【正文】 ，維持 22分鐘，以每分鐘 100℃ 速率升溫至 120℃ ，維持 10分鐘。 ％ 頭孢唑林鈉 比對(duì)樣品 （蘇州制藥） 均值： % (n=2) 均值： % (n=6) 177。 ? 因此本版藥典凝膠色譜高分子聚合物項(xiàng)下僅將色譜柱修訂為內(nèi)徑 ～ ,長(zhǎng)為 30～40cm的玻璃柱。 ? 擬采用直徑較細(xì)，內(nèi)徑為 1cm,長(zhǎng)為30cm的玻璃柱作為色譜柱。 ? 高分子聚合物 ? 高分子聚合物是 β 內(nèi)酰胺類抗生素臨床過敏反應(yīng)的一個(gè)主要因素，故在注射用原料及其制劑標(biāo)準(zhǔn)中增加檢查高分子聚合物，控制一定的限度，對(duì)臨床用藥安全有效具有重大的意義。以免基線噪音影響結(jié)果正確性。 表 頭孢菌素的有關(guān)物質(zhì)檢查 總數(shù) 有關(guān)物質(zhì) HPLC梯度洗脫 原料 27 27 12 制劑 42 36 17 ? 青霉素類、酶抑制劑、碳青霉烯類與單環(huán) β 內(nèi)酰胺類原料 22個(gè)品種均規(guī)定檢查有關(guān)物質(zhì)， ? 制劑 25個(gè)品種除 5個(gè)品種片，顆粒與干混懸劑等由于輔料干擾未規(guī)定檢查有關(guān)物質(zhì)外 , 其他品種均有有關(guān)物質(zhì)檢查。 ? 固體口服制劑一般用 HPLC或 HPLC與 TLC作為鑒別，二法并列。 ? 。 ? 另由于生產(chǎn)工藝的不同，各生產(chǎn)廠使用的有機(jī)溶媒也不同，同一品種中可能有幾十種的溶媒，為方便操作、經(jīng)試驗(yàn)在標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定各溶劑的相對(duì)調(diào)整保留時(shí)間（ RART），檢查時(shí)可先做供試品，從供試品中檢出的溶媒的 RART與規(guī)定的 RART比較，確定為何種溶媒時(shí)，再進(jìn)行對(duì)照品測(cè)定，可減少工作量，大大降低檢驗(yàn) 成本 ， 提高工作效率。并根據(jù)國(guó)內(nèi)產(chǎn)品實(shí)際情況，制定合理的限度。 ? 4. β 內(nèi)酰胺類抗生素的有關(guān)物質(zhì)檢查方法與國(guó)外藥典基本一致，在分離度試驗(yàn)中根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行修改，更有利方法的可操作性。 ? 在系統(tǒng)適用性試驗(yàn)中均規(guī)定了主峰與指定雜質(zhì)峰的分離度， ? 梯度洗脫時(shí)標(biāo)明主峰的保留時(shí)間，使方法的可操作性強(qiáng)，保證了結(jié)果的準(zhǔn)確性。 如 : 硫酸依替米星及制劑的有關(guān)物質(zhì) ,硫酸鹽及含量測(cè)定。有利于基層檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)的選擇。 ? 本版藥典使用 HPCE方法的品種有 2個(gè)，其中一個(gè)為鹽酸頭孢吡肟中 N甲基吡咯烷的含量測(cè)定。便于操作，保證了方法的有效性。 ? 本版藥典提出用 HPLC在主峰洗脫后梯度洗脫的方法，將 EP用 TLC、 HPLC兩種方法檢測(cè)的雜質(zhì)在同一 HPLC系統(tǒng)中檢測(cè) . ? 同時(shí)根據(jù)各雜質(zhì)最大吸收波長(zhǎng)的不同，用雙波長(zhǎng)檢測(cè)， ? 對(duì)照品外標(biāo)法與加校正因子與不加校正因子自身對(duì)照法同時(shí)并列。有利于同類品種間質(zhì)量的比較。使分析周期縮短至 4560分鐘，為原來周期的 1/3。 ? 內(nèi)酰胺類抗生素 本類抗生素包括：頭孢菌素類、青霉素類、酶抑制劑類、碳青霉烯類與單環(huán) β 內(nèi)酰胺類共 127個(gè)品種，占抗生素品種的 %。標(biāo)準(zhǔn)中大部分采用與標(biāo)準(zhǔn)管進(jìn)行比濁和比色的目測(cè)法。 總數(shù) 有關(guān)物質(zhì) HPLC梯度洗脫 原料 20 20 11 制劑 28 23 15 表 碳青霉烯類與單環(huán) β 內(nèi)酰胺類 有關(guān)物質(zhì)檢查 總數(shù) 有關(guān)物質(zhì) HPLC梯度洗脫 原料 2 2 1 制劑 2 2 1 表 青霉素類與酶 抑制劑 有關(guān)物質(zhì)檢查 ? 采用梯度洗脫時(shí)，由于不同色譜柱的行為略有差異，故在系統(tǒng)適用性試驗(yàn)中，應(yīng)規(guī)定主峰的出峰時(shí)間，主峰與已知雜質(zhì)的分離度等要求。 ? 有關(guān)物質(zhì)包括已知雜質(zhì)與未知雜質(zhì)，故在方法中可分別規(guī)定用雜質(zhì)對(duì)照品外標(biāo)法、加校正因子與不加校正因子的自身對(duì)照法計(jì)算。 表 凝膠色譜測(cè)定高分子聚合物 （ 200５年版已收載 21個(gè)品種 ） 原料 制劑 頭孢哌酮鈉 注射用頭孢哌酮鈉 頭孢唑林鈉 注射用頭孢唑林鈉 頭孢曲松鈉 注射用頭孢曲松鈉 頭孢噻肟鈉 注射用頭孢噻肟鈉 頭孢呋辛鈉 注射用頭孢呋辛鈉 頭孢他啶 注射用頭孢他啶 青霉素鈉 注射用青霉素鈉 青霉素 V鉀 青霉素 V鉀膠囊 阿莫西林 阿莫西林膠囊 頭孢拉定 表 . 凝膠色譜測(cè)定高分子聚合物 （ 2022年版新增 19個(gè)品種） 原料 制劑 頭孢唑肟鈉 注射用頭孢唑肟鈉 頭孢替唑鈉 注射用頭孢替唑鈉 頭孢尼西鈉 注射用頭孢尼西鈉 頭孢噻吩鈉 注射用頭孢噻吩 磺芐西林鈉 注射用磺芐西林鈉 阿洛西林鈉 注射用阿洛西林鈉 美洛西林鈉 注射用美洛西林鈉 氯唑西林鈉 注射用氯唑西林鈉 苯唑西林鈉 注射用苯唑西林鈉 普魯卡因青霉素 表 HPLC測(cè)定高分子聚合物 （ 2022年版新增 2個(gè)品種） 原料 制劑 頭孢地嗪鈉 注射用頭孢地嗪鈉 ? 國(guó)內(nèi)關(guān)于 β 內(nèi)酰胺類抗生素高分子雜質(zhì)的研究工作是于 70年代開始，經(jīng)歷了近 40年的研究，于 2022年版藥典在 4個(gè)品種 8個(gè)藥品標(biāo)準(zhǔn)中正式收載了高分子雜質(zhì)檢查。分析周期縮短至 4560分鐘，是原方法周期的 1/3。 % 頭孢唑林鈉 均值： F=*103 (n=11) 均值： F=*103 (n=33) 177。 ％ ? 應(yīng)用 HPCE測(cè)定鹽酸頭孢吡肟中 N甲基吡咯烷的含量，是本版藥典正文收載應(yīng)用HPCE的 2個(gè)品種之一。 ? 系統(tǒng)適用性溶液的制備 取丁酮和乙酸乙酯各適量，用內(nèi)標(biāo)溶液定量稀釋成每 1ml中約含丁酮和乙酸乙酯各 1mg的溶液，精密量取 ，置頂空瓶中，密封瓶口，作為系統(tǒng)適用性溶液。 ? 水分 ? 本類藥物原料藥均采用水分測(cè)定法第一法 A測(cè)定水分， ? 制劑中輔料對(duì)水分測(cè)定法有干擾時(shí)，則改為干燥失重。m以上的微粒不得過 6000粒，含 25181。 ? 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以 甲醇（ 19:1）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為 254nm。 ? 如： 氨曲南 ? 【 含量測(cè)定 】 照高效液相色譜法（附錄 Ⅴ D ）測(cè)定。 ? 十四元環(huán)有紅霉素及其衍生物，具有結(jié)構(gòu)相近 ,無紫外吸收 ,特征性反應(yīng)不明顯的特點(diǎn)，以紅霉素、琥乙紅霉素、克拉霉素、羅紅霉素為代表 . ? 十五元環(huán)有阿奇霉素； ? 十六元環(huán)有乙酰螺旋霉素、吉他霉素等， 收載情況 原料 制劑 總計(jì) 2022年版藥典收載品種 13 35 48 其中 新增品種 2 4 6 品種收載情況見表 表 2022年版藥典大環(huán)內(nèi)酯類品種收載情況 ? 新增品種： ? 原料： 制劑： ? 交沙霉素、 交沙霉素片、 ? 丙酸交沙霉素、 丙酸交沙霉素顆粒、 ? 麥白霉素膠囊。 同紅霉素 按紅霉素 C、紅霉素 A、雜質(zhì) 紅霉素 B、紅霉素烯醇醚峰的順序出峰（必要時(shí)，用紅霉素 C、紅霉素 B、紅霉素烯醇醚對(duì)照品進(jìn)行峰定位）。 。 品種 方法 乙酰螺旋霉素片 乙酰螺旋霉素膠囊 , 231nm , 對(duì)照法 吉他霉素片 , .檢測(cè)波長(zhǎng) 231nm , 身對(duì)照法 交沙霉素片 . .檢測(cè)波長(zhǎng) 231nm , 身對(duì)照法 麥白霉素片 , .檢測(cè)波長(zhǎng) 232nm , 對(duì)照法 麥白霉素膠囊 , 235nm , 對(duì)照法 胃蛋白酶為介質(zhì) 表 (1)溶出度測(cè)定 （ 溶出液 uv法測(cè)定） 表 (1)溶出度測(cè)定 （ 溶出液 硫酸溶液顯色 ,uv法測(cè)定） 品種 方法 紅霉素腸溶片 紅霉素腸溶膠囊 , （ 75→100 ）顯色， uv法檢測(cè)波長(zhǎng) 482nm 3. 自身對(duì)照法 羅紅霉素顆粒（包衣） , （ 75→100 ）顯色， uv法檢測(cè)波長(zhǎng) 482nm 3. 自身對(duì)照法 琥乙紅霉素片 琥乙紅霉素分散片 琥乙紅霉素膠囊 , （ 75→100 ）顯色， uv法檢測(cè)波長(zhǎng) 482nm 3. 自身對(duì)照法 依托紅霉素片 依托紅霉素膠囊 , （ 75→100 ）顯色， uv法檢測(cè)波長(zhǎng) 482nm 3. 自身對(duì)照法 克拉霉素顆粒 , （ 75→100 ）顯色， uv法檢測(cè)波長(zhǎng) 482nm 3. 自身對(duì)照法 品種 方法 阿奇霉素片 阿奇霉素分散片 阿奇霉素膠囊 , , 羅紅霉素片 羅紅霉素分散片 , , 羅紅霉素干混懸劑 , , , 羅紅霉素膠囊 , , , , 羅紅霉素顆粒（非包衣） , , , 克拉霉素片 , , , 克拉霉素膠囊 , , , 表 (2) 溶出度測(cè)定 (溶出液 HPLC法測(cè)定 ) ? 含量測(cè)定 ? 除個(gè)別品種（如克拉霉素、羅紅霉素、阿奇霉素）采用 HPLC法外，其他品種均采用微生物檢定法測(cè)定效價(jià)，見表 。 ? 以上（ 1）、（ 2）兩項(xiàng)可選做一項(xiàng)。（供注射用）。 ? ? 柱前衍生 HPLC方法首次應(yīng)用在中國(guó)藥典氨基糖苷類抗生素有關(guān)物質(zhì)檢查項(xiàng)中， ? 阿米卡星和硫酸阿米卡星 : ? 柱前衍生 HPLC法可以在同一色譜條件下同時(shí)檢出卡那霉素、雜質(zhì) B、雜質(zhì) A以及其它雜質(zhì)，并可參考 BP2022阿米卡星項(xiàng)下系統(tǒng)適用性色譜圖定位，且藥廠出口采用此法，對(duì)本法的可行性已有數(shù)據(jù)可證明。 表 含量測(cè)定 HPLC ELSD法 柱前衍生化 HPLCUV法 微生物檢定法 ( 管碟法 ) 微生物檢定法 (濁度法 ) 微生物檢定法 ( 管碟法 或 濁度法 ) 7 4 5 2 21 ? 四環(huán)素類抗生素 ? 四環(huán)類抗生素的基本特點(diǎn)， ? 結(jié)構(gòu)特點(diǎn) ? 四環(huán)素類抗生素為四駢苯或萘駢萘的衍生物， 是兩性化合物。在紫外光照射下具有強(qiáng)烈熒光。 色譜條件同修改后含量測(cè)定的色譜條件（見表）， ? 雜質(zhì)含量計(jì)算方法 ? 四環(huán)素已知雜質(zhì)含量用加校正因子的自身對(duì)照法計(jì)算， ? 米諾環(huán)素、土霉素、多西環(huán)素用已知雜質(zhì)對(duì)照品定位，用不加校正因子的自身對(duì)照法計(jì)算， ? 金霉素用雜質(zhì)對(duì)照品外標(biāo)法計(jì)算已知雜質(zhì)的