3第3章免疫原和抗血清的制備多媒體(完整版)
【正文】 CSF）具有佐劑作用。 ? 結合法的步驟是先活化支持物上的功能集團，抗原抗體連接到這些活化的集團上 。 ? 具有離子交換集團的交聯(lián)葡萄糖、瓊脂糖和聚丙烯酰胺。 選擇沉淀法 ? 鹽析沉淀法 經(jīng)典的蛋白質純化分離技術 抗原的初篩：用不同飽和度的硫酸鈉或硫酸銨使蛋白抗原進行初篩。 自溶法：利用組織和微生物的自身酶系統(tǒng)，在一定 PH和溫度下，使其細胞裂解。 二、可溶性抗原的制備和純化 組織細胞抗原的制備： 高速搗碎法－組織搗碎機搗碎 研磨法－用玻璃勻漿器或乳缽研磨 （一） 二、可溶性抗原的制備和純化 ? 高速組織搗碎機法： ? 將組織加鹽水裝入搗碎機筒內(nèi)，間斷進行離心，每次 30到 6 0分鐘，時間過長會導致產(chǎn)熱。 ? 掌握：抗血清的鑒定方法、抗血清的純化方法 第一節(jié) 免疫原的制備 免疫原 (immunogen)是能誘導機體產(chǎn)生抗體或致敏淋巴細胞，并能在體內(nèi)外與抗體或致敏淋巴細胞發(fā)生特異性反應的物質。 ? 顆?？乖蠖嘤?靜脈內(nèi)注射 免疫法，較少加佐劑作皮內(nèi)注射。 二、可溶性抗原的制備和純化 組織細胞或培養(yǎng)細胞可溶性抗原的制備： 反復凍融法－ 20℃ 凍結，然后室溫融化 超聲破碎法－超聲波（ 1～ 20kHz） 自溶法－自身酶系 酶處理法－溶菌酶、纖維素酶、蝸牛酶 表面活性劑處理法－ SDS、去氧膽酸鈉、二乙基十六烷基溴 ? 反復冷凍法：將細胞或整塊組織置 20℃冰箱內(nèi)凍結，然后置室溫融化，如此反復兩次，大部分組織細胞及細胞內(nèi)的顆?？蓛鋈谄扑?。（梯度柱）。 ? 通過凝膠分子篩作用，大、中、 小三類分子彼此較易分開。 親和層析法： 利用生物大分子之間具有的專一性親和力 (1)親和層析支持物的選擇： ①非特異性吸附低； ②液體流速快； ③在各種 pH和高濃度鹽溶液中穩(wěn)定； ④有合適豐富的化學基團，與蛋白質或其它化合物結 合； ⑤有豐富的微孔，以增加結合容量。 （三）純化抗原的鑒定 蛋白含量測定： 紫外吸收法、雙縮脲法、酚試劑法 分子量測定： SDSPAGE、凝膠過濾 純度鑒定： 醋酸纖維膜電泳、 SDSPAGE、毛細管電泳、等電聚焦、高效液相層析 免疫活性鑒定： 雙向免疫擴散、免疫電泳、 ELISA ? 制備人工抗原時，最常用于偶聯(lián)半抗原的載體是 ? A 牛血清白蛋白 B牛甲狀腺球球蛋白 ? C 人血清白蛋白 D 人甲狀腺球蛋白 ? E 兔血清白蛋白 第二節(jié) 免疫佐劑 免疫佐劑 ： 那些與抗原一起或先于抗原注入機體后，可增強機體對該抗原的免疫應答或改變免疫應答的類型的物質稱為免疫佐劑 ,簡稱佐劑 . 非免疫原性的佐劑 :氫氧化鋁、磷酸鋁、磷酸鈣、石蠟油、羊毛脂、表面活性劑、藻酸鈣、人工合成的多聚肌苷酸和胞壁肽。 二、佐劑的免疫生物學作用 改變抗原物理性狀，延緩其降解和排除，更有效刺激免疫系統(tǒng)。純化目的是除去這些不相關成分，防止抗血清中其他雜抗體干擾試驗結果。在含有多種抗原表位的抗原刺激下，體內(nèi)多個 B細胞克隆被激活并產(chǎn)生針對多種不同表位的抗體，其混合物為多克隆抗體。 2023年 2月 5日星期日 上午 5時 5分 1秒 05:05: ? 1比不了得就不比，得不到的就不要。 05:05:0105:05:0105:05Sunday, February 5, 2023 ? 1不知香積寺，數(shù)里入云峰。 05:05:0105:05:0105:052/5/2023 5:05:01 AM ? 1越是沒有本領的就越加自命不凡。 上午 5時 5分 1秒 上午 5時 5分 05:05: MOMODA POWERPOINT Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Fusce id urna blandit, eleifend nulla ac, fringilla purus. Nulla iaculis tempor felis ut cursus. 感謝您的下載觀看 專家告訴 。 05:05
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