【摘要】大腸桿菌基因組DNA的提取方式一、傳統(tǒng)法提取大腸桿菌基因組DNA。1、實(shí)驗(yàn)原理提取DNA的一般過程是將分散好的組織細(xì)胞在含十二烷基硫酸鈉(SDS)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白質(zhì),再用酚和氯仿/異戊醇抽提分離蛋白質(zhì),得到的DNA溶液經(jīng)乙醇沉淀使DNA從溶液中析出。SDS的作用機(jī)理是由于其能結(jié)合蛋白,中和蛋白的電性,使蛋白質(zhì)的非共價(jià)鍵受到破壞,失去二級(jí)結(jié)構(gòu),從而變形失活,蛋白酶K或
2025-06-18 12:57
【摘要】人重組白細(xì)胞介素-8在大腸桿菌的表達(dá)、鑒定 【摘要】目的利用PCR技術(shù)擴(kuò)增hIL-8cDNA,將其連接于原核表達(dá)載體pKpL-3a(含PL啟動(dòng)子)中,并在大腸桿菌中表達(dá)、鑒定。方法PCR技術(shù)擴(kuò)增hI...
2024-10-03 10:29
【摘要】前言?基因表達(dá)是指結(jié)構(gòu)基因在生物體中的轉(zhuǎn)錄、翻譯以及所有加工過程。?基因工程主要目標(biāo)之一是生產(chǎn)常規(guī)方法難以生產(chǎn)的大量蛋白質(zhì)產(chǎn)物—即實(shí)現(xiàn)基因的高效表達(dá)。?基因高效表達(dá)研究是指外源基因在某種細(xì)胞中的表達(dá)活動(dòng),即剪切下外源基因片段,拼接到另一個(gè)基因表達(dá)體系中,使其能獲得原生物活性又可高產(chǎn)的表達(dá)產(chǎn)物。第三章真核基因在大腸桿菌中的表達(dá)最
2025-05-26 06:00
【摘要】大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)遺傳背景清楚,目的基因表達(dá)水平高,培養(yǎng)周期短,抗污染能力強(qiáng)等特點(diǎn),是分子生物學(xué)研究和生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)化發(fā)展進(jìn)程中的重要工具。因此熟練掌握并運(yùn)用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的基本原理和常規(guī)操作是對(duì)每一個(gè)研究生來(lái)說是非常必要的。本章節(jié)介紹了實(shí)驗(yàn)室常用的大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的構(gòu)成特點(diǎn),歸納了利用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)純化重組蛋白的基本流程和詳細(xì)操作步驟,并且結(jié)合筆者的操作經(jīng)驗(yàn),總結(jié)了初學(xué)者在操作過程中可能
2025-08-05 03:36
【摘要】第三章第二部分大腸桿菌的克隆載體CloningVectorsforE.coli所有克隆質(zhì)粒中,最多的一類是以大腸桿菌為宿主的。因?yàn)椋哼^去50年內(nèi),這種細(xì)菌在基礎(chǔ)研究中一直扮演著中心角色;已積累大量有關(guān)大腸桿菌的微生物學(xué)、生物化學(xué)和遺傳學(xué)知識(shí);事實(shí)上所有關(guān)于基因結(jié)構(gòu)和功能的基礎(chǔ)研究都是以
2025-01-06 02:22
【摘要】微生物發(fā)酵工程實(shí)驗(yàn)中南民族大學(xué)工商學(xué)院環(huán)境與生物工程實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心1實(shí)驗(yàn)六、機(jī)械攪拌罐培養(yǎng)大腸桿菌一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?、?shí)驗(yàn)原理三、實(shí)驗(yàn)材料四、實(shí)驗(yàn)步驟五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果六、注意事項(xiàng)七、思考題21、學(xué)會(huì)發(fā)酵參數(shù)的設(shè)置。
2025-02-09 16:14