【正文】 177。 AD產(chǎn)生的原因 : ① 乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶活性降低或膽堿攝取能力低下 ,引起神經(jīng)元或神經(jīng)膠質(zhì)營養(yǎng)缺乏、功能受損等 ,導(dǎo)致神經(jīng)元系統(tǒng)功能衰退 。核苷類(NRTI)與酶競爭而抑制酶活 。 突變 是抗藥性產(chǎn)生的遺傳基礎(chǔ)。 2). 糖酵解酶 : 前列腺能量代謝很獨特 ,其上皮中積聚大量檸檬酸和鋅 ,高濃度鋅抑制 /阻斷三羧酸循環(huán)。 ? 核糖核苷酸還原酶 : 四種 NDP還原成 dNDP,DNA合成與修復(fù) ,雙縮尿 . ? 腺苷脫氨酶 : 維持腺苷水平 ,抗白血病 ,提高腺苷類藥物作用 . 2) 激素代謝酶類 . 芳香氨酶 (Aromatase): 細(xì)胞色素 P450與黃素蛋白組成的膜結(jié)合復(fù)合酶 ,為雄激素合成所必須的 ,也催化雄激素向雌激素轉(zhuǎn)化 ,是雌激素合成限速酶。 4) 有些 中藥單體 通過多靶點起 作用 。多靶點藥物可同時作用于疾病網(wǎng)絡(luò)中多個靶點 ,對各靶點產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng) ,使 總效應(yīng)大于各單效應(yīng)之和 ,達(dá)到最佳治療效果 . 多靶點藥物的分類及作用方式 按藥物組分不同分三種形式 : 1）多種藥聯(lián)合用藥 (Multidrug bination): 最為常見 ,為抗艾滋病和腫瘤主要策略。 ? 小分子藥物作用于 248種蛋白 ,其中 207個靶標(biāo)由人體基因組編碼 。 ? 人類基因組研究 結(jié)果預(yù)測 : 有 600種小分子靶點 ,1800多蛋白質(zhì)靶點 ,及2100種基因治療和 siRNA治療靶點。 酵母雙雜交 是發(fā)現(xiàn)藥靶的重要途徑。 80%以上購藥者會向藥店銷售員咨詢 ,大多數(shù)最后采納其意見選藥。 ? 3．主流研發(fā)機(jī)構(gòu)與藥企合作不成熟。 ? 我國每年都有上百新藥被注冊 ,而美國、英國一年難出幾例新藥 中國工程院醫(yī)藥衛(wèi)生學(xué)部院士秦伯益 原創(chuàng)藥 研發(fā) 中存在三大誤區(qū) 誤區(qū)一，對基因組藥物學(xué)期盼過早。 很多研究人員都沒有“蹲下去找 靶點 調(diào)研。 ? 2）藥品虛假廣告鋪天蓋地。 4. 藥靶的意義 : 藥物發(fā)現(xiàn)從依賴動物篩選逐漸轉(zhuǎn)變到“一病一靶”。 四 . 基于靶標(biāo)的藥物設(shè)計 利用 配體 靶標(biāo)復(fù)合物三維結(jié)構(gòu)信息設(shè)計新藥 ,基本過程 : ① 確定藥物作用靶標(biāo) (如蛋白質(zhì)、核酸等 ) 。 ? Hopkins 和 Groom (2022) 根據(jù)藥物起效的 5條原則 ,目前藥物僅通過 120個靶標(biāo)起主要作用。 天然產(chǎn)物 主要靶向 N末端重復(fù)序列 , 而 生物制品 (抗體或重組制劑 )主要靶向其他膜受體。 1) 連接配體 : 用接頭將獨立的藥效基團(tuán)連接起來 . 但產(chǎn)生的多靶點分子往往較大 ,很難口服給藥和吸收。 2) 小分子化合物 . 靶點為代謝關(guān)鍵酶或酪氨酸激酶。 2) 腎上腺素受體 : 前列腺增生引起膀胱出口梗阻 ,導(dǎo)致膀胱甚至腎功能損害。其受體拮抗劑改善尿道梗阻 2. 艾滋病 HIV 1). 免疫預(yù)防和治療 : 醫(yī)學(xué)史上 ,天花等傳染病的消滅依靠疫苗 , 而不是抗病毒藥物。 2) 感染的靶細(xì)胞為 CD4+ HTL, 3) 潛伏細(xì)胞頻率太低 ,缺乏分離技術(shù)。針對這些分子的單克隆抗體及小分子物可能成為新藥。 含 6 味中藥的新復(fù)方參烏膠囊及其有效成分 二苯乙烯苷 : 在多種擬 AD 動物模型上對AD發(fā)病的多個靶點和環(huán)節(jié)起作用 ,有神經(jīng)營養(yǎng)和神經(jīng)保護(hù)作用 . 植物雌激素替代治療 : 雌激素 有抗 AD 作用 , 絕經(jīng)期開始進(jìn)行雌激素替代治療可減少AD 風(fēng)險。 圖 濃縮前后溶液中蟲草素的 HPLC檢測 蟲草素標(biāo)準(zhǔn)品 蟲草提取液 濃縮 3倍 濃縮前 截留分子量 500 截留分子量 100 圖 濃縮前后溶液中酪氨酸的 HPLC檢測 酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液 酪氨酸提取液 濃縮 3倍 濃縮前 截留 500 截留 100 靶點藥物與藥物添加劑 腺苷脫氨酶抑制劑的篩選與提取分離鑒定 0%20%40%60%80%100% 1 2 3 6 9 12 24Reaction time (h)圖 9. 腺苷脫氨酶對 蟲草素 的降解 . ● 蟲草素 , ■ 蟲草素降解產(chǎn)物 (3’脫氧次黃苷 ) 0500010000150002022025000300000 1 2 3 6 9 12 24Reaction time (h)圖 10. 腺苷脫氨酶對 腺苷 的降解 . ● 腺苷 , ▲ 腺苷降解產(chǎn)物 (次黃苷 )I, ■ 腺苷降解產(chǎn)物 (次黃苷 )II. 020406080100120140 25 50 125Content of added cordycepin(ug/ml)Content of remaindercordycepin(ug/ml)圖 11. 蟲草素 +腺苷脫氨酶 抑制劑 處理癌細(xì)胞 48小時后蟲草素含量 . 黑柱為蟲草素純品 (98%), 白柱和 斜線柱為蟲草素 +提取物處理 . 圖 12. HPLC測定癌細(xì)胞中蟲草素降解 . A為蟲草素純品 , B為蟲草素 +提取物 (蟲草素濃度均為 25181。對 AD 有預(yù)防作用 ,長期食姜黃食物的印度農(nóng)民 ,65 歲以上 AD 患率僅 1%。 ? 與病毒蛋白結(jié)合 ,阻止融合 . 臨床上與抗逆轉(zhuǎn)錄藥物聯(lián)合用于對其他藥物無效患者。 HAART可使血漿病毒降到 50個 /ml拷貝以下 ,并維持達(dá) 67年 ,而潛伏庫絲毫沒有清除跡象。其抑制劑可治療 BPH。作用最強(qiáng)的雄激素二氫睪酮由該酶催化而成。 1. 腫瘤分子靶向藥物 1997 年美國 FDA 批準(zhǔn)首個單抗藥物利妥昔單抗用于 20種分子靶向藥物上市 ,在研藥物 100 余種。 模式生物 : 整體的生物體內(nèi)篩選 . 2) 綜合性作用的聯(lián)合篩選 : 聯(lián)合用藥時 ,一種組份誘導(dǎo)對另一種組份的敏感性 . 3) 配伍 (比例 )分析 : 比較聯(lián)合用藥和組分單獨用藥時活性差別 , 優(yōu)化各組分用量。中樞神經(jīng)系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)疾病通常靶向 G蛋白偶聯(lián)受體、離子通道或載體等。 ? 有開發(fā)潛力的靶 : 同源序列少 (不超過 5個 ),參與的調(diào)節(jié)路徑少 (不超過 2個 ),分布的主要組織少 (不超過 2個 ),靶標(biāo)的開發(fā)潛力 /前景較好。 3) 藥物作用前后基因和蛋白質(zhì)表達(dá)的改變 ,找出可能的藥靶。 3. 藥靶的化學(xué)成分 : 絕大多數(shù) (98%以上 )為 蛋白質(zhì) 。 我國藥品 市場 現(xiàn)狀及存在的問題 ? 我國醫(yī)藥業(yè)年均增長 17%,在 36個行業(yè)中排第 1820位 ,總值占 GDP的 %. ? 1）制售假劣藥行為屢禁不止。 傳統(tǒng)新藥研發(fā)途徑包括 : 經(jīng)驗積累、偶然機(jī)遇、藥物普篩、綜合篩選、天然物提取、定向合成、代謝與藥理研究、毒副作用、老藥新用等。 死守傳統(tǒng)和古老的概念 “中醫(yī)藥發(fā)展靠不斷研究，而不是過頭的輿論宣傳”。 ? 4. 宏觀政策影響大 ,缺乏總體規(guī)劃 ,高稅收和逐年降價使企業(yè)瀕臨停產(chǎn)。銷售員為“廠家提成”而向顧客推薦高價藥。 3. 藥物分子為探針發(fā)現(xiàn)藥物靶標(biāo) 1) “藥釣靶”與“靶釣藥” : 生物分子相互作用分析 。新靶標(biāo)藥物研發(fā)的失敗率不斷增加。 ? Overington JP, AlLazikan IB, Hopkinsal. How many drug targets are there? Nat Rev Drug Discov, 2022, 5(12) : 993996. 2. 上市藥物靶點的類別 ? 生物化學(xué)分類 : 上市小分子和生化藥靶點 , 50%以上屬 4 個關(guān)鍵生化類別 : G蛋白偶聯(lián)受體 (%),核受體 (13%),配體門控性離子通道 (%)及電壓門控離子通道 (%) 。 3） 單組分藥同時選擇性作用于多個靶點 : 即嚴(yán)格意義上的多靶點藥物 (multitarget drug).優(yōu)化一個多靶點藥使之同時產(chǎn)生多靶點選擇性而不是非選擇性難度很大 . 按靶間關(guān)系的作用方式分三類 : ① 影響不同靶而產(chǎn)生組合作用 : 各靶存在于特定組織、細(xì)胞或細(xì)胞間液中的相同或不同部位 ,代謝或信號通路 。它可影響多條信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路而抑制腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移和血管新生 ,臨床藥效評價進(jìn)行中 . ? 問題 : 1) 與合成藥比 ,中藥作用機(jī)制更復(fù)雜 ,尋找中藥靶點進(jìn)展困難。 (2) 抑制芳香氨酶活性而切斷雌激素合成。糖酵解酶抑制劑可治療 BPH。不恰當(dāng)治療 ,特別是部分抑制病毒 ,給病毒抗藥性形成提供選擇壓力 ,加速抗藥性的形成。以它為靶點的藥物最多 ,高效新藥不斷出現(xiàn)。 1) 癥狀控制藥 . 常用藥為 乙酰膽堿酯酶抑制劑 及其 受體調(diào)節(jié)劑 . 雖不能扭轉(zhuǎn)但能控制癥狀 .是重要藥物。 177。 177。無阻止 ,延緩或防止發(fā)生和發(fā)展的藥。 (1) 三個病毒催化酶 . 逆轉(zhuǎn)錄酶 ,整合酶和蛋白酶 ,為較理想的靶點。 3). 抗藥性 . HIV非常容易產(chǎn)生抗藥性。也能治療 前列腺增生伴下尿路癥狀 。其抑制劑阻止復(fù)制和鏈重新組裝 ,引起 DNA 雙鏈斷裂 ,腫瘤細(xì)胞死亡。 2) 中醫(yī)強(qiáng)調(diào)整體性和協(xié)調(diào)性 ,中藥活性組分作用于 多靶點 共同發(fā)揮療效 , 屬多靶點藥物治療。 3) 疾病的適應(yīng) /耐藥性 ,如病毒的突變等 . 理論基礎(chǔ) : ? 按照拓?fù)渚W(wǎng)絡(luò)模型理論 : 一個系統(tǒng)中對 3～ 5 個因素 (相當(dāng)于藥靶 ) 的部分抑制可以達(dá)到對單一最重要因素的完全抑制。 ? Overington 等 (2022)提出有價值的評估 : 藥物數(shù)量減至 1357種。若滿意可進(jìn)入前臨床實驗 . 重復(fù)以上過程 ,直至滿意為止 . 需要的條件 : X射線衍射和核磁共振 (NMR)等結(jié)構(gòu)研究手段 ,研究靶蛋白分子結(jié)構(gòu) ,計算機(jī)輔助的靶蛋白結(jié)構(gòu)模型建立和藥物設(shè)計。 2) 蛋白質(zhì)相互作用 : 蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用。研發(fā)好藥不如搞定幾家醫(yī)院 ! ? 4）無證經(jīng)營和超范圍經(jīng)營 , 買賣、出租、出借許可證等屢禁不止。 沒有幾個企業(yè)真正投入技術(shù)力量研發(fā)新藥 ,無研發(fā)部門或研發(fā)部門轉(zhuǎn)行?！? ? 49年以來 ,我國自主研發(fā)、有國際影響的“新藥”僅兩個 ,50年代合成的二巰基丁二酸鈉和 60年代開發(fā)的青蒿素。全國藥物研發(fā)總投入少于美國的輝瑞公司。 ? 3）藥品購銷不規(guī)范 ,