【正文】 時(shí) ， 也可每天光照 16小時(shí) ， 8小時(shí)黑暗 。 （ 3） 迅速將切割分離下的所需組織 、 細(xì)胞、 器官 ， 放入培養(yǎng)基上 ， 及時(shí)蓋上瓶蓋 。 （ 3）接種用工具（解剖刀、剪刀、鑷子）可放入 7075%酒精中，使用時(shí)需火焰灼燒滅菌，冷卻后使用。 ⑵ 采收 從生長(zhǎng)健壯的無(wú)病蟲(chóng)害的植株上選取發(fā)育正常的器官和組織 。 植株管理中應(yīng)注意： ⑴ 避免昆蟲(chóng)危害 許多昆蟲(chóng)如蚜蟲(chóng) 、 螨類(lèi)和飛虱是許多植物病蟲(chóng)害的傳播媒介 ， 會(huì)引起植物組織的潛在感染 。 一 、 植物材料的培養(yǎng)與取材 外植體 — 是指用于離體培養(yǎng)的活的植物組織、器官等材料，是植物離體培養(yǎng)的基礎(chǔ)材料。 取出培養(yǎng)基和器械冷卻 ， 貯存于 30℃ 以下室內(nèi) 。 液態(tài)培養(yǎng)基不使用凝固劑，但需要在容器中置入適當(dāng)?shù)闹挝?，試管為培養(yǎng)容器的支撐物可用濾紙橋，底面積較大的培養(yǎng)容器，支撐物可選用脫脂棉等。 向加熱容器中加入稱(chēng)量好的 瓊脂 （%） ， 攪拌加熱 ， 至完全溶化 。 有機(jī)化合物 維生素 、 肌醇 、 氨基酸等一起配成 100或 200倍液 ，也可分別配制 。 N6培養(yǎng)基為水稻等禾谷類(lèi)花藥培養(yǎng)設(shè)計(jì)，KNO3和（ NH4） 2SO4含量高 ,不含鉬。 繼代培養(yǎng)基 接種初代培養(yǎng)之后培養(yǎng)物的 培養(yǎng)基 。 ⑵活性炭 功能 常用的吸附劑，某些培養(yǎng)類(lèi)型中，可以吸附培養(yǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的一些有毒物質(zhì)（酚類(lèi)物質(zhì)），有利于培養(yǎng)物的生長(zhǎng)。 植株的形態(tài)建成是 CTK和 IAA的比值調(diào)控的 CTK/IAA高，誘導(dǎo)愈傷組織形成芽 CTK/IAA低，誘導(dǎo)愈傷組織形成根 煙草在不同細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素濃度下的生理效應(yīng) ⑶赤霉素類(lèi) 功能 促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng)生長(zhǎng)、誘導(dǎo)花芽形成、打破種子休眠以及誘導(dǎo)單性結(jié)實(shí)等。 ⑸ 氨基酸 蛋白質(zhì)的成分 ， 是有機(jī)氮化合物 ， 常用甘氨酸和多種氨基酸混合物如水解酪蛋白 、 水解乳蛋白 。 ⑴糖類(lèi) 功能 離體培養(yǎng)物生長(zhǎng)與發(fā)育不可缺少的有機(jī)成分，即作為碳源，又維持培養(yǎng)基的滲透壓在 。當(dāng)苗完全成活后，再移向大田。 將消毒后的外植體在無(wú)菌條件下切割成一定大小的小塊，或剝離出莖尖、挑出花藥，接種到啟動(dòng)培養(yǎng)基上。 具有植物組織培養(yǎng)基本操作程序的認(rèn)知。 （ 4）增殖培養(yǎng) 分化形成的芽、原球莖數(shù)量有限，采用適當(dāng)?shù)脑鲋撑囵B(yǎng)基經(jīng)反復(fù)多次切割轉(zhuǎn)接。 培養(yǎng)基是根據(jù)植物生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)成分 ， 配制成的供植物生長(zhǎng)的人工制作的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 。 ⑵ 維生素類(lèi) 功能 參與酶的形成 、 蛋白質(zhì) 、 脂肪代謝 ， 明顯的促進(jìn)離體培養(yǎng)物的生長(zhǎng) 。 液體培養(yǎng)中利于體細(xì)胞胚胎發(fā)生。 水 離體培養(yǎng)中，既是培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分的溶劑，又是培養(yǎng)基的重要組成部分，占培養(yǎng)基成分的 95%。 ⑶抗生素 培養(yǎng)基中添加抗生素可防止菌類(lèi)污染，常用的抗生素有青霉素、鏈霉素、慶大霉素等，用量一般為 5～ 20mg/L。 完全 培養(yǎng)基 包含使植物離體生長(zhǎng)全面營(yíng)養(yǎng)。 第二節(jié) 培養(yǎng)基的制備 制作一升培養(yǎng)基所需藥品 20多種 ， 為節(jié)省時(shí)間和配制的準(zhǔn)確 ， 需將各種藥品濃縮成一定倍數(shù) ， 并且混合成一定母液 ， 進(jìn)行保存 。 2,4－ D： 可用少量 ， 再緩緩加蒸餾水定容至需要的體積 。 蒸餾水 定容 至所需體積 。 滅菌鍋加水至淹沒(méi)電熱絲 。 滅菌完畢冷卻后取出器械貯存 。 已離體培養(yǎng)植株 多數(shù)情況下，應(yīng)盡量使用溫室或人工氣候室控制培養(yǎng)的植物材料作為外植體來(lái)源，減少培養(yǎng)過(guò)程中的微生物感染概率。 材料取材 ⑴ 材料選擇 培養(yǎng)材料應(yīng)選擇有代表性的主要植物 、 選擇性狀優(yōu)良的種質(zhì)或特殊的基因型 。如特別不潔的外植體，可先用加有洗滌劑的水清洗 1015分鐘，再用流水沖洗干凈。 表面滅菌劑種類(lèi)較多，可選取 12種使用。 第四節(jié) 外植體的培養(yǎng) 接種只是完成了離體培養(yǎng)的第一步 ， 植物離體培養(yǎng)和栽培植物一樣 ， 生長(zhǎng)過(guò)程中也受到各種環(huán)境因素的影響 。 2℃ 。 固體培養(yǎng)中 ， 如瓶塞不透氣 ， 培養(yǎng)物也不能生長(zhǎng) ， 要選擇通氣性好的培養(yǎng)瓶蓋 ， 增加可利用的氧氣 ， 迅速除去釋放出來(lái)的 CO2， 有利于外植體外層細(xì)胞開(kāi)始分裂 。 游離單細(xì)胞發(fā)生 。 污染途徑： 周?chē)h(huán)境不清潔 超凈工作臺(tái)過(guò)濾裝置失效 培養(yǎng)瓶的口徑過(guò)大 污染的預(yù)防措施 ⑴防止材料帶菌的措施 莖尖作外植體時(shí)，進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)（無(wú)糖）或暗培養(yǎng)。 褐變的原因 褐變是指外植體在培養(yǎng)過(guò)程中體內(nèi)的多酚氧化酶被激活，使細(xì)胞內(nèi)的酚類(lèi)物質(zhì)氧化成棕褐色的醌類(lèi)物質(zhì)，這種致死的褐變物向外擴(kuò)散致使培養(yǎng)基逐漸變成褐色，抑制其它酶的活性，影響外植體的分化，最后變褐死亡的現(xiàn)象。 ⑷加活性炭。 預(yù)防措施 ⑴控制無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分，降低氮（銨態(tài)氮）和氯。并且溫度一般控制在 25+2℃甚至更高。 三、試管苗的移栽 常規(guī)移栽法 將已誘導(dǎo)出大量根的試管苗，馴化 35天，移到無(wú)菌混合土中，當(dāng)長(zhǎng)出 23片新葉時(shí)，栽到田間或盆缽