3第3章免疫原和抗血清的制備多媒體(完整版)
【正文】 CSF）具有佐劑作用。 ? 結(jié)合法的步驟是先活化支持物上的功能集團(tuán)，抗原抗體連接到這些活化的集團(tuán)上 。 ? 具有離子交換集團(tuán)的交聯(lián)葡萄糖、瓊脂糖和聚丙烯酰胺。 選擇沉淀法 ? 鹽析沉淀法 經(jīng)典的蛋白質(zhì)純化分離技術(shù) 抗原的初篩：用不同飽和度的硫酸鈉或硫酸銨使蛋白抗原進(jìn)行初篩。 自溶法：利用組織和微生物的自身酶系統(tǒng)，在一定 PH和溫度下，使其細(xì)胞裂解。 二、可溶性抗原的制備和純化 組織細(xì)胞抗原的制備： 高速搗碎法－組織搗碎機(jī)搗碎 研磨法－用玻璃勻漿器或乳缽研磨 （一） 二、可溶性抗原的制備和純化 ? 高速組織搗碎機(jī)法： ? 將組織加鹽水裝入搗碎機(jī)筒內(nèi)，間斷進(jìn)行離心，每次 30到 6 0分鐘，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)熱。 ? 掌握：抗血清的鑒定方法、抗血清的純化方法 第一節(jié) 免疫原的制備 免疫原 (immunogen)是能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗體或致敏淋巴細(xì)胞，并能在體內(nèi)外與抗體或致敏淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性反應(yīng)的物質(zhì)。 ? 顆?？乖蠖嘤?靜脈內(nèi)注射 免疫法，較少加佐劑作皮內(nèi)注射。 二、可溶性抗原的制備和純化 組織細(xì)胞或培養(yǎng)細(xì)胞可溶性抗原的制備： 反復(fù)凍融法－ 20℃ 凍結(jié)，然后室溫融化 超聲破碎法－超聲波（ 1～ 20kHz） 自溶法－自身酶系 酶處理法－溶菌酶、纖維素酶、蝸牛酶 表面活性劑處理法－ SDS、去氧膽酸鈉、二乙基十六烷基溴 ? 反復(fù)冷凍法：將細(xì)胞或整塊組織置 20℃冰箱內(nèi)凍結(jié)，然后置室溫融化，如此反復(fù)兩次，大部分組織細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)的顆?？蓛鋈谄扑?。（梯度柱）。 ? 通過(guò)凝膠分子篩作用，大、中、 小三類(lèi)分子彼此較易分開(kāi)。 親和層析法： 利用生物大分子之間具有的專(zhuān)一性親和力 (1)親和層析支持物的選擇： ①非特異性吸附低； ②液體流速快； ③在各種 pH和高濃度鹽溶液中穩(wěn)定； ④有合適豐富的化學(xué)基團(tuán)，與蛋白質(zhì)或其它化合物結(jié) 合； ⑤有豐富的微孔，以增加結(jié)合容量。 （三）純化抗原的鑒定 蛋白含量測(cè)定： 紫外吸收法、雙縮脲法、酚試劑法 分子量測(cè)定： SDSPAGE、凝膠過(guò)濾 純度鑒定： 醋酸纖維膜電泳、 SDSPAGE、毛細(xì)管電泳、等電聚焦、高效液相層析 免疫活性鑒定： 雙向免疫擴(kuò)散、免疫電泳、 ELISA ? 制備人工抗原時(shí)，最常用于偶聯(lián)半抗原的載體是 ? A 牛血清白蛋白 B牛甲狀腺球球蛋白 ? C 人血清白蛋白 D 人甲狀腺球蛋白 ? E 兔血清白蛋白 第二節(jié) 免疫佐劑 免疫佐劑 ： 那些與抗原一起或先于抗原注入機(jī)體后，可增強(qiáng)機(jī)體對(duì)該抗原的免疫應(yīng)答或改變免疫應(yīng)答的類(lèi)型的物質(zhì)稱(chēng)為免疫佐劑 ,簡(jiǎn)稱(chēng)佐劑 . 非免疫原性的佐劑 :氫氧化鋁、磷酸鋁、磷酸鈣、石蠟油、羊毛脂、表面活性劑、藻酸鈣、人工合成的多聚肌苷酸和胞壁肽。 二、佐劑的免疫生物學(xué)作用 改變抗原物理性狀，延緩其降解和排除，更有效刺激免疫系統(tǒng)。純化目的是除去這些不相關(guān)成分，防止抗血清中其他雜抗體干擾試驗(yàn)結(jié)果。在含有多種抗原表位的抗原刺激下，體內(nèi)多個(gè) B細(xì)胞克隆被激活并產(chǎn)生針對(duì)多種不同表位的抗體，其混合物為多克隆抗體。 2023年 2月 5日星期日 上午 5時(shí) 5分 1秒 05:05: ? 1比不了得就不比，得不到的就不要。 05:05:0105:05:0105:05Sunday, February 5, 2023 ? 1不知香積寺，數(shù)里入云峰。 05:05:0105:05:0105:052/5/2023 5:05:01 AM ? 1越是沒(méi)有本領(lǐng)的就越加自命不凡。 上午 5時(shí) 5分 1秒 上午 5時(shí) 5分 05:05: MOMODA POWERPOINT Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Fusce id urna blandit, eleifend nulla ac, fringilla purus. Nulla iaculis tempor felis ut cursus. 感謝您的下載觀看 專(zhuān)家告訴 。 05:05
環(huán)評(píng)公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1