(jìn)行篩選? 兩次篩選。 一、動(dòng)物細(xì)胞融合 ⑴ .原理: 動(dòng)物細(xì)胞
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