lcms基礎(chǔ)ppt課件(完整版)
【正文】 靶子反應(yīng)氣體，發(fā)生離子 — 分子碰撞反應(yīng)，從而 產(chǎn)生‘子離子’，再經(jīng) MS2的分析器及接受器得到子 離子質(zhì)譜，稱做 CID (collisioninduced dissociation)譜 碰撞氣體： N He、 Ar、 Xe、 CH4等 目的：裂解某一或某些特定的分子離子，給出其碎 片離子從而獲得針對這一分子離子的結(jié)構(gòu)信息 Page ? 27 掃描類型和掃描方式 ? 掃描類型： 全掃描（ full scan） 提供樣品中每個分析物的全部質(zhì)譜 選擇離子監(jiān)測（ SIM） 用于痕量分析，專屬性遠高于 SIM 掃描方式： 子離子掃描（ product ion scan） 母離子掃描（ precursor ion scan） 中性丟失掃描（ neutral loss scan） Page ? 28 LCMS 分析條件的選擇和優(yōu)化 、負離子模式的選擇 LCMS 分析 條件的選擇 和優(yōu)化 Page ? 29 LCMS 分析條件的選擇和優(yōu)化 ? ： ESI 適合于中等極性到強極性的化合物分子，特別是那 些在溶液中能預(yù)先形成離子的化合物和可以獲得多個質(zhì)子的大分子 （如蛋白質(zhì)） APCI 不適合可帶多個電荷的大分子，其優(yōu)勢在于弱極 性或中等極性的小分子的分析。 含三氟乙酸 ≤％。 操作中溫度的選擇和優(yōu)化主要是指接口的干燥氣體而言， 一般情況下 選擇干燥氣溫度高于分析物的沸點 20℃ 左右即可。 ? 用大氣壓電離質(zhì)譜儀可以得到分子量信息 Page ? 34 三 LCMS技術(shù)在藥物分析中的應(yīng)用 ? 藥物代謝研究 ? 天然產(chǎn)物天然藥物的研究 ? 中草藥成分分析， ? 中藥指紋圖譜研究 ? 體內(nèi)藥代動力學(xué)研究 ? 藥物篩選研究 Page ? 35 藥物代謝研究 ? 藥物代謝與藥物動力學(xué)研究技術(shù)上的最新重大進展是 LCMSMS 的使用，電噴霧 （ ESI）和大氣壓化學(xué)電離（ APCI）以及大氣壓光電離（ APPI）是其主要的離子源，由于具有高靈敏度（ ng/ml~pg/ml），高選擇性（檢測特定的碎片離子）、高效率（每天可檢測幾百個生物樣品和對藥物結(jié)構(gòu)的廣泛適用性，對液態(tài)樣品和混合樣品的分離能力高，可通過二級離子碎片尋找原型藥物并推導(dǎo)其結(jié)構(gòu)， LCESIMSMS 已廣泛地應(yīng)用于藥物代謝研究中一期生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)和二期結(jié)合反應(yīng)產(chǎn)物的鑒定、復(fù)雜生物樣品的自動化分析以及代謝物結(jié)構(gòu)闡述等，已在世界上大型制藥企業(yè)中 取代 HPLC而占據(jù)了主導(dǎo)地位，其測試的樣品量占總量的 70%以上。目前可進行新生兒遺傳疾病篩選（ PKU、 MCAD 等四十種左右）、新生兒性激素變異的檢測、男女激素的監(jiān)測、老年 癡呆癥的早期診斷、抗排異藥物的檢測、磷酸脂的檢測、血紅蛋白變 異檢測、糖化血紅蛋白（糖尿病早期檢測）、某些心臟病、癌癥疾病 篩查如乳腺癌等等（ Biomarker 法、通過鑒定 DNA 損傷程度測定）、 藥物劑量監(jiān)測、藥物相互作用監(jiān)測、地區(qū)性突發(fā)性中毒病人的毒物檢 測等。 直接進樣實驗。 ? 注意： 1 如買來的是已經(jīng)衍生化的標準品，則可四種混配。 ? 第六步：用空白提取液配制同樣濃度標樣，按上一步方法進樣，觀察 色譜峰形及保留時間是否合適，峰高有無變化，有無離子抑制現(xiàn)象，否則調(diào)節(jié)流動相，優(yōu)化色譜條件。 ? 第九步：按上述方法采集數(shù)據(jù)，做標準曲線 ,并進行硝基呋喃代謝物 樣品的測定。下圖是一個用戶的混 標，只看到 335 和 209。再以相同的實驗條件對標準品進行測定，做出其一級、二級質(zhì)譜圖。 美國食品與藥品管理局 (FDA)、歐盟、日本、韓國等主要貿(mào)易國和地區(qū)公布了在進口動物源 性食品中禁止使用的藥物名單，提高了最高限量標準。一條途徑是從單一植物中提取一種有效成分 (單體化合物 )或提取物開發(fā)成新藥。 選用干燥氣溫度和流量大小時還要考慮流動相的組成， 有機溶劑比例 高時可采用適當?shù)偷臏囟群土髁啃∫稽c的。含醋酸銨＜ 10 一 5 mmol/l。樣 品中含有仲氨或叔氨時可優(yōu)先考慮使用正離子模式。 給定電壓條件下 ， 只有沒 m/z在某范圍的離子沿間軸線做有限振幅的穩(wěn)定的振蕩運動 ? LCMS (四極桿 )聯(lián)用儀器結(jié)構(gòu)示意圖 Page ? 21 ? 特定 m/z離子在阱內(nèi)一特定軌道上穩(wěn)定旋轉(zhuǎn)， 改變端電極電壓，不同m/z離子端電極電壓，不同離子飛出阱到達檢測器 Page ? 22 270v 負高壓 負高壓 抽真空 試樣 離子流 接 收 器 漂移時間 Pag
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