【正文】 B M P 2 , B M P 4 胚胎干細(xì)胞 ? 軟骨細(xì)胞 地塞米松，磷酸甘油 胚胎干細(xì)胞 ? 骨細(xì)胞 基因轉(zhuǎn)染 胚胎干細(xì)胞 ? 胰島素分泌細(xì)胞 7. ES細(xì)胞的誘導(dǎo)分化 第三十頁，共七十六頁。 ? 傳代時(shí)一般是用胰酶 EDTA消化，再用微吸管或撥針將其打散成單個(gè)細(xì)胞，然后移入新的飼養(yǎng)層上，培養(yǎng)幾天后，即可出現(xiàn)新的克隆點(diǎn)，在其分化之前可以再進(jìn)行傳代。 ? 培養(yǎng)液一般為 DMEEM+15%FCS。 第二十頁，共七十六頁。 ? 其他動(dòng)物只獲得了類 ES細(xì)胞。 ? ES細(xì)胞全能性的檢測(cè)方法是以胚胎干細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞核移植。 三、胚胎干細(xì)胞 概念 胚胎干細(xì)胞 (embryonic stem cells,ESC)是一種從早期胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)或原始生殖細(xì)胞經(jīng)別離、體外培養(yǎng)、克隆等得到的具有發(fā)育全能性的細(xì)胞。 ? 干細(xì)胞療法就是利用已特殊分化的干細(xì)胞 ,通過特殊的途徑提供細(xì)胞去替代那些在退行性過程和損傷中失去的細(xì)胞。 〔 2〕多能干細(xì)胞：具有分化成多種細(xì)胞和組織的潛能，但卻失去了發(fā)育成完整個(gè)體的能力。 一 、個(gè)體發(fā)生過程 受精 卵裂 受精后 72h 受精后 57天 精子 +卵子 合子 卵裂球 桑椹胚 囊胚 滋養(yǎng)層 ?胎盤及胎兒附屬結(jié)構(gòu) 囊胚 內(nèi)胚層 ?消化道 、 呼吸道上皮和腺體；肝；膽；胰 。 囊 胚 ICM 第五頁，共七十六頁。 第九頁，共七十六頁。 ? 目前人干細(xì)胞的主要來源或者潛在來源如下 : ? ①胚泡 ,可以提供多能干細(xì)胞 。 第十三頁，共七十六頁。重構(gòu)胚經(jīng)過胚胎移植，有活的羔羊產(chǎn)生，證明了綿羊的類 ES細(xì)胞具有發(fā)育全能性。 2024年 3月，美國麻省理工學(xué)院的科學(xué)家宣布，他們首次利用人體胚胎干細(xì)胞培育出毛細(xì)血管，證明了胚胎干細(xì)胞技術(shù)在治療心血管疾病等領(lǐng)域的應(yīng)用潛力。 培養(yǎng)條件： (1) 特殊的培養(yǎng)液：用 DMEM培養(yǎng)液，其中胎牛血清的濃度和質(zhì)量很重要，加非必須氨基酸； β巰基乙醇。 傳 代 ? 進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)，當(dāng) ICM增殖后或 PGCs出現(xiàn) ES樣克隆后即可傳代。 〔 2〕細(xì)胞功能 〔 3〕細(xì)胞外表的特殊標(biāo)志： AKP陽性 〔 4〕細(xì)胞內(nèi)特異基因的表達(dá) 第二十六頁，共七十六頁。 四、 ES細(xì)胞的應(yīng)用前景 ? 胚胎干細(xì)胞〔 ES〕成為當(dāng)今生命科學(xué)和生物技術(shù)研究的熱點(diǎn)。 在進(jìn)行 ES細(xì)胞建系和定向分化的同時(shí) ,以 ES細(xì)胞為材料，在核移植、嵌合體、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究等方面也進(jìn)行了廣泛的嘗試 ,已經(jīng)充分表達(dá)出 ES細(xì)胞在加快良種家畜繁育、生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、哺乳動(dòng)物發(fā)育模型、基因和細(xì)胞治療等方面有著廣闊的應(yīng)用前景。 ? 生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：建立轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系，抗病育種；藥用蛋白 第三十八頁，共七十六頁。 ? 使人的 ES細(xì)胞與豬等動(dòng)物的胚胎結(jié)合 ， 可得到人豬嵌合體動(dòng)物 ， 由于 ES細(xì)胞具有全能性 ， 可分化形成不同胚層 ， 包括某些器官 ， 這樣的器官與人的器官具有相同的免疫特性 ， 因此它不會(huì)對(duì)人產(chǎn)生排異反響 。 第四十三頁，共七十六頁。 ? 主要圍繞兩個(gè)問題而展開： ? 一是如何看待胚胎。 ? 2024年 10月，聯(lián)合國大會(huì)以 80票贊成、 79票反對(duì)、 15票棄權(quán)的表決結(jié)果，將 ?禁止人的克隆生殖國際公約 ?推遲一年。 而且用 ES細(xì)胞與胚胎進(jìn)行 嵌合 克隆動(dòng)物 ,可以解決哺乳動(dòng)物遠(yuǎn)緣雜交的困難 ,生產(chǎn)出 珍貴的動(dòng)物 ,也可以進(jìn)行 異種動(dòng)物克隆 ,有助于保護(hù)珍惜野生動(dòng)物。 第五十五頁，共七十六頁。 ? 人的 ES細(xì)胞可以高水平地表達(dá)端粒酶活性，二倍體的人體細(xì)胞不表達(dá)端粒酶，并且隨著年齡的增長端粒變短，而在組織培養(yǎng)到達(dá)一定增殖壽命時(shí)，就開始衰老。 第六十三頁，共七十六頁。 ? 胚胎發(fā)育的晚期，通過組織移植或嫁接等方法所形成的局部組織或器官的嵌合稱為次生性嵌合。 第七十一頁，共七十六頁。 內(nèi)容總結(jié) 胚 胎 干