transwell是檢測細胞侵襲能力的檢測方法(專業(yè)版)
【正文】 在作不同濃度TNFα刺激下的HCCC29810 膽囊癌細胞體外侵襲能力的強弱實驗時我們將其置于盛有自來水的燒杯中,反復(fù)漂洗幾次,將多余蘇木素洗去再行脫水、透明。蘇木素染色1 min。 加入無血清培養(yǎng)基,37℃,5 %CO2 培養(yǎng)24 h~48h,收集細胞培養(yǎng)上清。l of the TrypsinEDTA solution (now containing the migratory cells from each well into a black flat bottom 96 well plate15. Read fluorescence in a fluorescence plate reader at an excitation wavelength of 485 nm and an emission wavelength of 520 nm從第9步開始計數(shù)侵襲細胞時,這份說明書用的是熒光標(biāo)記,但這種方法成本高而且繁瑣。2。結(jié)晶紫也可以用33%醋酸溶解,再用酶標(biāo)儀570nm檢測,同樣可以反應(yīng)穿過細胞數(shù)因為基質(zhì)膠的厚度直接影響穿過膜的細胞數(shù),因此建議有條件的話還是買這類已經(jīng)鋪好膠的試劑盒,比較可靠。l cell suspension to each cell culture insert8. Incubate the cell culture plate for 324 h in a cell culture incubator at 37176。結(jié)果:改進后侵襲試驗定位準(zhǔn)確,結(jié)果清晰。1. 4Matrigel 侵襲實驗(Matrigel Invasion Assay刺激后的各組細胞用PBS 漂洗3 次。因此認(rèn)為可以用胎牛血清來代替NIH3T3 細胞制備的趨化因子。內(nèi)容總結(jié)
（1）Transwell是檢測細胞侵襲能力的檢測方法
我們所使用的是Chemicon公司的ECM554,基質(zhì)膠已經(jīng)包被好了,買來就可以用,很方便,而且我們算過,跟自己買膠來包被價格相差不大
（2）(即染成紫紅色的點,未著色的多為細胞碎屑計數(shù)并拍照留念
Transwell細胞體外侵襲實驗
概述
目的:總結(jié)并改進細胞體外侵襲實驗的操作經(jīng)驗
。眾所周知,胎牛血清中有趨化因子,我們在不同濃度TNFα刺激下的HCCC29810 膽囊癌細胞體外侵襲能力的強弱實驗中發(fā)現(xiàn)用胎牛血清和用NIH3T3 細胞制備的趨
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