【正文】 驗(yàn)室工作導(dǎo)則。 技術(shù)夾層寬度應(yīng)不低于600mm，800mm為宜。 緩沖間、試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、樣品處理區(qū)設(shè)置正壓間；擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)設(shè)置負(fù)壓間。7. PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)與裝修注意事項(xiàng)：規(guī)范的安裝流程和全面的服務(wù)流程；嚴(yán)格按照規(guī)范科學(xué)設(shè)計(jì)的安裝流程。 6 安全與自動(dòng)系統(tǒng) 疏散出口（專(zhuān)用走廊）設(shè)置專(zhuān)用疏散指示燈（標(biāo)識(shí)）及應(yīng)急照明。 門(mén)：彩鋼板門(mén)框?yàn)槔滠埐垆摚饧愉X型材，配專(zhuān)用密封條，優(yōu)質(zhì)閉門(mén)器，設(shè)可視窗，門(mén)單向鎖定。 嚴(yán)格保證合理的氣流流程工藝，保證核酸擴(kuò)增后區(qū)的氣流不逆向流入核酸擴(kuò)增前區(qū)。 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測(cè)定（根據(jù)所使用的分析儀器的不同此區(qū)域與擴(kuò)增區(qū)可以合并為一個(gè)區(qū)），本區(qū)是主要擴(kuò)增產(chǎn)物污染來(lái)源，因此對(duì)本區(qū)域的壓力梯度要求相對(duì)于鄰近區(qū)域應(yīng)為負(fù)壓，以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)域擴(kuò)散至其他區(qū)域。同時(shí)要嚴(yán)格控制送排風(fēng)的比例，以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。3. PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)與裝修，各區(qū)域必須設(shè)置緩沖間，緩沖間宜設(shè)正壓，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空氣不流向室內(nèi)，以減少室內(nèi)外空氣交換。 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：核酸擴(kuò)增后產(chǎn)物的分析方法較多，如膜上或微孔板或芯片上探針雜交方法（放射性核素標(biāo)記或非放射性核素標(biāo)記）直接或酶切后瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳southern轉(zhuǎn)移、核酸測(cè)序方法、質(zhì)譜分析等。 實(shí)驗(yàn)前移入所需試劑、耗材、樣品以及盛放污染物的容器。物品的傳送是通過(guò)互鎖式傳遞窗傳遞。如需處理大分子的DNA 應(yīng)具有超聲波水浴儀。 標(biāo)本制備區(qū)：樣品登記、處理和分裝；核酸（RNA/DNA）提取、保存和使用；PCR擴(kuò)增的第一輪加樣。 PCR實(shí)驗(yàn)室根據(jù)使用儀器的功能合理設(shè)置各個(gè)區(qū)域，如采用聚合酶聯(lián)反應(yīng)：則設(shè)置試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域。 1. PCR實(shí)驗(yàn)室組合形式 PCR實(shí)驗(yàn)室可以是分散形式，也可以是組合形式，現(xiàn)在主要是以組合形式為主。陳洪柱參與校對(duì)。柏松楓、何興福、張璐、張偉卓、趙馨、趙儼、熊潔萌等編寫(xiě)。實(shí)驗(yàn)室的平面布局、空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)運(yùn)行、氣流控制等都是圍繞防止污染這個(gè)核心進(jìn)行設(shè)計(jì)和建設(shè)。核酸擴(kuò)增前區(qū)包括試劑準(zhǔn)備區(qū)和樣品處理區(qū)，設(shè)在不同房間或區(qū)域；核酸擴(kuò)增后區(qū)包括擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)，設(shè)在不同房間或區(qū)域。 PCR實(shí)驗(yàn)室各區(qū)域功能： 試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)：擴(kuò)增試劑的制備、試劑的分裝和擴(kuò)增反應(yīng)混合液的制備以及離心管、吸頭等消耗品的儲(chǔ)存和準(zhǔn)備。 標(biāo)本制備區(qū)28℃冰箱、20℃（或80℃）冰箱，生物安全柜、高速制冷離心機(jī)（臺(tái)式）、混勻器、恒溫水浴箱或加熱模塊、制冰器或制冷模塊、微量加樣器、消耗品（一次性手套、耐高壓處理的離心管和加樣吸頭）、專(zhuān)用工作服工作鞋（套）、上下水設(shè)備、專(zhuān)用辦公用品和廢棄物容器、紫外線(xiàn)殺菌燈。實(shí)驗(yàn)用品包括實(shí)驗(yàn)材料（試劑、樣品和擴(kuò)增產(chǎn)物）、實(shí)驗(yàn)器材（容器、板架、實(shí)驗(yàn)服裝、帽子、口罩、手套、鞋套）、辦公用品（記錄紙、筆）、以及清潔工具等。 不同工作區(qū)域使用不同工作服（例如不同顏色），工作人員離開(kāi)工作區(qū)域時(shí)，不得將工作服帶出。必須注意所有經(jīng)過(guò)檢測(cè)的反應(yīng)管不得在本區(qū)內(nèi)打開(kāi)。由于本區(qū)有可能會(huì)用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì)，如溴化乙錠、丙烯酰胺、甲醛或放射性核素等，故應(yīng)當(dāng)注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù)。 PCR實(shí)驗(yàn)室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉感染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。因此，本區(qū)壓力梯度要求為相對(duì)鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免氣溶膠從本區(qū)瀉出。 嚴(yán)格的氣流壓力控制，保證不同的實(shí)驗(yàn)區(qū)域內(nèi)不同的壓力梯度。地面材料與其他圍護(hù)結(jié)構(gòu)交界處應(yīng)安全平齊過(guò)渡，無(wú)縫隙和裂紋，地面鋪設(shè)前采用自流平處理，地面平整性好、易清潔、耐腐蝕。：燈具要選用凈化燈具，便于清洗不積塵。實(shí)驗(yàn)室照度滿(mǎn)足規(guī)范要求（最低照度為200lx），裝有紫外線(xiàn)燈，照射無(wú)死角。 實(shí)驗(yàn)室樣品處理區(qū)的面積應(yīng)大于其他區(qū)域，以便于生物安全柜的擺放，如采用實(shí)時(shí)熒光法，擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)合并一個(gè)區(qū)域，房間尺寸可適當(dāng)縮小，因全封閉熒光分析儀尺寸不大。 實(shí)驗(yàn)室微正壓是指相對(duì)于大氣壓的最小壓差不得低于10Pa，因在多風(fēng)季節(jié)大氣的最小正壓差往往能達(dá)到5Pa或5Pa以上。同時(shí)對(duì)室內(nèi)環(huán)境也有特定要求，需設(shè)置通風(fēng)系統(tǒng)，形成定向的氣流保護(hù)區(qū)，避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)之間的相互干擾。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的空氣流向可按照試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)進(jìn)行，防止擴(kuò)增產(chǎn)物順空氣氣流進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域。由于在樣本混合、核酸純化過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染，可通過(guò)在本區(qū)內(nèi)設(shè)立正壓條件，避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。 ，不得逆向流動(dòng)。 本區(qū)可部分或全部設(shè)為正