血清總膽紅素和結(jié)合膽紅素測定(更新版)
【正文】 明書要求復(fù)溶，但復(fù)溶后冰箱保存不宜過長(約可保存1周)，如系液體(可能含有甘油)，置4℃冰箱可保存較長時(shí)間，BOD貯存溶液的酶活性一般在數(shù)千至1萬～2萬U/L，BOD工作液酶活性可按反響液中BOD終濃度達(dá)0.3～1.0U/ml計(jì)算。 在pH3.7～4.5緩沖液中，BOD催化單葡萄糖醛酸膽紅素(mBc)、雙葡萄糖醛酸膽紅素(dBc)及大局部δ膽紅素氧化，非結(jié)合膽紅素(Bu)在此pH條件下不被氧化。,Biobase,第十三頁，共二十四頁。 2．精密度 正常濃度時(shí)精密度較差，特別是批間CV，據(jù)報(bào)道為14%～20%；而膽紅素342μmol/L時(shí)，精密度佳，批內(nèi)CV為0.95%，批間CV5%～10%。,Biobase,第十一頁，共二十四頁。,11,改進(jìn)JG法測定血清(xu232。 2．輕度溶血對(duì)本法(běn fǎ)無影響，但嚴(yán)重溶血時(shí)可使測定結(jié)果偏低。 (2) 比值40%～60% 肝細(xì)胞性黃疸。但某些疾病如膽汁淤積型肝炎時(shí)，盡管肝細(xì)胞受累較輕，血清膽紅素卻可升高。ngd249。,Biobase,第五頁，共二十四頁。 (2) 配制標(biāo)準(zhǔn)液的膽紅素須符合以下標(biāo)準(zhǔn)：純膽紅素的氯仿溶液，在25℃條件下，光徑1.000177。 6．5.0g/L疊氮鈉溶液。濾紙過濾，置棕色瓶，室溫保存(bǎoc,3,改進(jìn)(gǎili225。h233。本法重氮反響pH6.5，最后參加堿性酒石酸鈉使紫色偶氮膽紅素(吸收峰530nm)轉(zhuǎn)變成藍(lán)色偶氮膽紅素，在600nm波長比色，使檢測靈敏度提高。置塑料瓶中，室溫保存。ng)JG法測定血清總膽紅素和結(jié)合膽紅素 【試劑】,7．膽紅素標(biāo)準(zhǔn)液 (1) 目前一般用游非結(jié)合膽紅素配制標(biāo)準(zhǔn)液，此標(biāo)準(zhǔn)品須用含白蛋白的溶劑配制，常用(ch225。866。,Biobase,第六頁，共二十四頁。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度值均應(yīng)減去此吸光度，然后與相應(yīng)膽紅素濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,Biobase,第七頁，共二十四頁。ishēng)障礙性貧血及數(shù)種繼發(fā)性貧血(主要見于癌或慢性腎炎引起)，血清總膽紅素減少。uq237。 3．疊氮鈉能破壞重氮試劑，終止偶氮反響。 7．結(jié)合膽紅素測定在臨床上應(yīng)用很廣，但至今無候選參考方法，國內(nèi)也無推薦方法。nw233。ng)JG法測定血清總膽紅素和結(jié)合膽紅素H,【評(píng)價(jià)】 3．重氮反響法測定膽紅素，也可用甲醇(ME法)或二甲亞砜等作加速劑，可做成單一試劑，反響pH和顯色pH都在酸性，560nm波長比色，易于自動(dòng)化。)膽紅素,【原理】 膽紅素呈黃色，在450nm附近有最大吸收峰。,15,膽紅素氧化酶法測定總膽紅素和結(jié)合(ji233。配制后分裝于聚丙烯管內(nèi)，－70℃保存，可穩(wěn)定6個(gè)月。,17,膽紅素氧化酶法測定總膽紅素和結(jié)合(ji233。4.10μmol/L(n=97)， 結(jié)合膽紅素為2.57177。od224。)膽紅素,【本卷須知】 3．Hb在1.0g/L以下時(shí)，對(duì)結(jié)果影響不大。)膽紅素,5．結(jié)合膽紅素標(biāo)準(zhǔn)品 合成的二?；撬崮懠t素(DTB)為水溶性化合物，可與重氮化氨基苯磺酸直接反響，產(chǎn)生吸收光譜與偶氮膽紅素相似的偶氮色素。經(jīng)電泳證明混濁是因球蛋白及纖維蛋白原沉淀引起。,22,膽紅素氧化酶法測定總膽紅素和結(jié)合(ji233。 3．由于BOD來源困難，價(jià)格高，目前尚無國產(chǎn)試劑盒提供，而進(jìn)口試劑那么價(jià)高，故此法尚很少在臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用。2．輕度溶血對(duì)本法無影響，但嚴(yán)重溶血時(shí)可使測定
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