【正文】 圖 :7：在 電位下，在 M 的 NaOH 中，連續(xù)加入 25 μM 酪氨酸 （ a） 在裸電極上和（ b）在納米 ZnOAg 修飾電極上的時(shí)間電流曲線 19 綜上所述，在后續(xù)試驗(yàn)中選擇 + 為最佳應(yīng)用電位。最佳修飾劑濃度為 . 21 圖 10：不同修飾劑濃度下，連續(xù)加入 10μM的酪氨酸到 M 的 NaOH 溶液中時(shí)，在修飾碳糊電極上得到的電流 時(shí)間曲線。如圖 9和 10. 制作過程：在不斷攪拌的 M的 NaOH中，不斷加入 酪氨酸 ，實(shí)驗(yàn)表明修飾電極的響應(yīng)快速，而且最大穩(wěn)態(tài)電流可以在 2s內(nèi)獲得。通過間歇性測(cè)定，我們研究了電極的長(zhǎng)期穩(wěn)定性，電極在不使用時(shí)，室溫儲(chǔ)存就可以了。 圖 12：在 電位下，納米 ZnOAg 修飾碳糊電極在含有不同濃度酪氨酸的NaOH 溶液中（ ） 的標(biāo)準(zhǔn)曲線。而且，由于修飾劑的表面積大并且在無酶條件下的進(jìn)行檢測(cè)，使得這個(gè)無酶酪氨酸傳感器有著長(zhǎng)期的穩(wěn)定性和高靈敏度。在這次畢設(shè)完成過程中，我要對(duì)很多人獻(xiàn)上我真摯的感謝，因?yàn)樵谒麄兊闹笇?dǎo)和幫助下，我才能順利地完成這次畢設(shè)實(shí)驗(yàn)。 最后我要感謝我的家人、朋友，是他們一直在我身邊支持我，鼓勵(lì)我，給我信心，給我堅(jiān)持下去的力量。她用她淵博的專業(yè)知識(shí)，為我解決了很多實(shí)驗(yàn)當(dāng)中的難題，讓我對(duì)這次畢設(shè)實(shí)驗(yàn)更加有信心，有決心。對(duì)于此方面的研究 ,國外已開展了近 20 年 ,并已有了較為成熟的科研技術(shù)成果 ,一些大公司已經(jīng)對(duì)一些較成熟的高聚物 /納米復(fù)合材料逐步商品化。使用標(biāo)準(zhǔn)加入法來定量測(cè)定左甲狀腺素鈉片樣品，表 3表 示該酪氨酸傳感器在實(shí)際樣品檢測(cè)中是有效果的。5%過氧化氫測(cè)定相對(duì)誤差時(shí)的外來物質(zhì)的最大濃度。插圖：低濃度下的響應(yīng)曲線的放大圖。根據(jù) 圖 10，我們可以看到，隨著 納米 ZnOAg濃度從 mg/mL到 mg/mL的增加，電流響應(yīng)很明顯地增大。從圖 9看出，在 NaOH濃度為 M時(shí)，電流的響應(yīng)最大。本實(shí)驗(yàn)研究了修飾電極在電位從 V到 V間的變化情況 ，如圖 8所示。最后，把修飾好的電極放到紅外燈下烤干。 (b) Ag/Zn0 16 為了能更清楚的表示出所得產(chǎn)物的成分 ,圖 5 給出了標(biāo)準(zhǔn)的 ZnO 和 Ag 納米線及所得 Ag/ZnO 核殼結(jié)構(gòu)的 XRD 圖。其次 ,將約 1 ml 預(yù)先制備好的銀納米線 (PVP濃度為 114mM, AgN03 濃度為 94mM, Naas’s 濃度為 2mM 下 ,在微波功率 400 W 下反應(yīng) 3min)乙醇溶液放入上述混合溶液中攪拌均勻。176。滴加完畢后溶液顏色呈現(xiàn)為黃色或白色 ,說明溶液中生成了 SAg2 膠體。 例如：圖 1為一標(biāo)準(zhǔn)的 CV圖，掃描電位由 →→ ， 電位由負(fù)→正：氧化電流；電位由正→負(fù)：還原電流。 11 2. 實(shí)驗(yàn)部分 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器 實(shí)驗(yàn)試劑： ；氟摻雜二氧化錫；六亞甲基四胺； 3AgNO （分析純%）； 23 )( NOZn （分析純 %） ； NaOH；石墨粉；石蠟油；酪氨酸；二次蒸餾水。用哪種方法是需要根據(jù)分析的靈敏度，干擾因素等多種指標(biāo)與實(shí)際需要而選擇的。對(duì)于酪氨酸的測(cè)定，有人采用了其他的方法，例如三波長(zhǎng)風(fēng)光光度法，雙波長(zhǎng)紫外吸收法等分光光度法。 化學(xué)法 甲醛滴定法 甲醛滴定法的基本原理是：在接近中性的水溶液中，酪氨酸與甲醛發(fā)生氧化反應(yīng)，生成亞甲基亞氨基衍生物，此生成產(chǎn)物用生物堿進(jìn)行滴定，就可以得到原樣品中酪氨酸的含量。納米羥基磷灰石 /殼聚糖復(fù)合材料課獲得良好的骨誘導(dǎo)性，匹配的降解速率，但仍存在羥基磷灰石與殼聚糖界面的結(jié)合不太理想，粒子分散不均勻、脆性大、力學(xué)性能差等問題。 納米敏感復(fù)合材料：納米材料由于具有大的比表面、高的表面活性、微小的粒徑、特殊的物理、化學(xué)性質(zhì)，因此可適用于各種微型的多功能傳感器。如劉衛(wèi)東等 [17]采用溶膠一凝膠法制備了 BTDA一 ODA聚酞亞胺 /Sio:雜化膜 ,結(jié)果表明 :雜化膜的介電常數(shù)和介電損耗隨 si仇粒子含量的增加而增大 ,隨電場(chǎng)頻率的升高而逐漸降低；隨著電氣技術(shù)的不斷發(fā)展，變頻 調(diào)速的電機(jī)在現(xiàn)代電器工業(yè)中得到了越來越廣泛的應(yīng)用，同時(shí)，也對(duì)其中的絕緣部分給予了更高的要求：絕緣不僅應(yīng)該具有良好的機(jī)械性能和耐熱性，而且還要求具有更好的耐電暈性能。有機(jī)材料有很好的韌性，而無機(jī)材料有很好的剛性，這樣有機(jī)材料和無機(jī)材料復(fù)合在一起，制成納米復(fù)合材料，就會(huì)使新材料同時(shí)擁有較好的韌性和剛性；并且可以使新材料有更高的強(qiáng)度、模量；良好的阻熱、氣密性等等。 5 對(duì)于 02復(fù)合體系納米薄膜，一般來說，可以通過兩種方法來制備。目前已有很多的研究人員進(jìn)行了與之相關(guān)的理論和實(shí)踐研究。將不同成分的納米顆粒進(jìn)行均勻或者不均勻的摻合，分散，可 以大大改善原有材料的性質(zhì)，使新材料同時(shí)擁有兩者或者更多的優(yōu)點(diǎn)，并且同時(shí)能夠克服原有的不足。本文主要的研究方向是其在生物傳感器領(lǐng)域的應(yīng)用。傳感器 對(duì)酪氨酸的氧化表現(xiàn)出了靈敏度高 （ μAmM1cm2),檢出限低 （ μM） 和線性范圍寬（線性范圍從 μM 到 mM） 等特點(diǎn)。這是首次利用以納米 ZnO 為基體合成納米復(fù)合材料來構(gòu)建非酶的酪氨酸傳感器。由于具有其獨(dú)特的結(jié)構(gòu)特征，例如納米晶粒，高濃度界面，因此而擁有的小尺寸效應(yīng)，量子 尺寸效應(yīng)，量子隧道效應(yīng)，表面界面效應(yīng)，使得納米材料表現(xiàn)出的一系列與常規(guī)材料有著本質(zhì)差異的理化及力學(xué)性能，因而得到了各個(gè)國家政府和科學(xué)研究人員們的廣泛關(guān)注，使得納米材料的研究成為目前材料科學(xué)研究的熱點(diǎn)，并取得了一定的成果 [13]。納米粒子區(qū)別于宏觀物體的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是，它表面積占很大比重，而表面原子既無長(zhǎng)程序又無短程序的非晶層，可以認(rèn)為納米粒子表面原子的狀態(tài)更接近氣態(tài)，而粒子內(nèi)部的原子可 能呈有序的排列。由于其對(duì)于材料表面的改性與防護(hù)，在光學(xué)，電學(xué)，催化學(xué)等各個(gè)方面都有著顯著的潛力和廣泛的應(yīng)用，已經(jīng)得到了全球各國的研究人員的親睞和大量的研究。下表，是目前主要的納米陶瓷的制備方法： （ 1）多相懸浮液分散混合法 如分散劑，使其具有良好懸浮液，采用4NHPMAA? 分散劑，制得 )(/32 nSiCOAl 納米復(fù)合陶瓷材料； （ 2）反應(yīng)燒結(jié)法 將納米粒子混合均勻并壓成胚，通過燒結(jié)使其起化學(xué)反應(yīng)形成滿意的復(fù)合材料； （ 3）液相分散包裹法 給納米粒子外包裹一層基質(zhì)組分的復(fù)合粉末，使粒子分散在基質(zhì)組分中，進(jìn)行膠凝，燒結(jié)制成； （ 4）復(fù)合粉體法 該法用炭黑和氣凝氧化硅起始原料，在高溫氮?dú)夥障逻M(jìn)行碳熱還原反應(yīng)生成四氧化三硅 /碳化硅復(fù)合體； （ 5）納米陶瓷及納米 納米復(fù)合陶瓷 納米顆粒在致密過程中的異常長(zhǎng)大一直是納米陶瓷及納米 納米復(fù)合陶瓷研究中的難點(diǎn)，有的研究人員采用熱等靜壓工藝，獲得了晶粒尺寸小于 100nm，結(jié)構(gòu)均勻，致密的單相碳化硅納米陶瓷和尺寸為50nm，致密均勻的四氧化三硅 /碳化硅復(fù)相納米陶瓷，單相碳化硅納米陶瓷晶界有一層非晶態(tài)，顯然，高的壓力導(dǎo)致了納米顆粒的長(zhǎng)大 納米顆粒增強(qiáng)復(fù)合材料的制備方法有非晶晶化法，機(jī)械合金化法 ，氣相沉積法，快速凝固法，非平衡合金固態(tài)分解法，溶膠 凝膠法，深度塑性變形法等。 各種制備 技術(shù)有各自的好處和缺陷，所以在選用制備方法的時(shí)候，多根據(jù)所需的原料的性質(zhì)，以及產(chǎn)物的一些基本性能來選取。此外，在功能陶瓷材料方面，自潔陶瓷（具有殺菌除臭功 能的納米復(fù)合多功能材料 ),滅菌保鮮功能的質(zhì)子能納米復(fù)合陶瓷材料等都顯示出納米顆粒的奇異功效。此外，它也可以作為有機(jī) 無機(jī)復(fù)合填料，應(yīng)用于磁性塑料和磁性橡膠領(lǐng)域 [15, 16]。 納米聚合物復(fù)合材料：將納米顆粒摻雜，分散入聚合物之中，可以使新材料在光、電、磁、醫(yī)學(xué)、軍事等各個(gè)方面發(fā)揮著獨(dú)特的性能。酪氨酸是芳香族氨基酸的一種，芳香族氨基酸的代謝情況在肝、腎、神經(jīng)精神疾病等疾病診斷中有重大意義，而且在多種疾病的診斷治療和病因?qū)W研究上十分關(guān)鍵因此定量分析血液中的芳香族氨基酸不僅在蛋白質(zhì)化學(xué)和 評(píng)價(jià)病人的營養(yǎng)狀況方面十分重要 ,。 9 分光光度法 分光光度法的原理：是基于物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收而建立起來的分析方法。分離之后可以通過紫外光熒光檢測(cè)。對(duì)于 酪氨酸而言，其擁有較好的電活性。 實(shí)驗(yàn)方法 循環(huán)伏安法 循環(huán)伏安法 (Cyclic Voltammetry)是一種常用的 電化學(xué) 研究方法。然后在磁力攪拌作用下加入一定圖 1 標(biāo)準(zhǔn)的 CV 圖，掃描電位： V→ V→ V 13 量 PVP溶解于 SN2 的 EG溶液中。所有的檢測(cè)峰都能與 Ag標(biāo)準(zhǔn) XRD圖譜 (JCPDS card )對(duì)應(yīng) ,而且看不到任何雜質(zhì)峰，這說明合成的 Ag納米線是一種高純度物質(zhì)。從圖 3(a)可以看出 ,Ag納米線尺寸均勻。當(dāng)加入 mg Ag 納米線 ,所得 Ag/ZnO 的形狀為蠕蟲狀 (見圖 4(b)),尺寸均勻 ,直徑大約為 200 nm600 nm,長(zhǎng)為幾微米。把上述電極放到一張表面光滑的稱量紙上磨，直到磨得光滑、平整，管口的另一端先用保鮮膜封口，在貼標(biāo)簽，放置 12h，這樣，裸碳糊電極就制備好了。 為了進(jìn)一步展示納米 ZnOAg良好的電催化性質(zhì)，我們還比較了裸碳糊電極和修飾碳糊電極對(duì) 25 μM 酪氨酸 的電流相應(yīng)情況，如圖 8所示。 優(yōu)化氫氧化鈉濃度 在檢測(cè) 酪氨酸 時(shí)，堿性介質(zhì)有助于加強(qiáng)過渡金屬的電催化 活性。最佳修飾劑濃度為 1mg/ml。線性電流響應(yīng)和 酪氨酸 濃度的關(guān)系方程式為： I（ μA） =+（ μM） ，相關(guān)系數(shù)為 。結(jié)果顯示，在 30天后的催化電流響應(yīng)維持在初始值的 %以上，著反映了修飾碳糊電極良好的穩(wěn)定性。 C（酪氨酸） /μ M 24 實(shí)際樣品分析 對(duì)于實(shí)際樣品的分析，本實(shí)驗(yàn)使用酪氨酸傳感器來檢測(cè)左甲狀腺素鈉片中酪氨酸的存在。實(shí)驗(yàn)所提到的合成方法和電化學(xué)傳感技術(shù)為檢測(cè)酪氨酸提供了一種新的方法和依據(jù)，而且還可以應(yīng)用到實(shí)際樣品中。 首先，我要感謝我的導(dǎo)師李麗老師。再次感謝所有幫助我、支持我的老師、同學(xué)、家人以及朋友們！ 。李老師作為一名老師，工作繁忙可想而知，但是她還是會(huì)在百忙之中抽空來給我講解一些我不懂得地方，還會(huì)指出我錯(cuò)誤的地方。在對(duì)高聚物 /納米復(fù)合材料的研究中存在的主要問題是 :高聚物與納米材Sample Detected (μM) Added (μM) Found (μM) Reco