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江西省上饒市橫峰中學(xué)高中生物選修一知識(shí)點(diǎn)總結(jié):專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用20xx高考(專業(yè)版)

  

【正文】 ( 2) 將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深? 將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)聚集,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般來(lái)說(shuō),在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時(shí)間),同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 ( 1)測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法有 稀釋涂布平板法 和 顯微鏡直接計(jì)數(shù) 。 ② 缺點(diǎn) :這種方法保存的時(shí)間不長(zhǎng),菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。 將聚集的菌種 逐步稀釋 分散到培 養(yǎng)基的表面。 滅菌方法: ①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法; ②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱 ; ③培養(yǎng)基、無(wú)菌水等使用高 壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋 。如 N NH NO NH4+(無(wú)機(jī)氮源)蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉 膏 、蛋白胨(有機(jī)氮源)等。按照 成分 培養(yǎng)基可分為 人工合成培養(yǎng)基 和 天然培養(yǎng)基 。 根據(jù)菌落的特征可以判斷是哪一種菌 。 單質(zhì)碳不能作為碳源 。消毒方法常用 煮沸消毒法 , 巴氏消毒法 (對(duì)于一些不耐高溫的液體)還有 化學(xué)藥劑 (如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、 紫外線消毒 。 ,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎?為什么? 答:空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。重復(fù)以上操作,在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。 ①臨時(shí)保藏方法 將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上,在合適的溫度下培養(yǎng)。 ( 2)選擇性培養(yǎng)基 在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長(zhǎng),同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,稱作 選擇培養(yǎng)基 。在實(shí)際操作中,通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng),以保證獲得菌落數(shù)在 30~300 之間、適于計(jì)數(shù)的平板。 課題延伸 對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選后,只是分離純化的第一步,為確定得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn),纖維素酶的發(fā)酵方法有 液體發(fā)酵 和 固體發(fā)酵 兩種。方法二的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,不存在菌落混雜問(wèn)題,缺點(diǎn)是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì),可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。 ( 2)纖維素酶是一種 復(fù)合酶 ,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即 C1酶、 CX 酶和葡萄糖苷酶 ,前兩種酶使纖維素分解成 纖維二糖 ,第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。為了保證結(jié) 果準(zhǔn)確,一般設(shè)置 3~ 5 個(gè)平板, 選擇菌落數(shù)在 30~ 300 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù) ,并 取平均值 。將 1mL 培養(yǎng) 的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中,與甘油充分混勻后,放在 - 20℃ 的冷凍箱中保存。 ,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線? 答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。分為系列 稀釋操作 和 涂布平板操作 兩步。 ( 2)倒平板操作的步驟: ①將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞。培養(yǎng)基還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì) PH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。 培養(yǎng)基按照 物理性質(zhì) 可分為 液體培養(yǎng)基 半固體培養(yǎng)基 和 固體培養(yǎng)基 。碳源:能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。 無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外,還有什么目的
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