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現(xiàn)代生物技術(shù)5(完整版)

2025-01-29 02:08上一頁面

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【正文】 內(nèi)溶液滲透壓急劇升高,造成蛋白質(zhì)變性,導(dǎo)致死胎 ?常規(guī)慢速冷凍法、玻璃化冷凍保持 ?受精卵移植 ?一般供體為良種或優(yōu)良個體,而受體為生產(chǎn)性能較差的個體或品種。若分割時不能將內(nèi)細(xì)胞團均等分割,會出現(xiàn)含內(nèi)細(xì)胞團多的部分正常發(fā)育的能力強,少的部分發(fā)育受阻或發(fā)育不良,甚至不能發(fā)育等問題 ②胚胎分割技術(shù)也是動物克隆的方法之一 ③胚胎分割的份數(shù)越多,操作的難度會越大,移植的成功率也越低 ? 早期胚胎的體積很小,只有在顯微鏡下才能看到 ? 細(xì)胞數(shù)目是有限的:分割的份數(shù)越多,不但難以做到均等分割,每一份的細(xì)胞數(shù)會越少,作為囊胚期的胚胎內(nèi)細(xì)胞團細(xì)胞所受的影響會更大 ? 分割的份數(shù)越多,技術(shù)的難度會越大,移植后的恢復(fù)和發(fā)育的難度會越大,移植成功率自然會降低 ④透明帶對于分割胚體內(nèi)外發(fā)育的影響 ?透明帶作用:阻止異種動物精子受精和同種動物動物的多精子受精,保護受精卵在輸卵管和子宮內(nèi)正常運行,防止輸卵管和子宮液的傷害及白細(xì)胞的吞噬,并使分裂階段的卵裂球相互靠近,不致分離 ?胚胎分割時所處的發(fā)育階段,對透明帶的依賴性越強 ⑤ 冷凍胚胎的影響 ?分割過程引起的透明帶損傷和胚胎細(xì)胞數(shù)量減少,經(jīng)冷凍和解凍在體內(nèi)和體外的發(fā)育能力進一步降低,其移植妊娠率低于完整的冷凍胚胎 三、胚胎嵌合體 ?由兩個或兩個以上具有不同遺傳性狀的細(xì)胞或細(xì)胞系組成的聚合胚發(fā)育而成的個體 ?原發(fā)性嵌合體 ?次生型嵌合體 方法 ?囊胚注入法 ? 在動物胚胎發(fā)育到囊胚時,將目的細(xì)胞或細(xì)胞團注入囊胚腔,使之與內(nèi)細(xì)胞團結(jié)合并發(fā)育,最終得到嵌合體個體 ?聚合法 ? 全胚聚合法 ?將發(fā)育到一定時期的胚胎,去掉透明帶后,將兩個或兩個以上的胚胎聚合在一起,形成一個胚胎后放入二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至囊胚,再植入受體動物體子宮內(nèi) ? 卵裂球聚合法 ?去掉透明帶后將胚胎打散,從雙方胚胎卵裂球中各取出一部分細(xì)胞進行聚合,培養(yǎng)后移植 影響因素 ?胚胎的質(zhì)量與狀態(tài) ? A級和 B級胚胎 ?胚胎的發(fā)育時期 ? 多采用 8細(xì)胞早期胚胎聚合 四、胚胎細(xì)胞核移植 ?將未著床的早期胚胎分散成單個的細(xì)胞,用電融合方法,使單個細(xì)胞與去除細(xì)胞核的未受精的成熟的卵母細(xì)胞融合,體外培養(yǎng)發(fā)育成胚胎后,移入受體妊娠產(chǎn)子 ?已在小鼠、兔、山羊、牛、猴等動物上成功 五、性別控制與胚胎性別鑒定 ?動物的性別控制 (sex control)技術(shù)是通過對動物的正常生殖過程進行人為干預(yù),使成年雌性動物產(chǎn)出人們期望性別后代的一門生物技術(shù) ? X、 Y精子分離技術(shù):流式細(xì)胞儀 ?胚胎性別診斷 早期胚胎的性別鑒定 1)、核型分析:分析部分胚胎細(xì)胞的染色體的組成 2) 、 SRY片段 的 PCR擴增 Y染色體上的特異片段 3)、 HY抗原:雄性特異性弱組織相容性 Y抗原 ?只有 Y 精子才能表達(dá) HY抗原 ?利用 HY 抗體檢測精子質(zhì)膜上存在的 HY抗原,再通過一定的分離程序,就能將精子分離成 HY+(Y精子 )和 HY(X精子 )兩類,將所需性別的精子進行人工受精,即可獲得預(yù)期性別的后代 ?測定胚胎上 HY抗原的存在與否對胚胎的性別作出鑒定 意義 ? 通過控制后代的性別比例,可充分發(fā)揮受性別限制的生產(chǎn)性狀 (如泌乳 )和受性別影響的生產(chǎn)性狀 (如生長速度、肉質(zhì)等 )的最大經(jīng)濟效益 ? 控制后代的性別比例可增加選種強度,加快育種進程 ? 控制胚胎性別還可克服牛胚胎移植中出現(xiàn)的異性孿生不育現(xiàn)象,排除伴性有害基因的危害 六、早期胚胎培養(yǎng) ?發(fā)育阻斷:早期胚胎停頓在某個特定發(fā)育
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