【正文】 變的化學(xué)修飾 。 4．篩選產(chǎn)酶菌的方法主要包括以下 菌樣采集 。微量有鐵、錳、碘、鉬、銅、鋅。 繼代培養(yǎng) 由最初的外植體上切下的新增殖的組織，培養(yǎng)一代稱為 “第一代培養(yǎng) ”，連續(xù)多代的培養(yǎng)就稱為繼代培養(yǎng)?？上庖咴葱?。 A 要求有理化檢驗指標(biāo) B 生物活性指標(biāo) C 藥代動力學(xué)指標(biāo) D 理化指標(biāo)和生物活性指標(biāo)缺一不可 （ B ） A 低溫保存 B 低濃 度保存 C 在穩(wěn)定 pH條件下保存 D 加保護(hù)劑保存 （ A ）。 （ 4）可采用多種生物反應(yīng)器進(jìn)行在規(guī)模培養(yǎng)。 A 細(xì)胞融合法和微細(xì)胞介導(dǎo)法。 按我國和美國 FDA的規(guī)定，用于生產(chǎn)的工程細(xì)胞必須建立 和 工作細(xì)胞庫 兩個細(xì)胞庫。因此可通過控制最合適菌體濃度來控制需氧量。這樣變溫發(fā)酵所得產(chǎn)物的產(chǎn)量是比較理想的。 碳源是構(gòu)成微生物細(xì)胞和各種代謝產(chǎn)物碳架的營養(yǎng)物質(zhì)，同時碳源在微生物的代謝過程中被氧化、釋放出能量，并以 ATP的形式貯存于細(xì)胞內(nèi)，供給微生物生命活動所需的能量。 能對微生物進(jìn)行深層培養(yǎng)，可采用純種發(fā)酵，無菌操作技術(shù)成熟，生產(chǎn)規(guī)模巨大，生產(chǎn)過程能有效控制，相應(yīng)的采用較復(fù)雜的工藝和設(shè)備。 ,突變部位一般發(fā)生在 色體 ,因此突變后性狀能穩(wěn)定的遺傳 . 碳 水化合物 . ,過去是直接假如酸或堿來控制發(fā)酵液的 PH值 ,現(xiàn)在常用 選擇題 1. 傳統(tǒng)的微生物發(fā)酵工程不能生產(chǎn)下列哪個產(chǎn)品（ D） A 葡萄酒 B 乙醇 C 醬 D 青霉素 2. 發(fā)酵生產(chǎn)使用的菌種必須以休眠狀態(tài)保存，一般保存溫度范圍是（ A ） A 04℃ B 510℃ C 1015℃ D 1520℃ 3. 發(fā)酵一般在不銹鋼制的釜式反應(yīng)罐 B 510% C520% D1030% 4. 那種發(fā)酵方式可以為微生物提供較穩(wěn)定的生活環(huán)境（ C ） A 分批發(fā)酵 B 補料分批發(fā)酵 C 連續(xù)發(fā)酵 5. 發(fā)酵培養(yǎng)基中需要的氮源分為速效氮源和遲效氮源。較高的溫度有利于細(xì)菌的生長，提高 菌體的生物量。 2. 根據(jù)真核基因在原核細(xì)胞中表達(dá)的特點，表達(dá)載體必須具備那些條件？ 表達(dá)載體必須具備下列條件： （ 1）能夠獨立的復(fù)制； （ 2）具有靈活的克隆位點和方便的篩選標(biāo)記，以利于外源基因的克隆、鑒定和篩選； （ 3）應(yīng)具有很強的啟動子，能為大腸桿菌的 RAN聚合酶所識別； （ 4）應(yīng)具有阻遏子 （ 5）應(yīng)具有很強的終止子 （ 6）所產(chǎn)生的 mRNA必須具有翻譯的起始信號。 代謝副產(chǎn)物 。 （ 2）細(xì)胞工程和酶工程制藥 該技術(shù)的發(fā)展為現(xiàn)代制藥技術(shù)提供了更強大的技術(shù)手段，使人類可控制或干預(yù)生物體初次生代謝產(chǎn)物和生物轉(zhuǎn)化等過程，使動植物能更有效的滿足人類健康方面的需求。代表產(chǎn)品如酒、醋、乙醇，乳酸，檸檬酸等。 2. ：一是應(yīng) 用 DNA重組技術(shù)制造的肽、蛋白質(zhì)類治療劑 ；二是 基因藥物 ；三是來自動物植物和微生物的 天然生物藥物 ；四是 合成與部分合成的生物藥物； ，可分為三個不同的發(fā)展階段，技術(shù)階段 ； 近代生物技術(shù)階段 ； 現(xiàn)代生物技術(shù)階段 。 （ 3）現(xiàn)代生物技術(shù)階段的技術(shù)特征是 DNA重組技術(shù)。 反轉(zhuǎn)錄 聚合酶鏈反應(yīng)法 和合成法。 10. ，合成的 DNA 5’ 末端是 磷酸酯鍵， 3’ 末端是 OH 選擇題 凝膠過濾法是依賴（ A ）來分離蛋白組分。 10. 影響高密度發(fā)酵的因素有那些？ （ 1）培養(yǎng)基 為滿足菌體生長和外源蛋白表達(dá)的需求，常需投入幾倍于生物量的基質(zhì)，為了達(dá)到理想的效果，需要對培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)的配比進(jìn)行優(yōu)化。 ，一般優(yōu)良菌種的選育方法主要有 自然選育 、 誘變育種 和 原生質(zhì)體融合 。 簡答題 1. 發(fā)酵工程發(fā)展大體上可分為四個階段，簡述各階段的技術(shù)內(nèi)容，代表人物和主要產(chǎn)品 第一階段： 20世紀(jì)以前時期，人類利用傳統(tǒng)的微生物發(fā)酵技術(shù)來生產(chǎn)葡萄酒、酒、醋，醬、奶酪等 ，生產(chǎn)規(guī)模小，主要憑經(jīng)驗控制生產(chǎn)過程?，F(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展是人們加深了對微生物代謝產(chǎn)物合成的遺傳學(xué)與調(diào)節(jié)機制的了解，為更好的應(yīng)用提供了前提條件。 水是必需的物質(zhì)，它既是構(gòu)成菌體細(xì)胞的主要成分，又是營養(yǎng)物質(zhì)傳遞的介質(zhì)，對微生物的生長繁殖和產(chǎn)物合成有很重要的作用。對決大多數(shù)發(fā)酵來說，供氧不足會造成代謝異常，降低產(chǎn)物產(chǎn)量。 在了解發(fā)酵過程中的最適 PH的要求后，就要采取各種方法來控制。 選擇題 1．人胚成纖維細(xì)胞約可以培養(yǎng)（ C ）代。 分批式操作將細(xì)胞和培養(yǎng)基一次性加入反應(yīng)器細(xì)胞工程 組織培養(yǎng)： 將組織或細(xì)胞從機體取出，在體外模擬機體體內(nèi)的生理條件進(jìn)行培養(yǎng)，使之生存和生長。 2．單克隆抗體制備時對動物的免疫方法分為 體。 多克隆抗體 病原微生物含有多種抗原決定簇的抗原物質(zhì)，因此這些抗體制劑也是多種抗體的混合物，故稱多克隆抗體。 3．植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)物的生長主要取決于 生長素和 分裂素 的比例。 簡答 1． 影響植物次級代謝產(chǎn)物產(chǎn)生和累積的主要因素有哪些？ 影響次級代謝產(chǎn)物產(chǎn)生和累積的因素主要有： （ 1）、生物條件：外植體、季節(jié)、休眠、分化等； （ 2）、物理條件：溫度、光（光照時間、光強、光質(zhì)）、通氣（氧氣）、酸度和滲透壓； （ 3）、化學(xué)條件：無機鹽、碳源、物質(zhì)生長調(diào)節(jié)劑、維生素、氨基酸、核酸、抗生素、天然物質(zhì)和前體等； （ 4）、工業(yè)培養(yǎng)條件：培養(yǎng)罐類型、通氣、攪拌和培養(yǎng)方式。 （ 3）植物生長調(diào)節(jié)劑 常見的植物激素有生長素、分裂素、赤霉素、脫落酸、乙烯。 6．在固定化細(xì)胞中應(yīng)用最多，最有效的方法是 包埋法 。 酶化學(xué)修飾 通過主鏈有切割、剪切和側(cè)鏈基團(tuán)有化學(xué)修飾對酶蛋白進(jìn)行分子改造，以改變其理化性質(zhì)和生物活性。 A. 物理吸附法 B. 離子結(jié)合法 C. 共價結(jié)合法 D. 交聯(lián)法 7．核酶是具有催化活性的（ C ）。 缺點：結(jié)合力弱，對 pH、離子強度、溫度等因素敏感，酶易脫落。 4，為什么要對酶進(jìn)行化學(xué)修飾？ （ 1）提高生物活性； （ 2）增強在不良環(huán)境中的穩(wěn)定性； （ 3）針對異