【正文】 質(zhì)粒? ２． 乳酸克魯維酵母中的線性質(zhì)粒? ３．大腸桿菌－酵母穿梭質(zhì)粒? ４．酵母表達型質(zhì)粒? ５．酵母分泌型表達質(zhì)粒? ６．酵母人工染色體－ YAC 1． pSCl01質(zhì)粒載體 2． CoEEl質(zhì)粒載體 pSCl01質(zhì)粒作載體克隆非洲爪贍的基因 3． pBR322質(zhì)粒載體? (1)pBR322質(zhì)粒載體的構(gòu)建? (2)pBR322質(zhì)粒載體的優(yōu)點 ? 具有較小的分子量? 具有兩種抗菌素抗性基因可供作轉(zhuǎn) ? 化子的選擇記號。 F質(zhì)粒有三種存在方式：? (i)以染色體外環(huán)形雙鏈質(zhì)粒 DNA形式存在，不帶有染色體的基因或 DNA區(qū)段。編碼 有控制大腸桿菌素合成的基因質(zhì)粒分類? 2）根據(jù)質(zhì)粒的傳遞性? 3）根據(jù)質(zhì)粒的拷貝數(shù)? 4）根據(jù)質(zhì)粒和細(xì)菌的關(guān)系? 、大小和數(shù)目二、質(zhì)粒的基本特性? ? 2．質(zhì)粒 DNA構(gòu)型 ? 3． 質(zhì)粒 DNA編碼的表型 ? 4．質(zhì)粒 DNA的轉(zhuǎn)移 ? 5． 質(zhì)粒 DNA的遷移作用 ? 6．質(zhì)粒 DNA的復(fù)制類型 ? 7．質(zhì)粒的不親和性? 8. 其他特性 質(zhì)粒的基本生物學(xué)特性? ? 2．質(zhì) 粒 DNA? (圖 4—1 )大腸桿菌質(zhì)粒分子的結(jié)構(gòu)示意圖質(zhì)粒 DNA分子具有 三種構(gòu)型? SC構(gòu)型 : 共價閉合環(huán)形 DNA(cccDNA)， ? 超螺旋的 SC構(gòu)型 ；? OC構(gòu)型 : 開環(huán) DNA(ocDNA)， OC構(gòu)型 ；? L構(gòu)型 : 發(fā)生雙鏈斷裂而形成線性分子? (LDNA)， L構(gòu)型 。F因子帶動 Co1E1質(zhì)粒轉(zhuǎn)移的條件? 兩種不同的復(fù)制型：? “嚴(yán)緊型 ” (stringentplasmid)； ? “松馳型 ” (relaxedplasmid)。質(zhì)粒具有什么特性可使它配對形成大小兩個啞鈴結(jié)構(gòu)？ ？ ？ ？ ？。? ② 質(zhì)粒 DNA的轉(zhuǎn)移 F質(zhì)粒 DNA的轉(zhuǎn)移是從轉(zhuǎn)移起點 oriT開始的。 ② R質(zhì)粒： 通稱抗藥性因子。? (ii)以染色體外環(huán)形雙鏈質(zhì)粒 DNA形式存在，同時還攜帶著細(xì)菌的染色體基因或 DNA區(qū)段。? (2)能在體外轉(zhuǎn)錄克隆基因的質(zhì)粒載體pSP64質(zhì)粒載體的形體 圖pSP64與 PSP65質(zhì)粒載體的多克隆位點區(qū)的核苷酸序列結(jié)構(gòu)(3)穿梭質(zhì)粒載體? 穿梭質(zhì)粒載體 (shuttleplasmidvector)， 是指一類由人工構(gòu)建的具有兩種不同復(fù)制起點和選擇記號，在兩種不同的寄主細(xì)胞中存活和復(fù)制的質(zhì)粒載體。3．質(zhì)粒載體的選擇記號? 在基因克隆中采用的質(zhì)粒載體的選擇記號，有新陳代謝特性、對大腸桿菌素 E1 的免疫性，抗菌素抗性等。 ? 非接合型的質(zhì)粒 (non—conjugative plasmid)， 不能自我轉(zhuǎn)移是因為沒有了控制細(xì)胞配對和接合轉(zhuǎn)移的基因。? 在雌雄細(xì)胞配對期間，雄性細(xì)胞中的 F因子按滾環(huán)復(fù)制模式 (rolling circle replication model)，(1) 接合型質(zhì)粒的自我傳遞?