【正文】 綜上所述，新一代乙腦疫苗的研制情況歸納如表2。Vero細(xì)胞DNA（）, Vero細(xì)胞庫、嵌合病毒種子庫、疫苗經(jīng)檢測(cè)無外源因子[1819]。在小鼠、狗、兔中一劑量的異常毒性觀察，未顯示有毒性；致畸性試驗(yàn)，結(jié)果陰性。細(xì)胞庫：Vero細(xì)胞122代購自ATCC，126代建立主細(xì)胞庫，129代建立工作細(xì)胞庫。乙腦SA14142株Vero細(xì)胞純化減毒活疫苗武漢生物制品研究所呂文利等，用乙腦SA14142株，接種于Vero細(xì)胞，6天收液，超濾濃縮、硫酸魚精蛋白處理、Sepharose4FF凝膠過濾介質(zhì)純化疫苗，制成純化Vero細(xì)胞乙型腦炎減毒活疫苗。它侵犯人中樞神經(jīng)系統(tǒng)，所致流行性乙型腦炎(簡(jiǎn)稱乙腦)是一種急性傳染病，以蚊為傳播媒介,主要在夏秋季流行。全球每年有約50，000例報(bào)告，主要分布于亞洲。免疫原性小鼠ED50為105PFU，蛋白含量20ug/ml,純毒試驗(yàn)、外源因子、腦內(nèi)致病力、乳鼠傳代返祖試驗(yàn)全部合格[11]。然后對(duì)細(xì)胞庫進(jìn)行生物安全檢查合格。兩組志愿者各30名血清乙腦抗體陰性（對(duì)乙腦北京1株中和抗體滴度101），分別接種Vero細(xì)胞和鼠腦乙腦北京1株滅活純化疫苗。黃熱乙腦嵌合病毒減毒活疫苗對(duì)小鼠腦內(nèi)無致病力，、猴皮下接種。表2 新一代乙腦疫苗的比較序號(hào)毒株名稱制備的細(xì)胞基質(zhì)用于疫苗的毒株代次滴度（LogPFU/ml）收毒時(shí)間（天）純化的方法目前的進(jìn)展1P3Vero10代以內(nèi)不祥魚精蛋白處理，離心試生產(chǎn) 證書2SA14142Vero不祥6魚精蛋白處理，凝膠過濾動(dòng)物試驗(yàn)3SA14142PDK8※Vero67～89魚精蛋白處理，離心完成動(dòng)物實(shí)驗(yàn)4北京1Vero105離心，層析Ⅰ期5黃熱乙腦嵌合病毒Vero55核酸酶處理，透析過濾Ⅰ、Ⅱ期※ ：SA14142PDK8，乙腦SA14142株在原代狗腎細(xì)胞（PDK）傳8代的病毒。2）抗體應(yīng)答對(duì)嵌合體病毒株很好，但對(duì)其它乙腦野毒株有的較好，有的很低，抗體譜不廣。收獲Vero細(xì)胞培養(yǎng)嵌合病毒的上清液作為疫苗原液，用核酸酶處理以消化Vero細(xì)胞的核苷酸，使用500kDa膜，正切流微過濾和透析過濾純化疫苗原液，加入乳糖和人血白蛋白做保護(hù)劑，制成黃熱乙腦嵌合病毒Vero細(xì)胞減毒活疫苗。對(duì)Vero細(xì)胞和鼠腦乙腦北京1株滅活純化疫苗的安全和效果，進(jìn)行了動(dòng)物和I期臨床觀察。乙腦北京1株Vero細(xì)胞滅活純化疫苗日本Chemosero Therapeutic Research研究所的Keishin Sugawara等，以乙腦北京1株，Vero細(xì)胞為基質(zhì)開發(fā)出滅活純化疫苗。免疫2針后1個(gè)月中和抗體陽轉(zhuǎn)率和幾何平均滴度（GMT）%和1∶[10]。E蛋白是乙腦病毒的重要抗原，含有與病毒毒力密切相關(guān)的決定性氨基酸，能誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體[2]。20世紀(jì)90年代以來，乙腦流行區(qū)域有所擴(kuò)大，一些原來為非乙腦流行的國(guó)家或地區(qū)也發(fā)生乙腦流行。乙腦SA14142株Vero細(xì)胞純化滅活疫苗(JEPIV)美國(guó)Walter Reed軍事研究所Ashok ，采用乙腦SA14142株在原代狗腎細(xì)胞（PDK）傳8代后的病毒，JESA14142 PDK8,在Vero細(xì)胞上，經(jīng)傳兩代后，病毒滴度就增加了1000倍，,更多代次未見病毒滴度增加。病毒庫：使用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)北京1株，種毒5天后收毒。兩組局部藥物反應(yīng)，頭痛和不舒服輕微，%，%。所有猴都出現(xiàn)低病毒血癥（平均滴度高峰，～，平均持續(xù)時(shí)間，～），6～10天開始出現(xiàn)中和抗體，到第30天各劑量組的中和抗體反應(yīng)相似，對(duì)同源毒株中和抗體滴度較異源毒株高。雖然目前已有乙腦SA14142株原代地鼠腎細(xì)胞減毒活疫苗和北京1株鼠腦滅活純化疫苗在廣泛應(yīng)用，但幾種新的疫苗都在開發(fā)中。黃熱乙腦嵌合病毒減毒活疫苗仍存在兩個(gè)問題：1）接種后的一段潛伏期，有個(gè)別38℃以上高熱病例，觀察人員認(rèn)為可