【正文】 驗、腎小管微穿刺技術(shù)等探時藥物作用部位和功能。 一般認為大鼠血紅蛋白尿性 ARF模型二種機制均有，接近于人的創(chuàng)傷性 ARF，特別是積壓綜合征。 (3)犬夾閉腎動脈引起的 ARF模型：麻醉犬用外科手術(shù)暴露腎動脈夾閉 1h，引起的缺血性腎功能衰竭。泌尿系統(tǒng)與男性生殖系統(tǒng)藥效學研究的設計和方法 第一節(jié) 急性腎功能衰竭藥 一、試驗設計的醫(yī)學基礎 急性腎功能衰竭 (簡稱 ARF)是危急重癥，屬中醫(yī)“癃閉”、“關格”、“腎風”等范疇。 (4)汞劑引起的動物 ARF模型：以適當劑量的氯化汞靜脈注射家兔，皮下或靜脈給大鼠， l— 2日引起腎小管損傷，出現(xiàn)急性腎功能障礙的 — 系列變化。在此模型早期，腎血管阻力增加，腎血流量減少，腎皮質(zhì)區(qū)域的血管重度收縮，如所試藥物可能有類似于異博定的降低腎血管力、增加腎血流量等作用，采用此模型較適當。這研究對了解新藥特點很有意義。 1— 5日內(nèi)進行實驗。 (二 )犬去甲腎上腺素 ARF模型 l 原理 去甲腎上腺素引起腎血管收縮而致腎小球的血流減少，腎小球濾過減少；組織缺血、缺氧加重對腎組織損害從而產(chǎn)生 ARF。 (3)病理學檢查。 (四 )汞劑引起的動物 ARF模型 1．原理 一般認為是由于汞離子經(jīng)腎小球濾過后，被腎小管上皮細胞重吸收，并在細胞內(nèi)累積．與細胞膜和細胞內(nèi)巰基 (一 SH)和二硫基 (一 S一 S一 )等結(jié)合，影響酶活性。進行尿常規(guī)檢查。 3．評價指標 (1)尿量及尿常規(guī)檢查。 二、藥效學研究的實驗設計 (一 )對疾病動物模型的治療作用試驗 1．常用動物模型 (1)大鼠腺嘌呤 CRF模型：大鼠經(jīng)含 0． 5％～ 0. 75％腺嘌吟 (adenine)飼料喂養(yǎng)引起的。目前已從 CRF患者中分離出約 200種蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)物，其中 100多種物質(zhì)成分比止常值高，這些毒素物質(zhì)分為小分子 (相對分子質(zhì)量小于 500)，如肌酐、尿素氮、胍類和胺類；中分子 (相對分子質(zhì)量為 500— 5000)；大分子 (相對分子質(zhì)量大 5000)，如旁腺索、生長激素等。 三、動物模型建立方法 (一 )大鼠腺嘌呤 CRF模型 1. 原理 高濃度腺嘌吟通過黃嘌呤氧化酶的作用生成極難溶于水的 2， 8— 二羥腺嘌吟，后者沉積在腎小管，影響了氮質(zhì)化合物的排世，導致氮質(zhì)血癥、毒素蓄積從電解質(zhì)和氨基酸代謝紊亂，最終引起腎功能衰竭。 (4)腎臟病理形態(tài)學觀察：肉眼及組織學觀察，有條件時可作病理切片的圖像分析。可見殘余腎臟代償性增大，鏡檢可見腎小球毛細管擴張，內(nèi)皮細胞肥大，系膜基質(zhì)增生，大鼠上皮內(nèi)皮細胞壞死，毛細管腔消失的腎小球玻璃樣變性從硬化的病理過程。 2 操作方法 實驗用成年健康大鼠，雄性，體重 200— 300g，注射戊巴比妥鈉 40mg／ kg(體重 )麻醉，常規(guī)消毒皮膚，背部一側(cè)切口，分離肌層，暴露左腎，用食指從腹部相應部位輕輕向上頂起，腎臟即滑出皮膚切口外面，這樣便操作，然后剝離筋膜。將經(jīng)燒灼的腎臟放回，縫合肌層與皮膚．操作全過程不超過 l0min。治療慢性腎炎的中藥，應有①治本作用，去外、內(nèi)致病因子的繼續(xù)作用。 (二 )陽性對照藥 藥典或中成藥中用治療慢性腎炎的新藥，均可用作對照藥。于末次注射后 2星期，采羊血分離血清；加入生理鹽水洗漂 3次的等量兔紅細胞，混勻， 過夜充分吸附，離心棄除血細胞。 (二 )大鼠 Heymann腎小球腎炎模型 1．原理 本方法用大白鼠腎組織，注射給同種大鼠，經(jīng)過一段時間，受試動物產(chǎn)生抗原 — 抗體復合物，沉淀于腎小球血管壁而形成腎小球腎炎。臨床表現(xiàn)為：尿頻、尿急、排尿不暢、夜尿增多等。 2．觀察指標 (1)前列腺指數(shù) [前列腺重 mg／ g(體重 )]。激素法前列腺肥大模型方法簡便迅速，適宜藥物篩選，但與人類疾病的相關性較?。焕夏昵傲邢僭錾c人類發(fā)病機制相似，是公認的研究人類前列腺增生的合適動物模型，但來源較少，難于廣泛用作藥物篩選；胚胎尿生殖竇植入法小鼠前列腺肥大模型上需外源性激素，可在短期內(nèi)產(chǎn)生預期的增生，不干擾前列腺肥大藥物檢測，動物操作容易，一般認為此模型可用于探索人類前列腺肥大的疾病過程。 3．造模成功指標與藥物療效觀察 鏡檢前列腺，與空白對照組比較增生程度，或取前列腺稱重計算前列腺指數(shù)以及測前列腺中 DNA含量與空白對照組比較，藥效可根據(jù)前列腺鏡檢、前列腺指數(shù)、 DNA含量、磷酸酶含量來評價。 (三 )小鼠尿生殖竇植入法模型 1．原理 胚胎與成年前列腺細胞相互作用，誘導成年前列腺細胞增小(可能是由于成年前列腺胚胎生長能力的重新恢復 )。前列腺炎多由大腸桿菌，金黃色葡萄球菌感染所致。 (2)前列腺液檢查：檢查其細胞數(shù)。 三、動物模型的建立方法 (一 )非菌性前列腺炎的模型的建立 1．原理 注入角叉菜膠生理鹽水．能引起前列腺液檢驗指標的顯著改變，而注入等量滅菌生理鹽水則不能引起顯著改變。 (三 )大鼠實驗性細菌前列腺炎病理模型建立 1．原理 由大腸桿菌感染引起前列腺液中白細胞提高及卵磷質(zhì)小體密度減少，引起前列腺形態(tài)的炎性病變。 3．造模成功的指標 鏡檢前列腺液中卵磷質(zhì)小體密度減少，白細胞數(shù)增加，前列腺標本病理形態(tài)學檢查診斷為前列腺炎模型。 3．造模成功指標 前列腺液中白細胞數(shù)增加，卵磷質(zhì)小體密度減少，前列腺液細菌培養(yǎng)陰性，腺體標本病理形態(tài)學檢查診斷為病變前列腺炎。 (3)卵磷質(zhì)小體密度 (前列腺液中 )。主要由炎細胞浸潤腺腔梗阻，間質(zhì)纖維化產(chǎn)生，治療以清熱解毒，活血祛瘀、利水通淋。 3．造模成功的指標和藥物療效觀察指標 同激素法模型。 (二 )老年犬前列腺增生模型 1．原理 犬的前列腺增生與人發(fā)病機制相似。本癥?？诜o藥．應注意劑量的合理性。前列腺肥大者腺體直徑增大。中醫(yī)認為