3第3章免疫原和抗血清的制備多媒體(更新版)
【正文】 :0105:05:0105:05Sunday, February 5, 2023 ? 1知人者智，自知者明。 2023年 2月 5日星期日 上午 5時(shí) 5分 1秒 05:05: ? 1楚塞三湘接，荊門九派通。 2023年 2月 上午 5時(shí) 5分 :05February 5, 2023 ? 1行動(dòng)出成果，工作出財(cái)富。 ? 靜夜四無鄰，荒居舊業(yè)貧。 ? 免疫原不純，含有微量的雜抗原，制備出的抗血清出現(xiàn) 2－ 3種雜抗體。 刺激淋巴細(xì)胞增殖和分化。 用于人體的佐劑： 氫氧化鋁、明礬、 poly I∶C 、胞壁酰二肽、細(xì)胞因子、熱休克蛋白 常用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的佐劑： 弗氏佐劑 (Freund’ s adjuvant) 一、佐劑的種類 弗氏佐劑 (Freund,s adjuvant)： 弗氏完全佐劑－羊毛脂與液體石蠟的混合物 弗氏不完全佐劑－弗氏完全佐劑加卡介苗 乳化方法： 研磨法和攪拌混合法 ? 細(xì)胞因子佐劑與抗原合用，可以更有效激發(fā)機(jī)體免疫功能，增強(qiáng)免疫反應(yīng)。 親和層析 ? 抗原或抗體與支持物的結(jié)合 ? 將抗原或抗體結(jié)合到支持物上的方法達(dá)數(shù)十種，可歸納為載體結(jié)合法、物理吸附法、交聯(lián)法和網(wǎng)絡(luò)法。 ? 具有離子交換集團(tuán)的纖維素。 ? 核酸去除法：可采用氯化錳、硫酸魚精蛋白等核酸提取沉淀劑，而核糖核酸降解法更簡(jiǎn)單（采用 DNA或 RNA酶） ? 有機(jī)溶劑沉淀法：使用的有機(jī)溶劑多為乙醇或丙酮。常用于處理微生物和組織的細(xì)胞。 ? 這些蛋白質(zhì)多為復(fù)雜的蛋白組成，免疫前需進(jìn)行純化。 第三章 免疫原和抗血清的制備 第一節(jié) 免疫原的制備 一、顆粒性抗原的制備 二、可溶性抗原的制備和純化 三、半抗原性免疫原的制備 第二節(jié) 免疫佐劑 一、佐劑的種類 二、佐劑的作用機(jī)制 第三節(jié) 抗血清的制備 一、免疫動(dòng)物的選擇 二、免疫程序 三、動(dòng)物采血法 第四節(jié) 抗血清的鑒定和保存 一、抗血清的鑒定 二、抗血清的保存 第五節(jié) 抗血清的純化 一、特異性 IgG抗體 二、單價(jià)特異性抗血清 思考題 小結(jié) ? 基本要求： ? 掌握：免疫原、抗血清的制備過程。 ? 蛋白質(zhì)、糖蛋白、細(xì)菌毒素、酶、補(bǔ)體和核酸都是良好的可溶性抗原。 ? 超聲破碎法：利用超聲波機(jī)械振動(dòng)的原理使細(xì)胞破碎。 選擇性沉淀法： 核酸去除法－氯化錳、硫酸魚精蛋白、鏈霉素 鹽析法－硫酸銨、硫酸鈉 有機(jī)溶劑沉淀法－乙醇、丙酮 聚合物沉淀法－聚乙二醇 選擇沉淀法 ? 采用各種沉淀劑或某些條件促使抗原成分沉淀的方法。 離子交換層析 ? 離子交換層析是利用一些帶電離子集團(tuán)的凝膠或纖維素，吸附帶有相反電荷的蛋白質(zhì)抗原。 最常用的支持物是 Separose4B（瓊脂糖珠） (2)配體的選擇 條件： ①抗原或抗體必須單一特異性； ②抗原與抗體必須具有較高的親和力； ③配體必須有一個(gè)適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)基團(tuán)。 具有免疫原性的佐劑 :如卡介苗、枯草分支桿菌、短小棒狀桿菌、百日咳桿菌、革蘭氏陰性桿菌內(nèi)毒素（脂多糖）和細(xì)胞因子。 刺激單核 吞噬細(xì)胞系統(tǒng)，增強(qiáng)其處理和提呈抗原的能力。 鹽析法： 硫酸銨鹽析法、硫酸鈉鹽析法 凝膠過濾法： 常結(jié)合鹽析法 離子交換層析法： DEAE纖維素、 QAEsephadex、 QAE纖維素 親和層析法： 純化抗原或 SPA交聯(lián) Sepharose 4B制成親和層析柱 一、特異性 IgG抗體 單價(jià)特異性抗血清 ? 血清只與其特異性抗原發(fā)生反應(yīng)。 特異性 IgG抗體的純化方法有鹽析法、凝膠過濾法、離子交換層析法、親和層析法等；制備單價(jià)特異性抗血清可采用親和層析法和吸附劑方法。 。 :05:0105:05:01February 5, 2023 ? 1意志堅(jiān)強(qiáng)的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 :05:0105:05Feb235Feb23 ? 1越是無能的人，越喜歡挑剔別
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