【正文】 主要內(nèi)容： 培養(yǎng)特征－形態(tài)特征－生化反應(yīng)－血清學(xué)鑒定（玻片凝集）－藥物敏感試驗(yàn)－動(dòng)物試驗(yàn)4. 病原菌抗原的檢測(cè)（detection of bacterial antigens）:免疫學(xué)的快速診斷方法：用已知抗體檢測(cè)未知抗原。殺菌機(jī)制：作用于DNA, 形成胸腺嘧啶雙聚體,干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄。無菌操作： 防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。3． 免疫作用：正常菌群作為抗原既能促進(jìn)機(jī)體免疫器官的發(fā)育，也可刺激其免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應(yīng)答，產(chǎn)生免疫效應(yīng)物質(zhì)，如雙歧桿菌能誘導(dǎo)產(chǎn)生SIgA4． 抗衰老作用：與其產(chǎn)生過氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)有關(guān)5． 抗腫瘤作用：其作用機(jī)制尚未完全闡明，雙歧桿菌和乳酸桿菌均有抑制腫瘤作用。 二、基因突變 ★突變：病毒基因組堿基序列發(fā)生改變。 回復(fù)突變： 野生型：細(xì)菌在自然環(huán)境下具有的表現(xiàn)型 。 有嚴(yán)格的宿主特異性，只能在活的微生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制。變異：子代與親代性狀的差異性。此類抗體能與細(xì)胞外游離的病毒結(jié)合從而消除病毒的感染能力。（2）抑制性： IFN的抗病毒作用是抑制，而不是殺滅。 專性胞內(nèi)菌（obligate intracelllular bacteria）只能在細(xì)胞內(nèi)生存, 如立克次體和衣原體。革蘭陰性菌對(duì)溶酶菌不敏感，但在特異性抗體參與下，溶酶菌也可破壞革蘭陰性菌。（二）吞噬作用小吞噬細(xì)胞，主要指血液中的中性粒細(xì)胞。第三節(jié) 真菌性感染淺表真菌感染由致病性強(qiáng)的外源性真菌引起。 病毒顯性感染按癥狀出現(xiàn)早晚和持續(xù)時(shí)間長短又分急性感染和持續(xù)性感染。 許多病毒感染可引起機(jī)體免疫應(yīng)答降低或暫時(shí)性免疫抑制。第二節(jié) 病毒性感染 一、病毒感染的致病機(jī)制 病毒致病性：指某一病毒感染特定宿主并引起疾病。 1. 按病情緩急不同分為：急性感染；慢性感染。 ?脂多糖（LPS），耐熱，100e 1h不被破壞。*致病性(pathogenicity):病原微生物能引起感染的能力。（3）抗生素與中草藥：現(xiàn)有抗生素對(duì)病素?zé)o抑制作用；中草藥對(duì)病毒的增殖有一定的抑制作用。多見于一些引起腫瘤的病毒。晚期蛋白主要包括：病毒結(jié)構(gòu)蛋白（如衣殼蛋白）。如： 流感病毒的表面結(jié)構(gòu)神經(jīng)氨酸酶與呼吸道上皮細(xì)胞表面的半乳糖N乙酰神經(jīng)氨酸結(jié)合。 病毒體（virion ）： 指完整的、成熟的病毒顆粒。兼性厭氧菌： 兼有需氧呼吸和無氧發(fā)酵兩種功能，在有氧或無氧環(huán)境中都能生長， 但以有氧時(shí)生長較好。蒸餾法可除去熱原質(zhì)。 ：具多層膜結(jié)構(gòu) ： (1) 芽孢的形成細(xì)菌形成芽孢的能力是由菌體內(nèi)的芽孢基因決定的。 ：多糖；多肽；透明質(zhì)酸。（mesosome）： 部分細(xì)胞膜內(nèi)陷、折疊、卷曲形成的囊狀物。 A組鏈球菌M蛋白 2．.革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁組分 (1).肽聚糖 由聚糖骨架和四肽側(cè)鏈組成（無五肽交聯(lián)橋）。醫(yī)學(xué)微生物學(xué)（衛(wèi)生部規(guī)劃教材 第6版 周正任主編）電子教案 第一章 緒 論第一節(jié) 微生物與病原微生物微 生 物（microorganism）: 存在于自然界中，個(gè)體微小，結(jié)構(gòu)簡單，肉眼直接看不見，必須借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)千倍，甚至數(shù)萬倍才能觀察到的微小生物。 含量少，僅有1~2層。功能： 擴(kuò)大細(xì)胞膜面積；增加酶的含量和能量的產(chǎn)生。 ：在人和動(dòng)物的體內(nèi)或營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基中易形成。 芽孢一般只在動(dòng)物體外才形成。（2）毒素（toxin）: 外毒素 G+ 菌、少數(shù)G 菌產(chǎn)生的、釋放到菌體外 的蛋白質(zhì)。大多數(shù)的病原菌。是細(xì)胞外的結(jié)構(gòu)形式，具有典型的形態(tài)結(jié)構(gòu)，并有感染性。人類免疫缺陷病毒的表面結(jié)構(gòu)gp120與淋巴細(xì)胞表面的CD4分子結(jié)合。 II. 單正鏈RNA病毒: 病毒RNA的鹼基序列與mRNA完全相同者，稱為正鏈RNA病毒。 2. 病毒的異常增殖1)頓挫感染(abortive infection)： 有的細(xì)胞缺乏病毒復(fù)制所需要的酶、能量以及某些必要成分，因此病毒在其中不能合成自身成分，或不能組裝成有感染性的病毒顆粒。 第三節(jié) 真菌 真菌(fungus)：是一大類具有細(xì)胞壁和典型 細(xì)胞核，不含有葉綠素，不分根、莖、葉的真核細(xì)胞型微生物。*毒力（virulence）：致病菌的致病性強(qiáng)弱程度。 ?抗原性弱，抗體無中和作用；不能用甲醛脫毒為類毒素。 1）.急性感染(acute infection)：發(fā)作突然，病程較短，一般是數(shù)日至數(shù)周。 病毒毒力：反映病毒引起、產(chǎn)生癥狀和病理變化的強(qiáng)弱。如：麻疹病毒 殺傷免疫活性細(xì)胞。 (acute viral infection)病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)大量增殖，引起細(xì)胞破壞、死亡，機(jī)體出現(xiàn)典型的臨床癥狀。 嗜角質(zhì)性。大吞噬細(xì)胞，即單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)（mononuclear phagocyte system, MPS），包括血液中的單核細(xì)胞和各種組織器官中的巨噬細(xì)胞 1．吞噬和殺菌過程 步驟：⑴ 趨化： 吞噬細(xì)胞定向聚集到局部炎癥部位⑵ 接觸： 即病原體附著到吞噬細(xì)胞表面 ⑶ 吞入： 形成吞噬體（phagosome）,―――吞噬（phagocytosis）。3．防御素 ( defensin ) : 為一類富含精氨酸的小分子多肽 ， 主要存在與中性粒細(xì)胞的嗜天青顆粒中。抗胞內(nèi)菌感染的主要目的是殺滅細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌，因而特異性細(xì)胞免疫是主要的防御機(jī)制。（3）廣譜性： AVP是一類酶類，作用無特異性。 作用機(jī)制: 直接封閉與細(xì)胞受體結(jié)合的病毒抗原表位，或改變病毒表面構(gòu)型；阻止病毒吸附、侵入易感細(xì)胞 .病毒－中和抗體免疫復(fù)合物的清除：（1）被巨噬細(xì)胞吞噬清除。基因型變異：基因結(jié)構(gòu)的改變。1）形態(tài)與結(jié)構(gòu)2）化學(xué)組成： 核酸（DNA或RNA）；蛋白質(zhì)毒性噬菌體（virulent phage）: 能在宿主細(xì)胞內(nèi)增殖，產(chǎn)生許多子代噬菌體，并最終裂解細(xì)菌。 突變型：發(fā)生突變后的菌株。 ★基因組突變的方式：點(diǎn)突變；缺失突變；插入突變。第二節(jié) 微生態(tài)平衡與失調(diào)微生態(tài)失調(diào)(microdysbiosis)是指正常微生物群與其宿主之間的平衡在外界環(huán)境因素的影響下被破壞，出現(xiàn)平衡失調(diào)狀態(tài)，對(duì)人體有害。第一節(jié) 物理消毒滅菌法一、熱力滅菌法 高溫對(duì)細(xì)菌有明顯的致死作用蛋白質(zhì)變性；核酸斷裂。殺菌作用特點(diǎn)：穿透力弱，用于空氣消毒和物體表面消毒。如 協(xié)同凝集試驗(yàn)， 免疫熒光法 ( IF )，酶免疫測(cè)定（EIA），夾心ELISA 方法等5. 其他檢測(cè)方法： 如分子生物學(xué)方法檢測(cè)細(xì)菌核酸： PCR ，核酸雜交。3．分離與鑒定 （isolation and identification): 是確診最可靠的方法。二、輻射殺菌法紫外線殺菌 波長200300nm的紫外線有殺菌作用， 其中以265266nm作用最強(qiáng)。無菌(asepsis)： 不存在任何活的微生物。②產(chǎn)生有害代謝產(chǎn)物，有些菌可產(chǎn)生H2O2而殺傷其他細(xì)菌③營養(yǎng)競(jìng)爭作用2． 營養(yǎng)作用：如大腸埃希菌產(chǎn)生維生素K和維生素B族。第三節(jié) 病毒的遺傳變異 一、病毒的基因組 1. 遺傳物質(zhì)：DNA 或RNA 2. 特點(diǎn)：只有一種核酸，且存在形式多樣；基因組小，基因常有重疊；結(jié)構(gòu)較簡單；復(fù)制方式具有多樣性； 有較大的遺傳不穩(wěn)定性。 突變與選擇：隨機(jī)性 ；選擇性。分布廣，有細(xì)菌的場(chǎng)所就有相應(yīng)的噬菌體存在。 （趙蔚明）第五章 遺傳與變異遺傳：子代與親代性狀的相似性。1．病毒中和抗體（virusneutralizing antibodies）： 指針對(duì)病毒某些表面抗原的抗體。IFN抗病毒作用的特點(diǎn)：（1）間接性： 通過誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白（AVP）發(fā)揮抗病毒作用。對(duì)人類致病的兼性胞內(nèi)菌有：結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)分枝桿菌、傷寒沙門菌、布魯菌、肺炎軍團(tuán)菌和李斯特菌等。作用于革蘭陽性菌的胞壁肽聚糖，使之裂解而溶菌。在妊娠3個(gè)月內(nèi)，胎盤屏障尚未發(fā)育完善，病原微生物有可能通過胎盤感染胎兒。 ◆受遺傳因素影響，與MHC II分子有關(guān)。 亞臨床感染(subclinical viral infection) （二）、顯性感染(apparent viral infection )：病毒進(jìn)入機(jī)體，到達(dá)靶細(xì)胞后大量增殖，使細(xì)胞損傷，致使機(jī)體出現(xiàn)臨床癥狀的感染。 特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞對(duì)感染細(xì)胞造成損傷，屬IV型變態(tài)反應(yīng)。⑤膿毒血癥(pyemia)：化膿性細(xì)菌侵入血流后，在其中大量繁殖，并通過血流擴(kuò)散至宿主體的其他組織或器官，產(chǎn)生新的化膿性病灶。（二）、顯性感染(apparent infection) 當(dāng)宿主體抗感染的免疫力較弱，或侵入的致病菌數(shù)量較多、毒力較強(qiáng)，以致機(jī)體的組織細(xì)胞受到不同程度的損害，生理功能也發(fā)生改變，出現(xiàn)一系列的臨床癥狀和體征。 ?毒性弱。*條件致病菌（conditioned pathogen）：正常情況下不致病，在某些條件改 變的特殊情況下可以致病。 肝炎病毒對(duì)過氧乙酸、次氯酸鹽較敏感。 細(xì)胞裂解，病毒釋放裸露的病毒 病毒出芽，游離于細(xì)胞外包膜病毒 某些病毒基因組復(fù)制完成后，并不進(jìn)行組裝，而是將其核酸（DNA）整合到宿主染色體中，隨宿主染色體一起復(fù)制，引起宿主細(xì)胞功能的改變。C. 晚期合成：以子代DNA為模板，轉(zhuǎn)錄晚期mRNA、翻譯晚期蛋白。 （1） 吸附（ adsorption）： 宿主細(xì)胞表面受體――病毒表面結(jié)構(gòu)蛋白兩者的特異結(jié)合宿主細(xì)胞表面受體是影響病毒宿主特異性和組織嗜性的主要決定因素。 第 二 節(jié) 病 毒 病毒(virus)： 是一類形體微小，結(jié)構(gòu)簡單、只含有一種類型的核酸、專性活細(xì)胞寄生、以復(fù)制方式繁殖的非細(xì)胞型微生物。 如幽門螺桿菌。G 菌細(xì)胞壁脂多糖； 耐高溫；121 ，20min不被破壞；250 高溫， 干烤才能破壞熱原質(zhì)。 不同細(xì)菌的芽孢形態(tài)、大小、位置有所差異，是鑒別細(xì)菌的指標(biāo)之一。 粘液層(slime layer)邊界不明顯且易被洗脫者。（二）、細(xì)胞膜（cell membrane1．功能：參與細(xì)菌物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)，生物合成，分泌、呼吸等生物學(xué)作用。多個(gè)磷壁酸分子組成長鏈穿插于肽聚糖層中，分為： 壁磷壁酸通過磷脂與肽聚糖上的胞壁酸共價(jià)結(jié)合 膜磷壁酸與細(xì)胞膜外層上的糖脂共價(jià)結(jié)合 (3).蛋白質(zhì)： 某些革蘭氏陽性菌表面尚有一些特殊的表面蛋白質(zhì)； 如：金黃色葡萄球菌A蛋白（SPA）。病原微生物（pathogenic microorganisms）: 能夠引起人類和動(dòng)植物發(fā)生疾病的微生物。 (2).外膜 是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的主要結(jié)構(gòu)，由脂蛋白、脂質(zhì)雙層和脂多糖組成。 （三）、細(xì)胞質(zhì)（cytoplasm） 內(nèi)含核糖體、質(zhì)粒、胞質(zhì)顆粒等許多重要結(jié)構(gòu)。在普通培養(yǎng)基上或連續(xù)傳代則易消失。營養(yǎng)缺乏時(shí)易形成。重要的致病物質(zhì)。專性厭氧菌： 缺乏完善的呼吸酶系統(tǒng)，只能在無氧環(huán)境中進(jìn)行發(fā)酵。 一、病毒的大小與形態(tài) 觀察儀器：電子顯微鏡。 （2）穿入（penetration）: 病毒吸附在易感細(xì)胞表面上后，可通過多種方式進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。 以脊髓灰質(zhì)炎病毒為例，侵入的RNA直接附著于宿主細(xì)胞核糖體上，翻譯出大分子蛋白，并迅速被蛋白水解酶降解為結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白，如依賴RNA的RNA聚合酶。 非容納細(xì)胞(nonpermissive cell)：不能為病毒復(fù)制提供相應(yīng)的酶、能量及必要成分的細(xì)胞。 真菌細(xì)胞高度分化，有核膜和核仁，胞質(zhì)內(nèi)有完整的細(xì)胞器。*半數(shù)致死量(median lethal dose,LD50) 半數(shù)感染量(median infective dose,ID50) 在規(guī)定時(shí)間內(nèi)，使一定體重或年齡的某種動(dòng)物半數(shù)死亡或感染所需要的最小細(xì)菌數(shù)或毒素量。 ?對(duì)組織無選擇性，引起的毒性作用大致相同。病愈后，致病菌從宿主消失。 病毒感染的致病機(jī)制包括兩方面： (一)、病毒感染對(duì)宿主細(xì)胞的直接作用 (二)、病毒感染的免疫病理作用 (一)、病毒感染對(duì)宿主細(xì)胞的直接作用 （cytocidal