細(xì)胞培養(yǎng)的常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案(更新版)
【正文】 %酒精擦拭后再放工作臺(tái) ? 試劑瓶開(kāi)啟后，要傾斜放在試管架上 ? 操作過(guò)程中盡量減少談話(huà) 問(wèn)題二：怎樣觀察活細(xì)胞和死細(xì)胞 ? １、活細(xì)胞 ? 透明，飽滿(mǎn)，清晰 問(wèn)題二：怎樣觀察活細(xì)胞和死細(xì)胞 ? １、死細(xì)胞 ? 灰暗，無(wú)光澤 問(wèn)題三：細(xì)胞在什么時(shí)候傳代最好？如何掌握細(xì)胞生長(zhǎng)密度？ ? 一般情況下，細(xì)胞在生長(zhǎng)至完全匯合后就要傳代，所有細(xì)胞都有一個(gè)共同要求，即不宜生長(zhǎng)過(guò)密（也就是通常說(shuō)的長(zhǎng)老了），許多細(xì)胞系都有它的生長(zhǎng)特點(diǎn)： ? 成堆成片的生長(zhǎng) ? 成克隆樣生長(zhǎng) 問(wèn)題三：細(xì)胞在什么時(shí)候傳代最好？如何掌握細(xì)胞生長(zhǎng)密度？ ? 有接觸抑制的細(xì)胞，就要在它完全匯合前傳代，即 80%密度，不然細(xì)胞就會(huì)引起分化。 ? 有沒(méi)其它消化方式，時(shí)間如何控制？消化液要吸出嗎 ？ ? 常見(jiàn)問(wèn)題：細(xì)胞沒(méi)反應(yīng)或消化過(guò)度怎么辦？ 問(wèn)題五：懸浮細(xì)胞如何傳代？ ? 細(xì)胞密度在 2 106，也就是掌握在生長(zhǎng)至最大密度之前傳代，方法 :離心棄去舊液，加新鮮培養(yǎng)液將細(xì)胞混勻，然后分成 36瓶（或按要求分瓶）。支原體多吸附或散在于細(xì)胞表面和細(xì)胞之間。 ②熒光染色法：熒光染色用能與 DNA特異性結(jié)合的熒光染料 Hoechst 33258，可使支原體內(nèi)含有的 DNA著色，染色后用熒光顯
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