總rna的提取與電泳(更新版)
【正文】 一 . 實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵? 掌握 RNA制備以及常用鑒定方法的原理、操作步驟、注意事項(xiàng)和技術(shù)關(guān)鍵。 其原理是： 在解偶聯(lián)劑異硫氰酸胍作用下，蛋 白質(zhì)與 RNA解偶聯(lián)；利用蛋白質(zhì)為 酚 – 氯仿 – 異戊醇變性后可除去 ； 而 RNA不溶于 50%異丙醇析出得到分 離純化。在提取 RNA之前，必須對(duì)所用器皿進(jìn)行 RNase滅活處理。 RNA的提取與電泳 17 2022/8/22 注意： DEPC有致癌之嫌 ，必須小心操 作，防止接觸與吸入 ！ RNA的提取與電泳 18 2022/8/22 組織新鮮，否則液氮凍后 70176。 低溫：為防止 RNA降解操作在冰浴或低溫 中進(jìn)行。所用水以及相關(guān)的緩沖液也需要用? DEPC水處理。 紫外分光光度法分析所制備 RNA的濃度及純度 。 rRNA含量最豐富 ，由 2８ S、 18S、 5S幾類組成。 RNA的分離是研究基因功能的重要基礎(chǔ)之一，在分子生物學(xué)中占有重要的地位。 如此，總 RAN樣品便在統(tǒng)一構(gòu)象下在瓊脂糖凝膠上得到依賴于分子量的逐級(jí)分離條帶。 ? 所有器皿均需用含 DEPC蒸餾水處理后消毒，防止細(xì)菌 RNase 對(duì) RNA
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