【正文】 5 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶基因I/D多態(tài)性與疾病的相關(guān)性 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶基因I/D多態(tài)性與高血壓國(guó)外白種人群的研究[9,10]認(rèn)為，D純合子和ID雜合子與II純合子相比，冠心病的患病風(fēng)險(xiǎn)增加了32%和11%，與冠心病等疾病顯著相關(guān)，而與高血壓無顯著相關(guān)。2 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的生物學(xué)特征血管緊張素轉(zhuǎn)換酶又名激肽酶Ⅱ，在附睪、十二指腸、肺、肝、胰、脾、甲狀腺、腎臟和大動(dòng)脈中廣泛分布。本人授權(quán)貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。 cerebral hemorrhages。黃幗等[7]研究發(fā)現(xiàn)，β2 AR基因Glyl6等位基因與高血壓可能存在相關(guān)關(guān)系。表3 β2 AR 27位點(diǎn)多態(tài)性的基因頻率和等位基因頻率分布（%）Tab3 Polymorphism of β2 AR (27 sites) gene and frequencies of the allele (%)組別n 基 因 型 頻 率等位基因頻率Gln27GlnGln27GluGlu27GluGlnGlu 對(duì)照6210()44()8()62()62()EH7814()54()10()82()74 ()EH+CH11428()78()8( )134()94()由表3可見，與對(duì)照組比較，EH組和EH+CH組的Gln27Gln、Gln27Glu和Glu27Glu基因型和Gln和Glu等位基因頻率相應(yīng)指標(biāo)間比較無顯著性差異，EH組和EH+CH組間上述相應(yīng)指標(biāo)間比較亦無顯著性差異。s），兩組間等位基因頻率和基因型的比較采用 χ2 檢驗(yàn)，兩組間均數(shù)比較采用單因素方差分析， P 認(rèn)為有極顯著性差異。因此，β2腎上腺素受體相關(guān)基因成為高血壓的重要候選基因，是近年來人們關(guān)注和研究的熱點(diǎn)。梁輝和傅立心等研究認(rèn)為ACE基因的II基因型是腦卒中發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)因子[7，8]。Age：年齡；Y：歲；sex：性別；F：女性；M：男性；BMI：體重指數(shù)；SBP：收縮壓；DBP：舒張壓；TC：總膽固醇；TG：甘油三酯；LDLC：低密度脂蛋白；HDLC：高密度脂蛋白 由表1可見，與對(duì)照組比較，EH組和EH合并CH組的血壓顯著增高，差異有顯著性（P），而性別構(gòu)成、年齡、體重指數(shù)、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白均無顯著性差異；EH組和EH合并CH組兩組間的上述指標(biāo)比較亦無顯著性差異。DBP (mmHg) 177。 所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)177。（7）引物 100mmol/L 上海捷瑞生物工程有限公司（8）dNTP 10nmol/L 　 天根生化科技（北京）有限公司（9）D2000 DNA Marker 300ul/支 　 天根生化科技（北京）有限公司（10）Taq DNA polymerase 　 天根生化科技（北京）有限公司（11）Tris飽和酚： 　　 上海試劑三廠（12）無水乙醇 　 上海振興化工一廠（13）乙二胺四乙酸（EDTA） 　 Sigma公司（美國(guó)）（14）SDS 　　 天根生化科技（北京）有限公司（15）蛋白酶 K 　　　　　　　 10mg/ml 　 天根生化科技（北京）有限公司（16）溴化乙錠（EB）　　　　　10mg/ml 上海試劑三廠（17）氯仿 　 上海振興化工一廠（18）瓊脂糖 　 西班牙進(jìn)口（19）液體石蠟 　 上海試劑三廠（20）三羥甲基氨基甲烷（Tris） 　 瑞星科技有限公司（21）硼酸 　 上海云嶺化工廠(22)溴酚藍(lán) 　 天津市化學(xué)試劑一廠3 試驗(yàn)方法 標(biāo)本采集：受試者空腹 12h，抽取肘靜脈血2ml,加入到一 2% EDTA抗凝的試管，分離出血漿檢測(cè)血脂；白細(xì)胞70℃冰凍保存用于提取DNA。材 料 與 方 法1 研究對(duì)象 EH組入選患者均來源于貴州地區(qū)無血緣關(guān)系的漢族EH患者78例，其中男53 例，女25例，年齡﹙177。⑥ 與對(duì)照組比較，EH 組和EH+CH組的Gln27Gln、Gln27Glu和Glu27Glu基因型和Gln和Glu等位基因頻率相應(yīng)指標(biāo)間比較無顯著性差異，EH組和EH+CH組間上述相應(yīng)指標(biāo)間比較亦無顯著性差異。貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院 2014屆碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文ACE/β2腎上腺素受體基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓和高血壓性腦出血的關(guān)聯(lián)研究目 錄符號(hào)說明………………………………………………………………1中文摘要………………………………………………………………2前 言………………………………………………………………4第一部分 ACE基因I/D多態(tài)性與原發(fā)性高血壓和高血壓性腦出血的關(guān)聯(lián)研究材料與方法…………………………………………………………5結(jié)果 ………………………………………………………………11討論 ………………………………………………………………14參考文獻(xiàn) …………………………………………………………16第二部分 β2腎上腺素受體Arg16Gly和Gln27Glu基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓和高血壓性腦出血的關(guān)聯(lián)研究材料與方法 ………………………………………………………18結(jié)果 ………………………………………………………………20討論 ………………………………………………………………23參考文獻(xiàn) …………………………………………………………26英文摘要 ……………………………………………………………27致謝 …………………………………………………………………29附：綜 述（一）……………………………………………………31綜 述（二）……………………………………………………39符號(hào)說明縮寫 英文全稱 中文譯名ACE angiotensinconverting enzyme 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶AngⅡ angiotensin Ⅱ 血管緊張素ⅡArg arginine 精氨酸β2 AR β2adrenoceptor β2 腎上腺素受體BMI body mass index 體重指數(shù)Bp base pair 堿基對(duì)CH cerebral hemorrhage 腦出血DBP diastolic blood pressure 舒張壓dNTP deoxyribonucleoside triphosphate 三磷酸脫氧核苷EB ethidium bromide 溴化乙錠EDTA ethylene diamine tetraacetic acid 乙二胺四乙酸 EH essential hypertention 原發(fā)性高血壓Gln glutamine 谷酰胺Glu glutamic acid 谷氨酸Gly glycine 甘氨酸 HDL high density lipoprotein 高密度脂蛋白LDL low density lipoprotein 低密度脂蛋白PCR polymerase chain reaction 多聚酶鏈反應(yīng)RAS rennin angiotensin system 腎素血管緊張素系統(tǒng)Rpm revolutions per minute 轉(zhuǎn)/分鐘SBP systolic blood pressure 收縮壓SNP single nucleotide polymorphism 單核苷酸多態(tài)性TC total cholesterol 總膽固醇TG triglyceriede 甘油三脂TRIs trihydroxymethylaminomethane 三羥甲基氨基甲烷ACE/β2腎上腺素受體基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓和高血壓性腦出血的關(guān)聯(lián)研究專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（心血管病） 研究生：高丙峰 導(dǎo)師：劉興德 教授摘 要 目的：探討ACE基因I/D多態(tài)性和β2AR基因Arg16Gly和Gln27Glu基因多態(tài)性與EH和EH+CH的關(guān)系，旨在從遺傳學(xué)角度為EH和EH+CH的防治提供基礎(chǔ)研究資料。結(jié)論：① ACE基因DD基因型可能是原發(fā)性高血壓和高血壓性腦出血的遺傳易感基因。﹚歲。休息時(shí)坐位測(cè)量肘部血壓，脫去鞋帽只穿內(nèi)衣測(cè)量身高、體重，計(jì)算體重指數(shù)（BMI）＝體重（Kg）/身高（m2）。標(biāo)準(zhǔn)差表示（177。* 177。2. ACE 基因I/D多態(tài)性的電泳結(jié)果ACE 基因I/D多態(tài)性的電泳結(jié)果見圖1。聶瑩雪等[9]進(jìn)一步將研究對(duì)象限于原發(fā)性腦出血，并且除外了其它原因的繼發(fā)性腦出血，應(yīng)用多因素分析，降低了環(huán)境危險(xiǎn)因素對(duì)分析的干擾，發(fā)現(xiàn)ACE基因DD型對(duì)腦出血的影響更為明顯。本研究擬通過對(duì)EH和EH+CH患者的β2腎上腺素受體Arg16Gly和Gln27Glu基因多態(tài)性進(jìn)行分析，以探討β2腎上腺素受體基因多態(tài)性與EH和EH+CH的關(guān)系，為EH和EH+CH的防治提供基礎(chǔ)研究資料。以上資料統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，在 軟件包中進(jìn)行。討 論EH是一個(gè)具有強(qiáng)烈遺傳傾向的多因素共同作用的復(fù)雜病癥，研究發(fā)現(xiàn)5號(hào)染色體長(zhǎng)臂的遠(yuǎn)端區(qū)域可作為研究 EH 的一個(gè)重要目標(biāo)，因其發(fā)現(xiàn)在白種人中此區(qū)域與收縮壓[2]和運(yùn)動(dòng)后舒張壓[3]相關(guān)并且該區(qū)域包含了大批編碼蛋白質(zhì)的基因，而這些蛋白質(zhì)是重要的血壓調(diào)節(jié)因子。但Molly 的研究顯示，與血壓正常者相比，高血壓患者 Gly16頻率雖然偏高，但未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[8]。 angiotensin coveting enzyme。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書。主要存在于肺毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及肺囊泡中。國(guó)內(nèi)有學(xué)者報(bào)道血管緊張素轉(zhuǎn)換酶位點(diǎn)與高血壓關(guān)系不一致，侯淑琴等[11]應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)對(duì)287例高血壓患者和316例正常血壓對(duì)照者進(jìn)行了血管緊張素轉(zhuǎn)換酶基因多態(tài)性檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)高血壓組血管緊張素轉(zhuǎn)換酶純合基因型(D/D) 頻率較正常對(duì)照組明顯升高(x2=，P)，推出血管緊張素轉(zhuǎn)換酶基因I/D多態(tài)性可能與該地區(qū)漢族高血壓相關(guān)聯(lián)。中國(guó)漢族[1]、蒙古族和哈薩克族D等位基因的頻率差異無顯著性意義(x2=，P=)，達(dá)斡爾族、鄂溫克族D等位基因的頻率差異無顯著性意義(x2=， P=)，而達(dá)斡爾族、鄂溫克族與漢族D等位基因的頻率存在顯著差異(x2=，P=) 。多項(xiàng)研究顯示血管緊張素轉(zhuǎn)換酶基因多態(tài)性與腦血管病的高度危險(xiǎn)因素高血壓、冠心病及動(dòng)脈粥樣硬化具有相關(guān)性。學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。The frequencies of Gln and Glu allele in control group were % and % , and were % and % in EH group, and were % and % in EH+CH group respectively. ⑥ Compared with that of control group, there was no statistically significant difference in distribution of Gln27Gln,Gln27Glu and Glu27Glu genotypes ,also of Gln and Glu allele in EH group and in EH+CH group, there was no statistically significant difference in distribution of Gln27Gln,Gln27Glu and Glu27Glu genotypes ,also of Gln and Glu allele between that of EH group and of EH+CH group. Conclusions: ① ACE gene DD genotypes maybe the genetic susceptibility genes for the patient with EH and EH+CH. ②Gly16Gly genotypes of β2 AR gene maybe the genetic susceptibility genes for the patient with EH and EH+CH. ③Gln27Glu polymorphism of β2AR gene may not play the major role in pathogenesis of EH and EH+CH.Key words : essential hypertension。Peter等測(cè)定了136名非洲高加索人高血壓患者的β2 AR